硫化氢与内毒素血症大鼠心肌损伤的关系

为探讨硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)与内毒素血症大鼠心肌损伤的关系,采用静脉注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)的方法制备内毒素血症大鼠模型,将雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、LPS组、LPS+炔丙基甘氨酸(propargylglycine,PPG,H2S代谢酶抑制剂)组、LPS+NaHS(H2S供体)组。观察给药后4h内大鼠平均动脉压(mean arterial pressure,MAP)的变化,测定血浆肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和H2S含量,光学显微镜观察心肌组织形态学变化并测定心肌组织中TNF-α、H2S含量及乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH)和髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)的活性。结果如下:(1)与正常对照组相比,LPS组大鼠血压迅速下降,血浆TNF-α、H2S含量显著增高,且血浆中H2S含量与血压呈显著负相关,LPS注射后1、2、4h时相关系数分别为-0.936、-0.913和?0.908(均P<0.05);心肌组织TNF-α、H2S含量及LDH、MPO活性也明显升高,并出现组织损伤;(2)给予PPG能显著抑制血浆TNF-α、H2S含量的增高,并可显著减轻LPS所致的血压下降(均P<0.05)和心肌组织损伤,降低心肌组织中TNF-α、H2S含量及LDH、MPO活性;(3)给予NaHS后,与LPS组相比,大鼠血浆TNF-α、H2S含量增高,血压明显下降(均P<0.05),心肌组织损伤加重,心肌组织中TNF-α、H2S含量及LDH、MPO活性增高。结果提示,内毒素血症大鼠低血压和心肌损伤的部分原因是由于H2S生成增多。

病理生理学网络互动辅助教学平台建设与思考

病理生理学是基础医学与临床医学之间的桥梁学科,主要从功能和代谢的角度研究疾病发生、发展规律及其机制,医学生在本学科的学习中第一次系统地接受各种疾病的知识。目前病理生理学教学模式主要为传统的讲授加入影音、图片、动画的多媒体课堂教学模式。这种教学模式主要是教师的单方面向同学灌输信息,缺乏有效的互动交流。为增强师生间的互动,我教研室进行了网络互动辅助教学平台的建设,搭建了教研室门户网站和学习论坛并不断完善应用,使教学过程信息化、学生学习自主化、学生眼界开阔化、师生交流互动化、教学方式多元化,为师生之间搭建了有效沟通的桥梁,在很大程度上提高了教学质量和教学效率。但随着教学平台的应用,一些问题逐渐凸显,如校园网络环境建设、师生教学理念更新、教学内容的更新及趣味化、网络发展的学科局限性与多学科综合发展的矛盾等问题有待进一步解决。

葛根素对糖尿病致肺损伤的保护作用及其机制的研究

目的:探讨糖尿病对肺脏损伤及葛根素对肺组织影响的可能机制。方法:腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立大鼠糖尿病(DM)模型,SD大鼠随机分为对照组(C组)、糖尿病组(DM组)、糖尿病+葛根素组(DM+Pur组)。检测注药前及模型成立后第20d、40d、60d的血糖及体重的改变。检测肺组织中一氧化氮(NO)和丙二醛(MDA)的含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性。结合光镜、电镜、免疫组织化学染色方法综合评价。结果:①DM组NO、MDA高于C组(P<0.01),SOD活性低于C组(P<0.01),DM+Pur组NO含量明显低于DM组(P<0.01),MDA含量40d开始显著降低(P<0.01),SOD活性高于DM组(P<0.01)。②光镜下见肺泡隔增厚,炎性细胞浸润;电镜下见Ⅱ型肺泡上皮细胞微绒毛数量明显减少,嗜锇性板层小体数量明显减少,细胞间质胶原纤维增生,葛根素可减轻肺组织上述病理性改变。③免疫组织化学染色结果:DM组细胞胞质中可见ONOO-特征性代表物硝基酪氨酸(ni-trotyrosine,NT)黄染阳性信号表达,且较对照组略为增强,DM+Pur组黄染信号较DM组略为减弱。结论:①DM时可发生肺组织损伤,可能与长期高血糖诱导产生大量自由基有关。②NO/ONOO-通路是DM造成肺组织细胞损伤的机制之一。③初步证实葛根素能在一定程度上抑制高血糖诱导肺组织中自由基的过量生成,降低肺组织中的ONOO-的过度表达,这可能是其抗DM时肺组织损伤的作用机制之一。

