异常黏液质证候及阳痿病证模型大鼠睾丸间质细胞类固醇激素合成急性调节蛋白的表达

目的探讨异常黏液质证候及阳痿病证模型大鼠睾丸间质细胞类固醇合成急性调节蛋白(StAR蛋白)的表达。方法建立异常黏液质证候模型,并筛选出阳痿病证模型后,分为证候模型组、病证模型组、证候用药组及病证用药组,两用药组采用伊木萨克片干预2周后,放免法检测各组血清中睾酮(T)含量,比较各组光镜及电镜下睾丸的形态学变化,免疫组织化学SP法及免疫印迹检测各组大鼠睾丸间质细胞StAR蛋白表达水平。结果 T含量检测结果显示,两模型组外周血清睾酮水平较正常组显著降低(P<0.05),证候用药组较证候模型组T水平显著上升,差异有统计学意义(P<0.05),病证用药组较病证模型组T水平亦有所上升,但差异无统计学意义(P>0.05)。睾丸形态学结果显示,光镜下正常组结构完好,两模型组可见生精细胞数量及层数明显减少,并伴生精上皮脱落,间质细胞数量减少;电镜下两模型组支持细胞核形不规则,胞质电子密度高,内质网扩张,部分生精细胞坏死,两用药组上述改变有所恢复。免疫组织化学结果显示,StAR在各组大鼠睾丸间质中均有表达,两模型组StAR表达水平显著低于正常组,差异有统计学意义(P<0.05);证候用药组StAR表达水平较证候模型组显著回升,而病证用药组StAR表达水平较病证模型组有所回升,但差异无统计学意义(P>0.05)。免疫印迹结果与免疫组织化学结果一致。结论异常黏液质证候及阳痿病证模型大鼠睾丸的形态结构发生病理改变可能与睾酮水平下降、睾丸间质细胞StAR表达下调有关。

异常黏液质证候大鼠阴茎组织差异性表达microRNA的筛选及生物信息学分析

目的筛选异常黏液质证候及药物干预大鼠阴茎组织差异表达microRNA(miRNA),并验证miR-140-3p和miR-486两项关键指标,探讨其生物学意义。方法取80只性功能正常SD雄性大鼠,从中随机抽取10只大鼠设为正常对照组,余70只为造模组,用芫荽实+菠菜实+湿寒性环境的干预条件建立异常黏液质证候模型,通过生物学表征确认模型成功后,随机分为证候模型组、证候药物组。伊木萨克片干预3周后,提取阴茎组织总RNA进行miRNA Illumina高通量测序,筛选出异常黏液质证候及药物干预相关的候选差异表达miRNA,实时荧光定量PCR验证测序结果的可靠性,并进行生物信息学分析。结果筛选出证候相关miRNA候选标志物15个(上调13个,下调2个),伊木萨克片干预相关miRNA候选靶点标志物3个(均下调),验证结果显示miR-486在证候模型组较正常对照组表达升高(P<0.05),miR-486和miR-140-3p在证候药物干预组较证候模型组表达降低(P<0.05)。结论miR-486可作为异常黏液质证标志物,miR-140-3p、miR-486可作为伊木萨克片靶点标志物,但仍需大样本量验证。