沉默RALA基因表达对前列腺癌细胞的增殖、迁移及凋亡的影响

目的:利用小干扰RNA(siRNA)靶向RALA基因,使其表达受抑制后探讨对前列腺癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其可能的机制。方法:采用RT-PCR检测前列腺癌DU145、PC-3和LNCap细胞中RALA mRNA的表达水平。通过Lipofectamine^(TM)2000将RALA-siRNA转染体位培养的DU145细胞株,采用MTT法检测RALA-siRNA对DU145细胞株增殖的影响;Transwell实验检测RALA-siRNA对DU145细胞株迁移能力的影响;流式细胞术检测RALA-siRNA对DU145细胞株凋亡影响。应用RTPCR及Western blot方法检测沉默RALA基因后DU145细胞株中RALA的表达水平。结果:RT-PCR检测结果提示DU145细胞株中RALA mRNA的表达水平高于PC-3、LNCap细胞株,其相对表达水平分别为(0.83±0.02)、(0.37±0.07)和(0.41±0.01),差异均有统计学意义(P<0.05)。MTT检测结果显示,转染RALA-siRNA后DU145细胞株的增殖明显受抑制,与空白对照组及阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);Transwell实验结果显示,与空白对照组及阴性对照组相比较,RALA-siRNA组穿膜细胞数低于两者(P<0.05)。流式细胞术检测结果显示,RALA-si RNA组细胞凋亡率明显高于空白对照组及阴性对照组(P<0.05)。Western blot检测结果显示比较阴性对照组、空白对照组,RALA-si RNA组的RALA蛋白的表达明显受抑制(P<0.05)。结论:RALA基因在前列腺癌DU145细胞株中的表达水平较高,沉默RALA基因可使DU145细胞增殖、迁移能力受限,提示在前列腺癌治疗上,RALA可作为一个潜在的靶点。

前列腺癌组织TGF-β1/Rac1通路蛋白表达与根治术后生化复发的相关性

目的:探讨前列腺癌组织转化生长因子-β1(TGF-β1)/Ras相关C3肉毒素底物1(Rac1)通路蛋白表达与根治术后生化复发的关系。方法:回顾性分析2015年02月至2018年02月在本院行前列腺癌根治性切除术的200例患者的临床资料,均于手术时留存前列腺癌组织与癌旁组织标本。采用免疫组织化学法检测前列腺癌组织与癌旁组织中TGF-β1、Rac1、波形蛋白(Vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白表达情况并比较阳性表达率。另统计根治术后随访3年期间患者生化复发情况并据此将其归为生化复发组与未生化复发组,对比生化复发组与未生化复发组前列腺癌组织中TGF-β1、Rac1、Vimentin、E-cadherin蛋白阳性表达率,采用Cox回归模型分析前列腺癌组织中TGF-β1、Rac1、Vimentin、E-cadherin蛋白表达情况与患者根治术后生化复发的关系。结果:前列腺癌组织中TGF-β1、Rac1、Vimentin蛋白阳性表达率明显高于癌旁组织,E-cadherin蛋白阳性表达率明显低于癌旁组织,差异均有统计学意义(P<0.05);根治术后随访3年,生化复发率为14.50%(29/200),生化复发组前列腺癌组织中TGF-β1、Rac1、Vimentin蛋白阳性表达率高于未生化复发组(P<0.05),E-cadherin蛋白阳性表达率低于未生化复发组(P<0.05);经Cox回归模型分析显示,术前PSA水平、标本Gleason评分、包膜侵犯、精囊侵犯、神经周围侵犯、血管侵犯、手术切缘阳性、TGF-β1蛋白阳性、Rac1蛋白阳性、Vimentin蛋白阳性均是前列腺癌患者根治术后生化复发的危险因素(HR=3.350、3.117、4.702、5.618、6.328、5.114、6.007、3.019、3.077、2.740,P<0.05),E-cadherin蛋白阳性是其保护因素(HR=0.471,P<0.05)。结论:前列腺癌组织中TGF-β1、Rac1、Vimentin蛋白均高表达,而E-cadherin蛋白低表达,其表达情况均与患者根治术后生化复发存在一定的关系,TGF-β1、Rac1、Vimentin蛋白阳性表达可增加术后生化复发的概率,而E-cadherin蛋白阳性表达可降低术后生化复发的风险,此对临床具有一定的指导作用。

