基于离子色谱法快速测定血清中钠、钾、钙、镁4种阳离子水平

目的建立并优化一种基于微波消解结合离子色谱法同时测定血清中钠、钾、钙、镁4种阳离子的方法,并对其性能进行评价。方法采用微波消解技术对血清样品进行前处理,使用离子色谱定量检测4种阳离子。参照美国临床和实验室标准协会(CLSI)发布的EP6-A和EP15-A3文件对建立的方法进行线性、精密度、加标回收率和正确度等性能验证。结果钠、钾、钙、镁4种离子的检测不精密度以变异系数(CV)表示,分别为0.10%~0.36%、0.15%~0.48%、0.22%~0.87%、0.21%~0.73%。4种阳离子的加标回收率均在97.3%~103.0%之间。参加RELA2020和RELA2021计划的分析结果偏差分别为-0.57%~-0.14%、-0.84%~-0.16%、-1.82%~-0.37%、-0.60%~0.34%,比对均通过。4种阳离子的检出限/定量限分别为0.0175/0.0583mmol/L、0.0005/0.0017mmol/L、0.0099/0.0329mmol/L、0.0011/0.0035mmol/L,表明经前处理后,其他杂质对测定无明显干扰。结论成功建立并优化了一种基于微波消解结合离子色谱法同时测定血清中钠、钾、钙、镁4种阳离子的方法。该方法精密度和正确度良好,操作简单,分析时间短,成本低,可用于临床血清电解质检测的质量改进。

基于液相色谱串联质谱技术对血清同型半胱氨酸常规检测系统的正确度评价

目的以同位素稀释液相色谱串联质谱(ID-LC/MS/MS)为比对方法,评价酶循环法测定血清同型半胱氨酸(Hcy)的正确度。方法采用ID-LC/MS/MS和酶循环法同时检测20份新鲜单人份血清中的Hcy浓度,对测定结果进行方法学比对和评价。采用ID-LC/MS/MS和酶循环法同时测定5个水平的工作校准品,根据比对结果调整酶循环法校准品值,直至酶循环法的测定结果与比对方法的测定结果一致。结果采用ID-LC/MS/MS检测SRM 1950标准物质,测定结果与证书标示值一致,相对偏移<1.0%。酶循环法与ID-LC/MS/MS的线性拟合方程为Y=1.204 1X+0.364 6(r^2=0.987 9),平均偏移为24.0%。调整后的酶循环法与ID-LC/MS/MS的线性拟合方程为Y=0.988 6X+0.260 3(r^2=0.999 7),平均偏移为-0.09%。结论 ID-LC/MS/MS能准确测定血清Hcy水平,或许可作为Hcy常规检测系统正确度评价的比对方法。

同位素稀释液相色谱-串联质谱法测定血清皮质醇候选参考方法的建立及评价

目的建立同位素稀释液相色谱-串联质谱法(ID-LC/MS/MS)测定血清中皮质醇浓度的候选参考方法。方法方法学建立。将样本与皮质醇内标混匀后加入碳酸钠溶液碱化处理, 正己烷/乙酸乙酯进行液液萃取, 流动相采用甲醇水溶液等度洗脱, 质谱采用电喷雾电离源正离子模式(ESI+)及多反应监测(MRM)分析方法, 标准溶液及内标的配制、样本与内标的混合均采用重量法进行控制, 括号法计算皮质醇浓度。参照美国临床实验室标准化协会C62-A、C50-A及国内专家共识文件《液相色谱-质谱临床应用建议》《液相色谱串联质谱临床检测方法的开发与验证》等对方法正确度、精密度、特异性、线性、检测限和定量下限等性能进行系统评价。数据经Excel2019进行处理, 最小二乘法进行线性回归分析。结果方法准确精密, 测定有证标准物质ERM-DA192、ERM-DA193以及2021—2023年RELA样本的相对偏倚均<2%, 加标回收率98.2%~101.1%, 批内及批间不精密度均<2%, 检测结果不受其他结构类似物干扰, 在25~1 600 nmol/L范围内呈现出良好线性, 方法检测限和定量下限分别为0.5和1.0 nmol/L。经溯源后的皮质醇测定试剂盒(化学发光免疫分析法)与该候选参考方法同时测定46例临床血清样本的相关性良好。结论建立了一种灵敏、准确且操作简便的血清皮质醇浓度测定候选参考方法, 可为临床常规测定方法的量值溯源及正确度评价提供参考。