MTA3通过β-hCG调控上皮性卵巢癌侵袭转移的机制研究

目的探讨上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer,EOC)转移相关基因3(metastasis associated gene 3,MTA3)的表达及其与肿瘤侵袭转移的关系。方法收集晚期(FIGOⅢ-Ⅳ期)EOC术中冰冻标本(8例)及石蜡标本(21例),qRT-PCR和IHC检测卵巢部位肿瘤组织和转移瘤组织中MTA3的表达;Transwell细胞迁移实验观察下调MTA3、下调β-hCG、同时下调MTA3和β-hCG的EOC细胞株(SKOV3和ES-2)体外迁移力的变化。EOC细胞体外分别转染50、100、200 nmol/L siRNA-MTA3,qRT-PCR检测分析MTA3和β-hCG的表达相关性;qRT-PCR及Western印迹法检测分析下调MTA3对β-hCG以及上皮间质转化(EMT)标记物E-cadherin、N-cadherin表达的调控作用。结果qRT-PCR、IHC示EOC转移瘤组织中MTA3的表达显著低于卵巢部位肿瘤组织(P<0.05);Transwell细胞迁移实验示下调MTA3显著增强了EOC细胞的迁移能力(P<0.001),下调β-hCG显著降低了EOC细胞的迁移能力(P<0.001),下调MTA3下调β-hCG显著降低了EOC细胞的迁移能力(P<0.001);qRT-PCR示MTA3与β-hCG的表达呈显著负相关(P<0.05);qRT-PCR、Western印迹法示MTA3下调时,β-hCG和N-cadherin的表达显著上调,而Ecadherin的表达则显著下调。结论 MTA3可能通过β-hCG干预EM T进程,进而调控上皮性卵巢癌侵袭转移。

Krt7和p16在宫颈病变进展中的临床意义

为探讨Krt7和p16在宫颈病变进展和临床诊治中的意义。收集慢性宫颈炎、宫颈低级别鳞状上皮内病变(Low-grade Squamous Intraepithelial Lesion,LSIL)、宫颈高级别鳞状上皮内病变(High-grade Squamous Intraepithelial Lesion,HSIL)和宫颈癌的石蜡标本及临床资料,免疫组织化学法检测石蜡组织中Krt7和p16的表达,统计分析Krt7和p16的表达与慢性宫颈炎、LSIL、HSIL和宫颈癌的相关性。结果显示,Krt7在慢性宫颈炎、LSIL、HSIL和宫颈癌中的阳性表达率呈逐渐递增的趋势,依次为24%(10/41)、13%(4/30)、71%(31/44)、88%(22/25),差异具有统计学意义(P<0.05);Krt7阳性表达率在LSIL与HSIL、LSIL与宫颈癌、HSIL与宫颈癌之间存在统计学差异(P<0.001),但在宫颈炎与LSIL之间没统计学差异(P=0.251);p16在慢性宫颈炎、LSIL、HSIL和宫颈癌中的阳性表达率呈现逐渐递增的趋势,依次为39%(16/41)、60%(18/30)、88.6%(39/44)、100%(25/25),差异具有统计学意义(P<0.05);p16阳性表达率在慢性宫颈炎与LSIL,LSIL与HSIL,LSIL与宫颈癌,HSIL与宫颈癌之间均存在统计学差异(P<0.001);Krt7和p16均阳性表达者在慢性宫颈炎、LSIL、HSIL、宫颈癌中的比例分别为2.44%(1/41)、3%(3/30)、68.18%(30/44)、88.00%(22/25),差异具有统计学意义(P<0.05)。Krt7、p16、联合检测Krt7和p16诊断宫颈病变的ROC曲线下面积分别为0.67、0.72、0.23(P<0.01)。结论:Krt7表达阴性的LSIL,进展为HSIL或宫颈癌的风险可能较低,无需临床过多干预治疗;Krt7表达阳性的LSIL进展成HSIL或宫颈癌的风险可能较高,应当引起临床重视;联合检测Krt7和p16,可能在临床中能更有效的筛选出进展为HSIL的高危人群。