低温联合地塞米松对大鼠睾丸扭转复位后ICAM1表达的影响及生精功能的保护作用

目的：探讨低温联合地塞米松对大鼠睾丸扭转复位后的生精功能的保护作用，以及对细胞间粘附分子1（ICAM1）表达的影响。方法：将100只青春期的雄性SD大鼠（体重140—160g）随机分为4组，每组25只。4组大鼠分别扭转左侧睾丸720°2h，建立单侧睾丸扭转动物模型，各组做如下处理，A组：常温＋生理盐水；B组：低温＋生理盐水；C组：常温＋地塞米松；D组：低温＋地塞米松；术后48h采集睾丸，通过HE染色光镜观察睾丸组织病理学改变、TUNEL法检测睾丸生精细胞的凋亡、Western印迹检测ICAMl的表达。结果：HE染色光镜下见4组大鼠扭转侧睾丸组织均有不同程度损伤，其中A组睾丸损伤最为明显，其余3组扭转侧睾丸得到不同程度保护；睾丸组织ICAM1 Western印迹检测结果：A组扭转侧（左侧）睾丸组织ICAM1蛋白表达量（0．68±0．03）高于B组（0．49±0．06）、C组（0．46±0．09）、D组（0．17±0．08），差异具有显著性（P〈0．05、P〈0．05、P〈0．01）；凋亡细胞染色：细胞核呈深棕黄色或棕褐色，A组扭转侧睾丸可见大量生精细胞凋亡，凋亡指数AI[（33．13±3．21）％]明显高于B组[（17．12±5．23）％]（P〈0．05）、C组[（14．13±2．03）％]（P〈0．05）及D组[（9．05±1．03）％]（P〈0．01）。结论：低温联合地塞米松能显著增强睾丸组织抗损伤能力，较好地保护扭转复位后睾丸的生精功能及降低ICAM1的表达。

MPCNL和标准通道PCNL对合并肾功能不全的老年性肾结石患者近期肾功能的影响

目的 探讨MPCNL和标准通道PCNL对合并肾功能不全老年性肾结石患者近期肾功能的影响。方法 将2012年10月-2014年8月我院治疗的肾结石并肾功能不全老年性患者100例,采用随机数字表法分为微创组、标准通道组各50例,分别行MPCNL和标准通道PCNL治疗肾结石,术后1周复查血Cr、血BUN、β_2-微球蛋白（BMG）及视黄醇结合蛋白（RBP）,比较两组患者手术前后肾功能变化情况。结果 两组患者围手术期出现并发症发生率无明显差别（P〉0.05）,手术时间〈2 h,术后两组患者血Cr、BUN较术前略有下降,血BMG、RBP较术前略有升高,但差异无统计学意义（P〉0.05）;手术时间≥2 h,术后两组患者血Cr、BUN较术前有所下降,差异无统计学意义（P〉0.05）,但血BMG、RBP较术前明显升高（P〈0.05）。两组患者肾功能改善、稳定和恶化人数比较均无明显差异（P〉0.05）。结论 MPCNL和标准通道PCNL对老年性肾结石伴肾功能不全患者术后早期肾功能无不良影响,而一定程度上可改善患者肾功能。手术时间延长,可致反映早期肾功能损害较灵敏指标血RBP、BMG升高。因此行PCNL时应避免时间过长,从而能最大限度上保护或改善患者现有肾功能。

经尿道钬激光剜除和等离子电切术治疗良性前列腺增生的对比研究

目的比较经尿道钬激光前列腺剜除术(HOLEP)与等离子前列腺电切术(PKRP)治疗良性前列腺增生(BPH)的效果。方法方便选取2017年1—12月收治该院的60例BPH患者随机分入两组,每组30例,分别进行HOLEP或PKRP手术治疗。比较两组术中情况、术后疗效及并发症发生情况。结果钬激光组手术时间较长(P<0.05),但术中出血量(55.54±36.21)m L、膀胱冲洗时间(15.58±3.21)h,均低于电切组(P<0.05);钬激光组切除组织量(53.23±15.84)g,多于电切组(P<0.05)。术后3个月IPSS、Qo L评分、残余尿量(PVR)及并发症差异无统计学意义(P>0.05),钬激光组的最大尿流率Qmax(18.38±5.21)m L/s,优于电切组(P<0.05)。结论经尿道钬激光剜除术治疗前列腺增生,安全、有效、创伤小,前列腺组织切除彻底,具有推广价值。