超氧化物岐化酶参与p38 MAPK介导的肢体缺血预处理对大鼠全脑缺血的保护作用(英文)

目的探讨超氧化物岐化酶(SOD)在p38有丝分裂素激活蛋白激酶(MAPK)介导的肢体缺血预适应(LIP)脑保护中的作用。方法永久凝闭椎动脉的Wistar大鼠,重复夹闭双侧股动脉3次(每次10min,间隔10 min)作为LIP,之后即刻夹闭双侧颈总动脉8 min造成全脑缺血。SB 203580+LIP+脑缺血组于LIP前30min侧脑室内注射p38 MAPK抑制剂SB 203580 (100μmol·L-1, 25μL)。黄嘌呤氧化酶法测定海马SOD活性,硫代巴比妥酸法测定海马丙二醛(MDA)含量,硫堇染色观察海马的组织学分级。结果LIP显著抑制脑缺血引起的海马CA1区SOD活性下降、MDA含量增加及延迟性神经元死亡。预先侧脑室注射SB 203580显著阻断LIP对缺血脑组织的上述保护作用。结论 SOD可能作为p38 MAPK的下游分子参与LIP诱导的脑缺血耐受。

内源性硫化氢在脂多糖引起的肺动脉高压中的作用

为观察硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)引起的肺动脉高压中的作用,应用离体血管环张力测定方法测定肺动脉反应性,采用生物化学方法测定肺动脉组织中H2S产出率和胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionineγ-lyase,CSE)活性,定量PCR方法测定肺动脉组织中CSE表达水平。结果如下:(1)与对照组相比,LPS可显著升高肺动脉平均压(mean pulmonary arterial pressure,mPAP)[(1.82±0.29)kPa vs(1.43±0.26)kPa,P<0.01],降低肺动脉组织中H2S产出率[(26.33±7.84)vs(42.92±8.73)pmol/g wet tissue per minute,P<0.01]和ACh诱导的肺动脉内皮依赖性舒张反应[(75.72±7.22)%vs(86.40±4.40)%,P<0.01];(2)NaHS可部分逆转上述变化,而PPG加剧上述变化;(3)CSE活性和CSE mRNA表达的变化与H2S产出率的变化相同。结果提示,LPS对内皮依赖性舒张反应的抑制导致肺动脉高压的发生,此作用可能与H2S有关。

外源性硫化氢对大鼠内毒素性肺损伤的影响及机制研究

目的：应用H2S供体硫氢化钠（NaHS）,观察外源性H2S对中性粒细胞（PMN）在脂多糖（LPS）刺激大鼠肺内聚集的影响及其机制。方法：采用尾静脉注射致Sprague-Dawley（SD）大鼠内毒素急性肺损伤（ALI）模型,将大鼠随机分为4组（n=8～12）。对照组：由尾静脉注射无菌生理盐水（0.5ml/kg）;LPS组：由尾静脉注射LPS（1mg/kg）;LPS＋NaHS组：注射LPS前10min腹腔注射NaHS（28μmol/kg）;NaHS组：腹腔注射NaHS（28μmol/kg）。6h后光镜下观察各组大鼠肺组织学变化并计数肺泡间隔中PMN数目（number/HP）;脱氧核苷酸末端转移酶介导的原位末端标记技术（TUNEL）测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中PMN凋亡百分率及应用Western blot检测肺组织细胞间黏附分子（ICAM）-1和核转录因子（NF）-κB表达的变化。结果：注射LPS后动物肺组织出现出血、水肿及PMN聚集等病理征象。LPS组大鼠肺组织中PMN数目较对照组显著增加,PMN凋亡百分率下降,ICAM-1、NF-κB表达显著增高;应用NaHS后每高倍镜PMN数目显著减少,PMN凋亡百分率明显增高,ICAM-1、NF-κB表达显著降低,肺组织损伤减轻。单独应用NaHS组大鼠上述各项指标与对照组大鼠相比无显著差异。结论：NaHS可减少PMN在肺内聚集,其机制与其抑制NF-κB通路,从而下调ICAM-1表达、促进PMN凋亡有关。

