双侧脑室引流联合脑脊液置换治疗重型脑室出血的临床研究

目的探讨治疗重型脑室出血的有效治疗方法。方法将52例重型脑室出血患者作为治疗组,行双侧脑室外引流术联合脑脊液置换,每天2次向脑室内注入尿激酶2～4万U,夹管2h后开放引流血性脑脊液。术后每2～3d复查头部CT,脑室内积血基本清除后拔管。将以往单侧脑室引流的45例作为对照组。结果术后72h,治疗组意识转清率升高;术后第7天,治疗组血肿清除率提高,血肿引流时间缩短。4周后根据GOS评分,治疗组优良16例,轻残26例,重残6例,死亡4例;对照组优良7例,轻残18例,重残11例,死亡9例,以优良和轻残视为有效,治疗组有效率80.8%,对照组有效率55.6%,两组比较差异有统计学意义。结论该方法是一种治疗脑室出血的有效方法,可提高脑室出血患者的生存质量和生存率。

不同体积分数脐血血清与骨髓间充质干细胞的增殖

背景:制备脐血血清体外扩增、培养间充质干细胞成为目前的研究热点,但尚无不同体积分数脐血血清对骨髓间充质干细胞的增殖能力的影响的报道。目的:观察比较不同体积分数的脐血血清对骨髓间充质干细胞的增殖能力的影响。方法:无菌条件下取20例人骨髓标本,采用密度梯度离心法提取单个核细胞,分别用体积分数为5%,7.5%,10%,15%,20%的脐血血清+DMEM/F12培养基,行骨髓间充质细胞培养,取第3代细胞,用MTT法观察不同体积分数的脐血血清对间充质干细胞的增殖能力的影响。结果与结论:在体积分数5%,7.5%,10%的脐血血清+DMEM/F12培养基组,细胞增殖能力较佳,明显优于体积分数15%,20%的脐血血清+DMEM/F12培养基组,差异有显著性意义(P<0.05)。说明在较低体积分数脐血血清培养体系中,骨髓间充质干细胞增殖状态活跃。

脐带血清体外培养临床应用人骨髓间充质干细胞的方法研究

目的:观察脐带血清等4种不同培养体系体外培养人骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)的效果,建立一种适合临床移植需要的人BM-MSCs培养方法。方法:从20例新鲜成人骨髓穿刺液中分离BM-MSCs,分别用含10%脐带血清、胎牛血清(FCS)、成人血清的DMEM/F12培养基和MesenCult培养基培养,流式细胞仪检测细胞表面抗原,成骨诱导体系及脂肪诱导体系分别诱导各组BM-MSCs定向分化。结果:采用4种培养体系都能从骨髓液中分离培养出BM-MSCs,脐带血清和MesenCult组培养的BM-MSCs在增殖数量和速度上相似,而优于FCS和AB型血清组。脐带血清和MesenCult组培养的BM-MSCs表达CD29、CD73、CD105的阳性率比FCS和AB型血清组高(均P<0.05),而CD31阳性率低于FCS和AB型血清组(P<0.05),脐带血清和MesenCult组培养的BM-MSCs诱导为成骨细胞和脂肪细胞阳性率高于FCS和AB型血清组(P<0.05)。结论:脐带血清与MesenCult组培养的BM-MSCs的纯度和体外诱导分化能力相似,优于FCS和AB型血清组,脐带血清适合临床应用。

骨髓增生异常综合征患者DNMT3A基因突变的情况及临床意义

目的:了解DNMT3A基因突变在骨髓增生异常综合征(MDS)患者中的发生率、分布情况及临床意义。方法:选取2012年4月至2018年6月在湘雅二医院和湘潭市中心医院住院的85例MDS患者为研究对象。提取患者外周血基因组DNA,针对DNMT3A基因突变热点R882位点设计合成引物,采用聚合酶链式反应法扩增DNMT3A基因23号外显子整个编码区基因片段,再将扩增产物纯化后测序,分析DNMT3A基因突变在本组患者中的发生率、分布情况及临床意义。结果:85例MDS患者中检测到5例DNMT3A基因突变,突变阳性率5.9%,其中R882H和R882C基因突变各2例,R882P基因突变1例,未见R882S基因突变。常规化疗联合去甲基化药物地西他滨治疗后,1例患者一度获得血液学完全缓解,复杂染色体核型恢复正常,但是1月后转为急性白血病并发严重感染死亡,1例治疗后稳定,2例治疗后疾病进展,1例死于肺部感染。结论:MDS中DNMT3A基因突变率低,其突变多预示预后较差,并可能更快地向急性髓性白血病转化,选择去甲基化药物治疗可能获益。

