目的探讨抑制PC3细胞中Ku80表达水平并结合热疗对前列腺癌细胞的辐射敏感性的影响。方法构建调节Ku80表达的siRNA载体,筛选转染后的PC3-Ku80(Ku80组)、PC3-β-actin(Vector组)、PC3-Ku80-siRNA(RNAi组)、PC3-β-actin-siRNA(Scramble组)...目的探讨抑制PC3细胞中Ku80表达水平并结合热疗对前列腺癌细胞的辐射敏感性的影响。方法构建调节Ku80表达的siRNA载体,筛选转染后的PC3-Ku80(Ku80组)、PC3-β-actin(Vector组)、PC3-Ku80-siRNA(RNAi组)、PC3-β-actin-siRNA(Scramble组)等4种稳定细胞株。在不同的条件下分别用γ射线照射后行Annexin V-FIC双染色及DAPI、TUNNEL染色检测细胞周期与凋亡情况,另取一组PC3-Ku80-siRNA细胞经42℃水浴30min,转37℃细胞培养12h再行射线照射,通过细胞周期与凋亡检测等了解不同组间放射效果的差异。结果 Western blot和RT-PCR分析表明转染后可明显调节PC3细胞中Ku80的表达,稳定转染的对数生长期细胞经γ射线照射,细胞周期与凋亡检测结果显示随着Ku80表达的降低,细胞对放射治疗更趋敏感,5组细胞随γ射线照射剂量的增加,细胞存活率下降,其中RNAi组的细胞存活率均低于对照组和Ku80组,5组比较差异有统计学意义(F=0.953,P<0.001)。PC3-Ku80-siRNA细胞经热休克处理后再行射线照射,其存活率明显低于未经热休克处理的细胞株。结论抑制前列腺癌细胞中Ku80蛋白表达水平,结合热休克,可明显提高肿瘤组织对放射治疗的敏感性,这可能是一个较为理想的综合治疗前列腺癌的方法。展开更多
文摘目的探讨抑制PC3细胞中Ku80表达水平并结合热疗对前列腺癌细胞的辐射敏感性的影响。方法构建调节Ku80表达的siRNA载体,筛选转染后的PC3-Ku80(Ku80组)、PC3-β-actin(Vector组)、PC3-Ku80-siRNA(RNAi组)、PC3-β-actin-siRNA(Scramble组)等4种稳定细胞株。在不同的条件下分别用γ射线照射后行Annexin V-FIC双染色及DAPI、TUNNEL染色检测细胞周期与凋亡情况,另取一组PC3-Ku80-siRNA细胞经42℃水浴30min,转37℃细胞培养12h再行射线照射,通过细胞周期与凋亡检测等了解不同组间放射效果的差异。结果 Western blot和RT-PCR分析表明转染后可明显调节PC3细胞中Ku80的表达,稳定转染的对数生长期细胞经γ射线照射,细胞周期与凋亡检测结果显示随着Ku80表达的降低,细胞对放射治疗更趋敏感,5组细胞随γ射线照射剂量的增加,细胞存活率下降,其中RNAi组的细胞存活率均低于对照组和Ku80组,5组比较差异有统计学意义(F=0.953,P<0.001)。PC3-Ku80-siRNA细胞经热休克处理后再行射线照射,其存活率明显低于未经热休克处理的细胞株。结论抑制前列腺癌细胞中Ku80蛋白表达水平,结合热休克,可明显提高肿瘤组织对放射治疗的敏感性,这可能是一个较为理想的综合治疗前列腺癌的方法。