炎症性肠病患者T淋巴细胞亚群的改变及临床意义

目的：探讨炎症性肠病（ＩＢＤ）患者外周血Ｔ淋巴细胞亚群的变化特点及临床意义。方法：对临床确诊的１８例溃疡性结肠炎（ＵＣ）和９例Ｃｒｏｈｎ病（ＣＤ）患者，于疾病的不同时期用荧光单克隆抗体标记一流式细胞仪技术检测其外周血Ｔ淋巴细胞亚群的变化，并结合临床和病理资料进行综合分析。结果：ＵＣ患者缓解期时的ＣＤ３＋、ＣＤ８＋和自然杀伤（ＮＫ）细胞与对照组比较无显著差异；但活动期时，其ＣＤ８＋和ＮＫ细胞数明显下降（ＣＤ８＋：活动期：２３．１％±１．０％，对照组：３１．３％±１．２％，Ｐ＜０．０５；ＮＫ：活动期：９．８％±１．０％，对照组：１５．１％±１．１％，Ｐ＜０．０１），ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比值上升（活动期：１．８±０．１，对照组：１．４±０．０２，Ｐ＜０.０５）；活动期ＣＤ患者的ＣＤ８＋细胞和ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比值（４３．０％±４．４％和０．６±０．１）变化却与ＵＣ组活动期呈相反趋势（Ｐ＜０．０１）。结论：Ｔ淋巴细胞亚群改变在ＩＢＤ的发病机制中可能起重要作用；ＵＣ和ＣＤ的细胞免疫机制不同；外周血ＣＤ４+、ＣＤ８＋、ＮＫ细胞和ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比值可作为检测ＵＣ病情变化和疗效考核的敏感指标。

人结肠癌细胞系中癌相关基因的表达及表型遗传修饰的影响

目的 观察DNA甲基化和组蛋白乙酰化对人结肠癌细胞系癌相关基因的表达和细胞周期的影响。方法 培养 2种结肠癌细胞系SW 1 1 1 6和Colo 32 0 ,分别以去甲基化制剂 5 氮脱氧胞苷 (5 aza 2′ deoxycytidine ,5 aza dC)和 (或 )组蛋白脱乙酰化酶 (histonedeacetylase ,HDAC)抑制剂trichostatinA(TSA)及丁酸盐干预细胞。提取细胞总RNA ,以RT PCR和定量RT PCR法研究抑癌基因p1 6 INK4A、APC、p2 1 WAF1 、p5 3和 p73以及癌基因c myc和c Ki ras、凋亡抑制基因survivinmRNA表达水平 ;并运用流式细胞术检测细胞周期变化。结果 正常情况下 ,SW 1 1 1 6和Colo 32 0细胞系中均有较弱的 p1 6 INK4A和APC表达 ;两种结肠癌细胞系 p2 1 WAF1 表达缺如 ,而 p5 3、p73和c myc、c Ki ras以及survivin均表达。以 5 aza dC干预后 ,p1 6 INK4A和APC表达增强 ,且不同的结肠癌细胞系表达增强最明显时 5 aza dC干预的时间与浓度不同。相反 p2 1 WAF1 仍无明显表达。值得注意的是这两个细胞系经TSA或丁酸盐处理后 ,p2 1 WAF1 转录水平显著上调。p5 3、p73、c myc、c Ki ras和survivin基因在干预前后表达无明显变化。另外 ,5 aza dC并不能改变细胞周期 ,而TSA或丁酸盐使细胞阻滞于G1 期。结论 两种人结肠癌细胞系中 ,p1

表型遗传修饰对人结肠癌细胞周期和抑癌基因表达的调控

目的 分析和探讨同一结肠癌细胞系DNA甲基化和组蛋白乙酰化对抑癌基因表达和细胞周期的影响。方法 培养结肠癌细胞HT 2 9、SW 1116和Colo 32 0 ,分别以去甲基化制剂 5 氮脱氧胞苷 (5 aza dC)和 (或 )组蛋白脱乙酰化酶 (HDAC)抑制剂trichostatinA(TSA)及丁酸盐干预细胞。提取基因组DNA和RNA ,部分行甲基化特异性PCR(MSP)检测 p16 INK4A基因启动子区甲基化情况 ;以RT PCR研究p16 INK4A和p2 1WAF1mRNA表达水平 ;同时以流式细胞仪分析SW 1116和Colo 32 0细胞周期。结果 干预前 ,HT 2 9、SW 1116和Colo 32 0三种结肠癌细胞系中均有较弱的 p16 INK4A表达 ;SW 1116和Colo 32 0细胞的p2 1WAF1表达缺如。对于HT 2 9细胞 ,1μmol/L的 5 aza dC干预 2 4h后 ,p16 INK4A基因启动子区甲基化水平明显降低而mRNA水平显著增高 ,10 μmol/L干预时则无显著改变。在SW 1116和Colo 32 0细胞中 ,5 aza dC干预后 p16 INK4A表达增强 ,且以 10 μmol/L或 5 μmol/L浓度干预 2 4h者为最明显 ,相反p2 1WAF1仍无明显表达。该两个细胞系经TSA或丁酸盐处理后 ,p2 1WAF1转录水平显著上调。另外 ,该两个细胞系中 ,5 aza dC并不能改变细胞周期 ,而TSA或丁酸盐使细胞阻滞于G1期。结论 三种人结肠癌细胞中 ,p16 INK4A基因的表达均?