脑室内灌注尿激酶对脑室出血后脑脊液中D-二聚体含量的影响

目的通过研究脑室内灌注尿激酶对脑室出血（IVH）后脑脊液中D-二聚体含量的影响，探讨脑室出血后脑室内应用尿激酶（UK）的可行性。方法34例重型脑室出血患者，其中17例行单纯侧脑室穿刺外引流（external ventncular drainage，EVD）治疗，为non-UK组；另外17例行EVD＋尿激酶脑室内灌注（intraventricular infusion of urokinase，IVIU）治疗，为UK组。采用ELISA方法测量各组穿刺后0、2、4、6及12h时间点脑脊液中D-二聚体含量。结果重复测量方差分析显示，时间因素、时间与分组因素的交互作用和分组因素均有统计学意义。LSD法两两比较显示，与相应时间0h时间点比较，non-UK组仅12h轻度升高，而UK组2、4、6及12h均明显升高（P〈0．05）。相同时间点两组间t检验显示，0h和12h两组间差异无统计学意义；2、4及6hUK组明显高于non-UK组（P〈0．05）。结论脑室内灌注尿激酶能显著升高脑室出血后脑脊液中D-二聚体的含量，提示EVD＋IVIU是治疗重型脑室出血的一种安全、有效方法。

脑室出血时脑脊液中尿激酶型纤溶酶原激活物受体的动态变化及意义

目的探讨脑室出血后脑室系统是否存在纤溶系统活性物质基础，应用外源性尿激酶（UK）是否有助于增强纤溶的活性。方法34例脑室出血经侧脑室穿刺外引流治疗的患者随机分为UK组和non—UK组。UK组均行侧脑室穿刺＋脑室内UK灌注治疗；而non—UK组单纯行侧脑室穿刺外引流治疗。留取穿刺后0、2、4、6、12h脑室外引流脑脊液标本2mL，采用ELISA法测量每组各时间点脑脊液标本中尿激酶型纤溶酶原激活物受体（UPAR）水平。结果non—UK组脑室出血后6～24h、24～48h、48～72h三个时间段脑脊液中UPAR水平比较差异无统计学意义。UK组经脑室穿刺注入UK2h后脑室外引流脑脊液中UPAR水平增高。结论脑室出血后脑室系统中存在纤溶系统活性物质基础，在脑室出血后的脑室系统内应用UK是可行的。

“红细胞预灌注法”联合“立减递增提速法”白细胞去除术治疗高白细胞性白血病并中重度贫血的临床研究

目的:探索"红细胞预灌注法"联合"立减递增提速法"白细胞去除术治疗高白细胞性白血病并中、重度贫血的有效性及安全性。方法:对照组应用"立减递增提速法"白细胞去除术;治疗组应用红细胞2~3 U预灌注白细胞管道后再连接血管运行,其余操作同对照组。结果:两组都能有效清除白细胞;治疗组"急性失血"症状发生率低于对照组,差异有统计学意义。结论:"红细胞预灌注法"联合"立减递增提速法"白细胞去除术能有效清除白血病细胞,并能降低"急性失血"症状的发生率,值得临床推广应用。

miRNA-155在急性髓性白血病不同阶段中的表达及临床意义

目的:分析血浆miRNA-155在急性髓性白血病不同阶段中的表达。方法:选取急性髓性白血病21例和健康对照组20例,抽取空腹静脉血,离心后取血浆,直接扩增目的 miRNA,并反转录为cDNA,qRT-PCR方法检测血浆miRNA-155的表达。结果:急性髓性白血病初诊组血浆miRNA-155的表达显著高于正常对照组和缓解组,初诊组与未缓解组之间无统计学差异,缓解组与未缓解组之间有统计学差异。结论:血浆miRNA-155在急性髓性白血病不同阶段中的表达不同,有一定的诊断、治疗、预后评估意义。