PSMA单抗靶向人前列腺癌纳米级脂质微泡制备和体外寻靶能力实验研究

目的探究前列腺特异性膜抗原(PSMA)单抗靶向人前列腺癌纳米级脂质微泡的制备方法,对其体外寻靶能力予以观察。方法采用静电吸附法对PSMA单抗靶向人前列腺癌纳米级脂质微泡进行制备,观察其特性,对抗体与纳米级微泡结合情况予以免疫荧光法检测,采用细胞免疫荧光法对PSMA表达以及在细胞膜上的定位予以鉴定,观察靶向微泡对前列腺癌细胞的寻靶能力,并将胃癌细胞作为对照。结果 PSMA单抗靶向纳米级微泡呈现出均匀分布状态,平均粒径为(626.25±66.02)nm;经过免疫荧光法试验,显示微泡表面存在绿色荧光;对前列腺癌细胞膜给予细胞免疫荧光检测其PSMA呈现出高表达;体外寻靶实验显示靶向微泡能够实现与人前列腺癌LNCAP、C4-2细胞的结合,但其与胃癌MKN45细胞无法结合。结论 PSMA单抗靶向人前列腺癌纳米级脂质微泡体外寻靶能力强,能够实现与前列腺癌细胞的有机结合。

局部低温联合生脉与地塞米松对睾丸扭转复位后生精细胞凋亡的保护作用

目的研究生脉、地塞米松联合局部低温对大鼠睾丸扭转复位后生精细胞凋亡的影响。方法将48只青春期标准SD大鼠随机分为6组(A、B、C、D、E、F组),每组8只。6组大鼠分别扭转左侧睾丸720°持续2 h,建立单侧睾丸扭转模型。A组:常温+生理盐水;B组:常温+生脉+地塞米松;C组:低温+生理盐水;D组:低温+地塞米松;E组:低温+生脉;F组:低温+生脉+地塞米松。术后48 h采集睾丸,通过HE染色光镜观察睾丸组织病理学改变,用原位缺口末端标记法(TUNEL)法检测睾丸生精细胞的凋亡。结果 B、C、D、E组,睾丸组织可见部分生精细胞脱落;F组,小鼠睾丸内出现生精细胞脱落现象。凋亡指数(AI),A组(35.13±2.21)明显高于B组(18.12±5.23)、C组(17.13±3.03)、D组(17.05±1.03)、E组(16.39±2.02;均P<0.05)及F组(9.06±1.53;P<0.01)。结论睾丸扭转复位后缺血再灌注损伤可导致生精细胞凋亡增加;局部低温联合生脉、地塞米松对睾丸扭转复位后生精细胞凋亡具有良好保护作用。

输尿管软镜、体外冲击波碎石治疗肾结石对老年性患者肾功能的影响

目的:探讨输尿管软镜碎石术(URS)、体外冲击波碎石术(ESWL)治疗肾结石对老年性患者肾功能的影响,并比较2种手术方式对肾功能的损害程度。方法:选取2016年6月~2018年5月在我院治疗的老年性肾结石患者80例,随机分成URS组和ESWL组,每组各40例。收集两组患者术前2 h及术后2、6、12、24、48、72 h血、尿标本,用ELISA法检测血中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys-C)及尿液肾损伤分子-1(KIM-1)的浓度,比较两组患者手术前后各指标的变化情况。结果:URS组中血NGAL及尿KIM-1浓度术后2 h内均出现明显升高,且达到高峰,与术前2 h及术后6 h比较差异均有统计学意义(P<0.05);术后6 h开始逐渐下降,血NGAL于术后72 h未降至术前水平,与术前比较差异有统计学意义(P<0.05),而尿KIM-1于术后72 h基本降至术前水平,与术前比较差异无统计学意义;血Cys-C浓度术后2 h开始升高,于术后24 h达到高峰,与术后12、48 h比较差异有统计学意义(P<0.05),术后72 h仍未降至术前水平,与术前比较差异有统计学意义(P<0.05)。ESWL组中血NGAL及尿KIM-1浓度均于术后2 h开始升高,于术后6 h达到高峰,与术后2、12 h比较差异有统计学意义(P<0.05),随后浓度开始下降,于术后72 h降至术前水平,与术前2 h比较差异无统计学意义;血Cys-C浓度术后2 h开始升高,其高峰出现在术后48 h,与术后24、72 h比较差异有统计学意义(P<0.05),术后72 h其浓度与术前比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:URS和ESWL均对老年性患者早期肾功能产生损害,主要体现在对肾小管和肾小球的损伤,但造成的损害是可逆的。这2种手术方式中肾小管的损伤及恢复时间均早于肾小球。对于治疗<2 cm的结石,URS和ESWL 2种手术方式对老年患者肾功能的影响差异不大,但行ESWL对老年性患者肾小管的损伤及恢复时间均优于URS。