肢体缺血预处理通过激活有丝分裂原激活蛋白激酶p38减轻脑缺血导致的大鼠海马CA1区神经元凋亡和脑水肿(英文)

目的旨在探讨肢体缺血预处理(LIP)能否减轻脑缺血过程中海马CA1区神经元凋亡和脑水肿。方法72只永久凝闭椎动脉的Wistar大鼠随机分为6组:假手术,LIP(双侧股动脉夹闭10min,间歇10min,3次循环),脑缺血,LIP+脑缺血,DMSO和SB 203580+LIP+脑缺血组。各组大鼠中6只在脑缺血后3d处死,TUNEL染色计数凋亡细胞;6只在脑缺血后24h处死,测定脑组织含水量。结果TUNEL染色显示,假手术和LIP组海马CA1区偶有TUNEL阳性细胞;脑缺血组海马CA1区可见大量棕黄色着色的TUNEL阳性细胞,与假手术组及LIP组相比,细胞数量明显增加;LIP+脑缺血组,TUNEL阳性神经元数与脑缺血组相比明显减少,提示LIP明显抑制缺血引起的海马CA1区锥体细胞凋亡;有丝分裂原激活蛋白激酶p38拮抗剂SB 203580+LIP+脑缺血组,海马CA1区阳性染色锥体细胞明显增加,与DMSO+LIP+脑缺血组相比有显著性差别,表明SB 203580可拮抗LIP抑制凋亡的作用。与假手术和LIP组比较,脑缺血组脑组织含水量明显增加,表明LIP降低了脑缺血引起的脑组织含水量增加;LIP前应用SB 203580可抑制LIP的脑保护作用,使脑组织含水量较LIP+脑缺血组显著增加。结论LIP能够减轻脑缺血过程中海马CA1区神经元凋亡和脑水肿,可能与活化有丝分裂原激活蛋白激酶p38有关。

脂多糖性休克大鼠血浆和主要器官中硫化氢含量的变化和意义

目的:探讨内毒素休克(endotoxic shock,ES)大鼠血浆及肝、肾、心、肺、主动脉等主要器官组织中内源性硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)的含量变化及意义。方法:用静脉注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)法制备LPS攻击大鼠模型,将雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、LPS组、LPS+硫氢化钠(NaHS,H2S供体)组、LPS+炔丙基甘氨酸(PPG,H2S代谢酶抑制剂)组。观察给药后240 min内大鼠平均动脉压(mean arterial pressure,MAP)的变化及测定血浆和以上主要器官中H2S含量,并分析其相关性;光镜观察主要器官的形态学变化。结果:与正常对照组相比,LPS组大鼠血压迅速下降,血浆H2S含量于LPS注射后显著增高,肝、肾、心、肺和主动脉组织中H2S含量亦明显增高(均P<0.05),并出现组织结构损伤;给予PPG能显著抑制血浆以及各组织中H2S含量的增高,并可显著减轻LPS所致的血压下降(均P<0.05)和组织损伤;而给予H2S供体NaHS后,与LPS组相比,大鼠血浆以及各组织中H2S含量显著增高,血压明显下降(均P<0.05),组织损伤加重。LPS攻击大鼠血浆及组织中H2S含量与血压呈高度负相关(均P<0.05)。结论:H2S是一种新的内源性介质,可能参与了ES的一系列病理生理过程。