硼替佐米联合阿霉素、地塞米松治疗初治多发性骨髓瘤的疗效观察

目的比较硼替佐米联合阿霉素、地塞米松方案(PAD方案)与长春新碱联合阿霉素、地塞米松方案(VAD方案)治疗初治多发性骨髓瘤(MM)的疗效和不良反应。方法 PAD方案组41例患者给予硼替佐米1.3mg/m2静推,第1、4、8、11天;阿霉素10mg/d静滴,第1～4天;地塞米松20 mg/d静滴,第1～4天,3周为1个周期,每例接受2～6个周期化疗。40例VAD方案组患者予长春新碱0.5mg/d静滴,第1～4天;阿霉素10mg/d静滴,第1～4天;地塞米松20mg/d静滴,第1～4天,4周为1个周期,每例接受2～8个周期化疗。化疗2个周期后评价两组患者的疗效和不良反应。结果两组患者均可评价疗效和不良反应。化疗2个周期后,PAD方案组获显效22例(53.7%),VAD方案组获显效10例(25.0%),差异有统计学意义(P<0.001)。两组主要不良反应包括消化道症状、周围神经炎、血小板减少、白细胞减少和感染,多为1～2级,经对症治疗后均可缓解。结论 PAD方案治疗初治MM的显效率明显高于VAD方案,不良反应可耐受。

原发于鼻腔鼻窦恶性淋巴瘤25例临床研究

目的提高对鼻腔鼻窦恶性淋巴瘤的诊断和治疗水平。方法对１９８７年～１９９８年收治的３２３例非霍奇金淋巴瘤中２５例鼻腔鼻窦恶性淋巴瘤进行临床症状、体征、影像学、生化、病理、治疗和预后分析。结果临床症状缺乏特征性，鼻腔检查表现为肿物堵塞、粘膜溃疡和隆起不平，易累及上颌窦和颈部淋巴结。Ｘ线平片显示上颌窦密度增高、粘膜肥厚，ＣＴ显示鼻窦软组织密度影、粘膜肥厚和骨质破坏，大部分病例血沉、乳酸脱氢酶、血清铜／锌比值升高，确诊依靠病理活检。单纯化疗、放疗易复发，化疗联合放疗效果较好。结论重视鼻腔鼻窦病变和颈淋巴结活检，注意取材，可提高早期诊断率。Ｘ线平片和ＣＴ检查相结合，有利于诊断和临床分期。血沉、乳酸脱氢酶、血清铜／锌比值可作为预示病变进展和观察疗效的指标。治疗以ＣＨＯＰ方案化疗联合局部放疗为宜，ＡＰＢＳＣＴ可改善预后。

“立减递增提速法”白细胞去除术治疗高白细胞性急性白血病

目的:探索"立减递增提速法"白细胞去除术治疗高白细胞性急性白血病的白细胞清除作用及安全性。方法:白细胞去除术一开始立即将全血流速减低为20ml/min,每隔5min将全血流速增加10ml/min,直至达到机器自动运行的流速。开始采集白细胞时,将速率提升至5-10ml/min。结果:"立减递增提速法"治疗前后白细胞计数比较有统计学意义,与传统方法比较,低血钙和低血容量症状发生率下降,去除时间缩短,病人在CR、PR、NR、早期死亡率方面比较无统计学意义。结论:"立减递增提速法"白细胞去除术清除白细胞的效果与传统去除方法相同,不良反应低血钙、低血容量反应发生率下降,去除时间缩短,值得临床推广应用。