人卵巢癌裸鼠卵巢原位移植瘤模型的构建

为探讨人卵巢癌进展机制的相关研究,构建适宜的体内动物模型。采用慢病毒转染技术,构建稳定过表达绿色荧光报告基因(GFP)的人EOC细胞模型:SKOV3(人卵巢浆液性腺癌细胞株)和ES-2(人卵巢透明细胞癌细胞株);异氟烷吸入麻醉4-6周龄BALB/C(nu/nu)雌性裸鼠,从裸鼠背部正中纵切口进入腹腔,显微多点注射法分别将细胞模型悬液,移植于裸鼠的单侧卵巢,每组6只裸鼠;Night OWL活体成像系统动态观察裸鼠移植瘤生长和转移情况;移植术后4-6周解剖裸鼠,取卵巢和转移瘤组织行HE染色。结果显示,携带GFP的EOC细胞模型SKOV3和ES-2,均可成功构建裸鼠卵巢原位移植瘤模型,裸鼠未发生手术原因死亡,成功率均100%;活体成像系统通过检测GFP的荧光强度和范围,能够动态监测裸鼠移植瘤生长情况;SKOV3细胞模型构建的卵巢癌和转移瘤组织,HE染色观察病理特征符合人卵巢浆液性腺癌;ES-2细胞模型构建的卵巢癌和转移瘤组织,HE染色观察病理特征符合人卵巢透明细胞癌。由此可知,异氟烷吸入麻醉、从背部正中纵切口进入腹腔、显微多点注射法移植携带GFP的EOC细胞模型,能成功构建可动态监测的裸鼠卵巢原位移植瘤动物模型;该动物模型与人卵巢癌生物学特征类似,适宜作为研究人卵巢癌演变进展的体内模型。

宫颈脱落细胞蜡块在宫颈病变初筛中的作用

目的探索价格低廉、制片简便且可长期保存的宫颈脱落细胞蜡块制片在宫颈病变初筛中的临床意义。方法收集宫颈病理诊断与新柏氏液基细胞学技术(thinprep cytologic test,TCT)诊断相符的TCT剩余样本,分为未见上皮内病变或恶性细胞(negative for intraepithelial lesion or malignancy,NILM)、低级别鳞状上皮内病变(lowgrade squamous intraepithelial lesion,LSIL)、高级别鳞状上皮内病变(high-grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)及鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma of cervix,SCC)各30例,将同一样本分别进行TCT制片及细胞蜡块制片,H-E染色法、免疫组织化学法(mmunohistochemistry,IHC)分别检测Ki-67、P16INK4的表达,分析细胞蜡块制片对比TCT制片在宫颈病变初筛中的临床意义。结果宫颈脱落细胞蜡块制作的成功率约90. 8%,H-E染色病理阅片满意度不差于TCT制片; IHC检测Ki-67、P16INK4的表达与TCT制片差异无统计学意义(P>0. 05)。结论宫颈脱落细胞蜡块制片用于宫颈病变初筛的技术方法具有临床可行性,结合其优势可考虑替代TCT制片在临床推广。

喀什地区维吾尔族妇女血脂水平与子宫颈病变相关性

目的探讨喀什地区维吾尔族（维族）妇女血脂水平与子宫颈病变及其病变程度的相关性。方法 79例子宫颈病变患者为观察组,其中CIN 1级57例,CIN 2级14例,CIN 3级5例,宫颈癌3例;无子宫颈病变者158例为对照组。检测2组血脂水平,采用logistic回归分析血脂水平对罹患子宫颈病变的相对危险度,采用Spearman相关分析法分析子宫颈病变程度与血脂水平间相关性。结果观察组总胆固醇（total cholesterol,TC）（（4.29±0.90）mmol/L）、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein-cholesterol,LDL-C）（（2.43±0.70）mmol/L）和三酰甘油（triacylglycerol,TG）（（1.17±0.80）mmol/L）水平均高于对照组（（3.35±1.10）、（1.95±0.80）和（0.87±0.50）mmol/L）（P〈0.05）,高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein-cholesterol,HDL-C）水平与对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）;高TG水平（OR=5.529,95%CI：1.481-20.647,P=0.011）和低HDL-C水平（OR=0.420,95%CI：0.224-0.788,P=0.007）为患子宫颈疾病的危险因素;TC和LDL-C水平与子宫颈病变程度呈正相关（r=0.314,P=0.005;r=0.398,P=0.000）。结论血清高TG和低HDL-C水平可能增加患子宫颈病变的风险;子宫颈病变患者TC和LDL-C水平升高可能与病变进展有关。