凝闭双侧椎动脉预处理对大鼠全脑缺血损伤的防护作用

目的:观察凝闭双侧椎动脉与夹闭双侧颈总动脉之间的不同时间间隔对Pulsinelli四血管闭塞法全脑缺血模型的影响、以及在凝闭单侧椎动脉的基础上夹闭双侧颈总动脉后的脑缺血的特点。方法:84只Wistar大鼠,随机分为以下4组:对照组、双侧椎动脉凝闭组、全脑缺血组、单侧椎动脉凝闭+双侧颈总动脉夹闭组。全脑缺血组中,根据凝闭双侧椎动脉与夹闭双侧颈总动脉之间的时间间隔不同,又分为24 h间隔4、8 h间隔和72 h间隔3个亚组。观察大鼠脑缺血过程中的反应包括瞳孔散大、对光反射等情况,脑缺血后恢复翻正反射所需要的时间、以及动物的一般状况,并应用硫堇染色法观察海马CA1区锥体神经元迟发性死亡的情况。结果:全脑缺血72 h间隔亚组的大鼠,脑缺血过程中的反应、脑缺血后的一般状况和锥体神经元迟发性死亡程度均明显重于全脑缺血24 h间隔亚组及48 h间隔亚组,但24 h间隔亚组与48 h间隔亚组之间无显著差异。单侧椎动脉凝闭+双侧颈总动脉夹闭组大鼠的凝闭侧瞳孔散大、对光反射消失、海马CA1区神经元大量死亡;而未凝闭侧未见上述相关变化。结论:凝闭双侧椎动脉本身也具有脑缺血预处理样作用,对其后48 h内夹闭双侧颈总动脉所致的严重脑缺血具有一定程度的保护作用;大鼠椎动脉对脑干及海马的血液供应均存在明显的同侧优势效应。

p38 MAPK反义寡聚脱氧核苷酸阻断肢体缺血预处理诱导的脑缺血耐受

目的:观察p38MAPK反义寡聚脱氧核苷酸(As-ODN)对肢体缺血预处理(LIP)诱导的脑缺血耐受的影响。方法:48只永久凝闭双侧椎动脉的Wistar大鼠分为8组(n=6):sham组、LIP组、脑缺血损伤组、LIP+脑缺血损伤组、双蒸水+LIP+脑缺血损伤组、p38MAPKAs-ODN组和p38MAPKAs-ODN+LIP+脑缺血损伤组,p38MAPKAs-ODN的剂量又分为5nmol/5μl和10nmol/5μl。所有动物均在sham手术后或末次全脑缺血/再灌注后7天断头取脑,硫堇染色观察海马CA1区锥体神经元迟发性死亡情况。结果:sham组和LIP组均未见延迟性神经元死亡(DND)。与sham、LIP组相比,脑缺血损伤组出现了明显的DND,表现为组织学分级(HG)升高和锥体神经元密度(ND)下降(P<0.05)。LIP可显著抑制脑缺血损伤引起的DND。与LIP+脑缺血损伤组相比,p38MAPKAs-ODN+LIP+脑缺血损伤组出现了显著的DND,表现为HG升高、ND降低(P<0.05),且此种变化与p38MAPKAs-ODN的注射剂量呈明显正相关。结论:p38MAPKAs-ODN可阻断LIP诱导的脑缺血耐受,进一步证实了p38MAPK表达上调参与了LIP诱导的脑缺血耐受。

诱导型一氧化氮信号通路在代谢型谷氨酸受体2/3介导的脑缺血耐受中的作用(英文)

目的:阐明诱导型一氧化氮(NO)信号通路在代谢型谷氨酸受体2/3(mGluR2/3)参与海马脑缺血预处理(CIP)保护机制中的作用。方法:本实验采用免疫组化,观察脑室应用mGluR2/3阻断剂α-甲基-(4 -四唑基-苯)甘氨酸(MTPG)对CIP诱导的iNOS表达的影响。36只永久凝闭椎动脉的SD大鼠随机分为sham、CIP、损伤性缺血、CIP +损伤性缺血、MTPG+CIP和MTPG+CIP +损伤性缺血6组,每组6只。各组大鼠均在术后或末次缺血再灌后,常温饲养5 d取材观察。结果:Sham组胞浆有较弱的iNOS表达。CIP组和CIP +损伤性缺血组NOS表达与sham组相比明显增加。在CIP前20 min脑室注射mGluR2/3阻断剂MTPG,可阻断CIP引起的iNOS表达增加,但对神经元的形态无影响。而MTPG+CIP +损伤性缺血组中,iNOS的表达较MTPG+CIP组明显增加,同时锥体神经元的轮廓、形态出现明显的损伤性改变。结论:CIP能够引起一定程度的iNOS表达增加,而MTPG能阻断CIP引起的iNOS的表达增加,同时又能阻断CIP抗后续损伤性缺血的作用,提示iNOS信号通路在mGluR2/3介导的脑缺血耐受过程中发挥重要作用。