脑室出血患者脑室内灌注尿激酶时脑脊液中D-二聚体的动态变化及意义

目的探讨脑室出血后脑室系统是否具有纤溶能力及应用外源性尿激酶(UK)是否有助于增强纤溶的活性。方法 34例脑室出血患者,其中17例患者行侧脑室穿刺外引流,为no-UK组;另17例患者行侧脑室穿刺外引流+尿激酶脑室内灌注治疗,为UK组。采用ELISA法测量穿刺后0、2、4、6、12 h点脑脊液标本中D-二聚体(D-D)含量。结果 no-UK组脑脊液中D-D含量随时间而增加,相邻2个时间点间比较P<0.05;UK组5个时间点脑脊液D-D含量进行两两比较,与0 h点比较,2、4 h点显著升高(P<0.01),6、12 h点仍高于0 h点(P<0.05)。两组间D-D含量在2 h(P<0.01)和4 h(P<0.05)时比较差异有统计学意义,0、6、12 h时比较差异无统计学意义(P>0.05)。重复测量数据的方差分析显示时间因素、时间因素与分组因素的交互作用、分组因素均有统计学意义。结论脑室出血后脑脊液中D-D含量随时间增加,且可被外源性UK的应用而增强,表明在脑室出血后的脑室系统内应用UK是可行的。

非髓性白血病的其他恶性血液病中DNMT3A基因突变的检测及临床意义

目的:了解DNMT3A基因突变在非髓性白血病的其他恶性血液肿瘤患者中的发生率、分布情况及临床意义。方法:选取196例非髓性白血病的其他血液肿瘤患者为研究对象,提取患者外周血基因组DNA,针对DNMT3A基因突变热点R882位点设计引物,采用聚合酶链式反应(PCR)法扩增DNMT3A基因23号外显子整个编码区基因片段,再将扩增产物纯化后测序,分析DNMT3A基因突变在本组恶性血液病患者中的发生率、分布情况及临床意义。结果:在57例非霍奇金淋巴瘤及34例骨髓增生异常综合征患者中各检出1例伴DNMT3A基因突变,在25例急性淋巴细胞白血病、45例多发性骨髓瘤和35例骨髓增殖性肿瘤患者中均未检测到DNMT3A基因突变。结论:非髓性白血病的其他血液肿瘤患者中DNMT3A基因突变少见,伴DNMT3A基因突变的1例T淋巴母细胞白血病/淋巴瘤患者预后不良,联合去甲基化药物的化疗方案使伴该基因突变的1例骨髓增生异常综合征患者一度获得血液学完全缓解,但短期内转为急性白血病并发严重感染死亡。

地西他滨联合去甲氧柔红霉素对DNMT3A突变阳性AML细胞的增殖和凋亡的影响

【目的】探讨地西他滨（DAc）联合去甲氧柔红霉素（IDA）对伴DNA甲基转移酶3A基因（DNMT3A）突变阳性急性髓系白血病（AML）细胞株0CI-AML3的增殖抑制和促凋亡作用。【方法】使用不同浓度IDA单药或联合低浓度DAC（2μmol／L）干预0CI-AML3细胞48h后，采用MTT检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞凋亡。【结果】相对低浓度的IDA（≤40nmol／L）对0CI-AML3细胞无显著增殖抑制效应；2μmol／LDAC联合IDA对OCI-AML3细胞的增殖抑制率显著高于IDA单药（P〈0．01）；DAC联合IDA能显著提高0CI-AML3细胞的凋亡率（P〈0．001）。【结论】伴DNMT3A突变的AMI。细胞对相对低浓度的IDA原发耐药，而DAC可提高其对IDA的敏感性。

尿激酶型纤溶酶原激活物受体的研究进展及与脑室出血纤溶治疗的关系

尿激酶型纤溶酶原激活物受体是近几年基础研究的热点,由它介导的功能包括纤溶降解、细胞迁移、趋化作用、细胞黏附、信号转导等,但其主要功能是纤溶降解。目前向脑室内注射尿激酶联合脑室外引流是治疗脑室出血患者的公认纤溶方法,因此人类脑室系统是否具有尿激酶型纤溶酶原激活物受体、是否具有纤溶能力已成为临床医师关注的焦点。现就此相关问题加以综述。