2型糖尿病微血管病变患者纤溶系统变化与胰岛素抵抗的关系

目的探讨2型糖尿病微血管病变患者纤溶活性变化与胰岛素抵抗(IR)之间的关系。方法采用酶联免疫吸附试验测定53例2型糖尿病患者(包括无血管并发症组30例和微血管并发症组23例)和25例正常对照者血浆组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)含量,结合临床资料分析其变化趋势及影响因素。结果2型糖尿病患者血浆t-PA含量明显降低,而PAI-1含量明显升高,t-PA分别是(7.09±2.10)μg/L vs(12.40±2.11)μg/L(P<0.05),PAI-1分别是(40.38±1.74)μg/L vs(25.28±2.83)μg/L(P<0.05),合并微血管病变者,此变化更为显著,t-PA分别(6.22±1.23)μg/L vs(12.40±2.11)μg/L,PAI-1分别是(44.57±2.16)μg/L vs(25.28±2.83)μg/L(均P<0.01)。多元逐步回归分析显示,HOMA模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)是PAI-1升高的独立危险因素。结论2型糖尿病患者纤溶活性降低,IR在降低其纤溶活性,并发微血管病变中起了重要作用。

硫化氢对人PMN凋亡及P53/Bcl-2表达的影响

目的:研究硫化氢(H2S)对人中性粒细胞(PMN)凋亡及P53、Bcl-2表达的影响,以进一步探讨H2S抗脂多糖性肺损伤作用的机制。方法:采用体外分离和培养人血PMN。实验分3组,对照组:培养基中加入无菌生理盐水10mL/L;脂多糖(LPS)组:培养基中加入LPS100μg/L;LPS+硫氢化钠(NaHS)组:先LPS前1h向培养基中加入(1×10-5、1×10-4、1×10-3)mol/LNaHS。各组于24h后采用脱氧核苷酸末端转移酶介导的DNA原位末端标记技术(TUNEL)检测PMN凋亡情况;采用流式细胞术检测PMN中P53及Bcl-2蛋白的表达。结果:与对照组比较,LPS组PMN凋亡百分率和DNA断裂百分率均显著减少(均P<0.05);与LPS组比较,LPS+NaHS(1×10-5)组PMN凋亡百分率和DNA断裂百分率均有所升高,但无显著差异(均P>0.05),LPS+NaHS(1×10-4)组及LPS+NaHS(1×10-3)PMN凋亡百分率和DNA断裂百分率均明显增加,并呈剂量依赖性(均P<0.01)。与对照组比较,LPS组P53蛋白表达量显著减少(P<0.05);与LPS组比较,LPS+NaHS(1×10-5)组P53蛋白表达量无明显变化(P>0.05),LPS+NaHS(1×10-4)组及LPS+NaHS(1×10-3)组P53蛋白表达量明显增多,并呈剂量依赖性(均P<0.01);各组Bcl-2蛋白表达量无明显变化(P>0.05)。PMN中P53蛋白表达量与凋亡百分率的相关分析结果显示二者具有明显正相关关系(r=0.75,P<0.01)。结论:NaHS促进PMN凋亡的机制可能与其上调P53蛋白的表达有关,而与Bcl-2蛋白无关。

全脑缺血模型中不同缺血时间参数对预处理保护效应的影响

目的：观察脑缺血预处理（CIP）的持续时间、CIP与后续损伤性缺血之间的间隔时间对CIP抗全脑缺血所致海马锥体神经元迟发性死亡（DND）作用的影响。方法：采用四血管闭塞法（4VO），制作大鼠全脑缺血模型。脑组织切片硫堇染色法观察海马CA1区锥体神经元DND程度，确定组织学分级（HG）。结果：Sham组和3minCIP组海马未见DND。损伤性脑缺血组海马CA1区有明显的DND，其中6min、10min缺血组的HG为2～3级，15min缺血组的HG主要为3级。CIP＋损伤性脑缺血组中，3min-3d-6min（3minCIP后间隔三天给予6min损伤性脑缺血，下同）和3min-3d-10min组DND不明显，提示CIP可有效地保护海马CAl区神经元，防止6min或10min损伤性脑缺血诱导的DND。在3min-1d-10min组和3min-3d-15min组中，CIP的保护效应较3min-3d-10min组明显减弱。定量分析CIP对海马神经元的保护效应发现，3min-3d-6min组的神经元保护数（PN）和保护指数（PI）与3min-3d-10min组相比无明显差别（P〉0．05）；但3min-3d-10min组的神经元增长指数（GI）较3min一3d一6min组明显升高（P〈0．05）。结论：虽然3min-3d-6min组与3min-3d-10min组中CIP对神经元的保护作用相近，但3min-3d-10min组中，CIP的保护作用更容易被观察到，且CIP的保护潜能可得到最大程度的显现。应用3min-3d-10min组的时间参数建立全脑缺血耐受模型可以诱导出CIP最大的保护潜能。

胶质细胞谷氨酸转运体-1反义寡核苷酸对脑缺血预处理神经保护效应的抑制作用

本研究应用胶质细胞谷氨酸转运体-1(glial glutamate transporter-1,GLT-1)的反义寡核苷酸(antisense oligo-deoxynucleotides,AS-ODNs)抑制Wistar大鼠GLT-1蛋白的表达,观察其对脑缺血预处理(cerebral ischemic preconditioning,CIP)增强脑缺血耐受作用的影响,探讨GLT-1在CIP诱导的脑缺血耐受中的作用。将凝闭双侧椎动脉的Wistar大鼠随机分为7组:(1)Sham组:只暴露双侧颈总动脉,不阻断血流;(2)CIP组:夹闭双侧颈总动脉3min;(3)脑缺血打击组:夹闭双侧颈总动脉8min;(4)CIP+脑缺血打击组:夹闭双侧颈总动脉3min作为CIP,再灌注2d后,夹闭双侧颈总动脉8min;(5)双蒸水组:于分离暴露双侧颈总动脉(但不夹闭)前12h、后12h及后36h右侧脑室注射双蒸水,每次5μL,其它同sham组;(6)AS-ODNs组:于分离暴露双侧颈总动脉(但不夹闭)前12h、后12h及后36h右侧脑室注射GLT-1 AS-ODNs溶液,每次5μL,其它同sham组,再根据AS-ODNs的剂量进一步分为9nmol和18nmol2个亚组;(7)AS-ODNs+CIP+脑缺血打击组:于CIP前12h、后12h及后36h右侧脑室注射GLT-1 AS-ODNs溶液,每次5μL,其它同CIP+脑缺血打击组,根据AS-ODNs的剂量进一步分为9nmol和18nmol2个亚组。Western blot分析法观察GLT-1蛋白的表达,硫堇染色观察海马CA1区锥体神经元迟发性死亡(delayed neuronal death,DND)情况。Western blot分析显示,侧脑室注射GLT-1 AS-ODNs可剂量依赖性地抑制大鼠海马CA1区GLT-1蛋白表达。硫堇染色显示,sham组和CIP组海马CA1区未见明显的DND;脑缺血打击组海马CA1区有明显的DND;预先给予CIP可显著对抗脑缺血打击引起的DND,表明CIP可以诱导海马CA1区神经元产生缺血性耐受,对抗脑缺血打击引起的DND;而在GLT-1AS-ODNs+CIP+脑缺血打击组,侧脑室注射GLT-1 AS-ODNs后,大鼠海马CA1区出现了明显的DND,表明GLT-1AS-ODNs通过抑制大鼠GLT-1蛋白表达从而减弱CIP对抗脑缺血打击的神经保护作用。以上结果进一步证实了GLT-1参与CIP诱导的脑缺血耐受。