湖南省多发性骨髓瘤诊治现状

目的:国内多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)临床大数据较少,本研究旨在分析湖南省多中心1年期间新诊断多发性骨髓瘤(newly diagnosed multiple myeloma,NDMM)患者的临床资料,了解湖南省MM患者真实的临床特征和诊疗情况,加强对MM规范化诊疗流程和诊疗方案的认识。方法:收集湖南省12家大型综合性医院2019年1月1日至12月31日收治的共529例NDMM患者的临床资料,包括基线资料、治疗方案、疗程和不良反应等。采用SPSS 21.0统计软件分析患者的临床特征、治疗情况及安全性。结果:529例NDMM患者确诊年龄33~90(中位数64)岁,男女比为1.38?1;临床特征占比从高到低依次为骨痛(77.7%)、贫血(66.8%)、肾功能不全(40.6%)、高钙血症(15.1%)。分型:IgG型46.5%,IgA型24.6%,IgD型2.6%,IgM型0.8%,轻链型15.7%,双克隆型3.0%,不分泌0.6%,缺失6.2%。DS(Durie-Salmon)分期Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期分别为4.5%、10.6%、77.3%,缺失40例(7.6%);国际分期系统(International Staging System,ISS)分期Ⅰ期、Ⅱ、Ⅲ期分别为10.4%、24.4%、47.6%,缺失93例(17.6%);修订的国际分期系统(Revised International Staging System,R-ISS)分期Ⅰ期、Ⅱ、Ⅲ期分别为5.5%、27.0%、23.1%,缺失235例(44.4%),其中中南大学湘雅三医院单中心98例NDMM患者中DS分期缺失2.0%,ISS分期缺失12.3%,R-ISS分期缺失12.3%。治疗情况:529例患者中475例接受治疗,接受治疗率为89.8%;67.4%的患者能规范完成4个疗程诱导阶段的化学治疗(以下简称化疗),其中90.3%的患者接受1次以上以蛋白酶体抑制剂为基础的化疗方案,67.2%接受1次以上以免疫调节剂为基础的化疗方案,59.8%的患者接受1次以上含蛋白酶体抑制剂与免疫调节剂的联合化疗方案。疗效:4个疗程组总缓解率(overall response rate,ORR)及高质量缓解率(high quality response rate,HQR)均优于2个疗程组(ORR为85%vs 65%,P=0.006;HQR为68.3%vs 24.0%,P<0.001),规范化治疗组HQR优于非规范化治疗组(65.1%vs 48.2%,P=0.035)。治疗期间出现的不良反应:血液学毒性17.5%、外周神经病变24.8%、胃肠道不良反应23.8%、肺部感染25.9%、带状疱疹4.6%、静脉血栓1.7%。结论:2019年期间湖南省NDMM的漏诊率较高,中位确诊年龄较大;诊断精准度不高,特别是在分期及危险分层上各医疗中心差异较大,将近一半的NDMM患者诊断时没有作出R-ISS分期;细胞遗传学数据缺失,需在后续研究中跟进。NDMM患者就诊时骨痛、贫血症状占比较高;接受治疗的患者中蛋白酶体抑制剂和/或免疫调节剂化疗方案使用率较高,但各医疗中心差距明显,规范化治疗尚待加强;化疗期间的安全性总体可控。

红细胞预灌注法在高白细胞性白血病中重度贫血患者白细胞去除术中的应用

[目的]探讨红细胞预灌注联合“立减递增提速法”白细胞去除术在治疗高白细胞性白血病合并中重度贫血患者的有效性及安全性。【方法】选择2012年1月至2015年12月于本院就诊的82例高白细胞白血病合并中重度贫血患者为研究对象，随机分为观察组与对照组，其中观察组（40例）：采用红细胞预灌注联合“立减递增提速法”白细胞去除术，对照组（42例）：采用“立减递增提速法”白细胞去除术。观察两组患者治疗前后血细胞的变化及白细胞去除过程中不良反应的发生率。【结果】治疗后两组患者外周血白细胞均显著下降，观察组缺血缺氧和低血容量症状的发生率较对照组低，差异有统计学意义（P〈0．05）。【结论】红细胞预灌注联合“立减递增提速法”白细胞去除术能有效清除高白细胞性白血病患者白细胞，并能显著降低缺血缺氧、低血容量症状的发生率，值得临床推广应用。