八肽胆囊收缩素对大鼠糖尿病性白内障的影响

目的观察八肽胆囊收缩素(CCK-8)对大鼠糖尿病性白内障(DC)的影响。方法用链脲霉素(STZ)复制大鼠DC模型。实验分为对照组、STZ组和治疗组。分别于实验第20、40和60天时检测晶状体iNOS mRNA与蛋白表达,一氧化氮(NO)含量与一氧化氮合酶(NOS)活性变化及组织学改变。结果对照组晶状体iNOS mRNA与蛋白未见明显表达,NO含量较少,NOS活性较低,晶状体上皮细胞(LEC)形态正常;STZ组iNOS mRNA和蛋白表达明显上调,NO生成增加,NOS活性增强,LEC病变随时间延长而加重。治疗组上述改变明显减轻。结论CCK-8可减轻晶状体损伤,机制可能与抑制iNOS基因表达、减少NO生成有关。

应用电脑模拟人系统 提高医学诊断学实验课教学质量

诊断学是基础医学向临床医学过渡的桥梁,基本技能的培养是其授课重点,面对医学院校的大量扩招,传统教学方式存在着很多难以解决的问题。应用电脑模拟人系统辅助教学,可提高诊断学实验课的教学质量,是目前解决临床教学资源不足、提高教学效果的一种有效手段。

CCK-8对脂多糖性肺损伤大鼠肺组织中硫化氢生成的抑制作用

目的:探讨硫化氢(H2S)在八肽胆囊收缩素(CCK-8)改善脂多糖性肺损伤中的作用。方法:用静脉注射脂多糖(LPS,5mg/kg)法制备大鼠肺损伤模型,将雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、LPS组、LPS+CCK-8组及CCK-8组。给药后6h测定大鼠动脉血氧分压(PaO2);检测肺组织中H2S含量和胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)活性;RT-PCR检测肺组织CSE mRNA的表达;光镜观察肺组织的形态学变化。结果:与正常对照组相比,LPS组大鼠PaO2显著下降并出现肺组织结构损伤,而肺组织中H2S含量、CSE活性和mRNA表达显著增高(均P<0.05);与LPS组相比,LPS+CCK-8组大鼠PaO2显著升高,肺组织结构损伤明显减轻,肺组织中H2S含量和CSE活性及mRNA表达显著下降(均P<0.05);CCK-8组大鼠上述各指标与正常对照组相比无明显差异。结论:CCK-8可通过抑制内源性H2S的生成减轻脂多糖性肺损伤。

CCK-8上调LPS诱导的大鼠肺组织HO-1表达的信号转导机制

目的:旨在研究八肽胆囊收缩素(CCK-8)上调脂多糖(LPS)诱导的大鼠肺组织中血红素氧合酶(HO)-1表达的信号转导机制。方法:将42只雄性SD大鼠随机分为7组(每组6只),即对照组、LPS组、LPS+SP600125(JNK特异性抑制剂)组、CCK-8+LPS组、CCK-8+LPS+SP600125组、CCK-8组、CCK-8+SP600125组。注药后6h放血处死动物留取肺组织,应用RT-PCR、Western blotting和免疫荧光流式细胞术(FCM)等技术分别检测各组肺组织HO-1mRNA和蛋白表达。结果:与正常对照组相比,LPS组可见肺组织中出现明显的HO-1 mRNA表达的阳性信号,CCK-8可使LPS诱导的阳性表达信号进一步增强,CCK单独作用也可上调HO-1表达。信号密度扫描结果显示,LPS组、CCK-8+LPS组和CCK-8组HO-1 mRNA表达强度分别是正常对照组3.01(P<0.01)、5.88(P<0.01)和3.45倍(P<0.01);JNK特异性抑制剂SP600125抑制了CCK-8和(或)LPS诱导的HO-1mRNA表达;Western blotting、免疫荧光FCM检测结果显示,肺组织HO-1蛋白表达变化与其mRNA表达一致。结论:JNK/c-Jun通路在CCK-8上调LPS诱导肺组织HO-1表达过程中发挥重要作用。