特种件杂货运输市场发展趋势

为推动特种件杂货运输市场的发展,从特种件杂货运输市场的供给和需求两方面出发总结这一市场的发展趋势:增强船队竞争力;打造班轮运输精品航线;提供项目物流服务;提高经营管理水平。

miR-15a和miR-16通过调控bcl-2蛋白的表达逆转结肠癌细胞的耐药性

目的研究miR-15a和miR-16靶向调控bcl-2的表达对结肠癌细胞耐药性的逆转作用。方法将miR-15a和miR-16模拟物或抑制物转染结肠癌长春新碱（VCR）敏感细胞株HCT8或耐药细胞株HCT8／VCR，采用实时荧光定量PCR法检测miR-15a和miR-16的表达，Westernblot法检测bcl-2和P糖蛋白（P—gP）蛋白的表达，细胞计数盒8（CCK8）法检测不同浓度VCR对HCT8和HCTS／VCR细胞生长的抑制作用。结果实时荧光定量PCR法检测结果显示，空白对照组、阴性对照组和转染miR-15a模拟物组HCT8／VCR细胞中miR-15a的相对表达量分别为1．00、0．87±0．24和223．44±59．07，转染模拟物后，miR-15a的相对表达量明显升高（P〈0．001）；空白对照组、阴性对照组和转染miR-16模拟物组HCT8／VCR细胞中miR-16的相对表达量分别为1．00、0．66±0．19和107．32±22．58，转染模拟物后，miR-16的相对表达量明显升高（P〈0．001）。Western blot法检测结果显示，空白对照组、阴性对照组、转染miR-15a模拟物组和转染miR-16模拟物组HCT8／VCR细胞中bcl-2蛋白的相对表达量分别为1．00、0．97±0．02、0．51±0．06和0．65±0．03，转染模拟物后，bcl-2蛋白的表达下调（P〈0．05）。而P-gp蛋白的表达在转染模拟物后没有明显变化。CCK8法检测结果显示，经1、5、25和125斗g／mlVCR处理后，空白对照组、阴性对照组、转染miR-15a模拟物组和转染miR-16模拟物组HCTS／VCR细胞存活率的变化趋势基本-致，转染模拟物后，HCTS／VCR细胞的存活率明显降低（P〈0．05）。实时荧光定量PCR法检测结果显示，转染抑制物后，HCT8细胞中miR．15a和miR．16的表达明显降低（P〈0．001）。Western blot法检测结果显示，转染抑制物后，HCT8细胞bcl-2蛋白的表达明显上调（P〈0．05），而P-gP蛋白的表达没有明显变化。CCK8法检测结果显示，转染抑制物后，HCT8细胞的存活率明显高于空白对照组（均P〈0．05）。结论miR-15a和miR-16可逆转结肠癌细胞的耐药性，其可能的机制是通过调控bcl-2蛋白的表达。

蒿属香豆素对胰腺星状细胞的氧化、活化及纤维化的影响

目的:探讨中药茵陈蒿的主要成分蒿属香豆素对大鼠胰腺星状细胞(PSCs)氧化、活化及细胞外基质沉积的影响。方法:分离PSCs并培养,免疫荧光法鉴定细胞,培养并传代至第3-5代后进行实验,分成空白组、丹酚酸B组、不同浓度香豆素组。分别培养24、48h后MTT法检测PSCs增殖情况。48h后通过比色法检测各组细胞丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平的变化。免疫荧光、Western blot法检测各组平滑肌肌动蛋白(α-Smooth muscle actin,α-SMA)、I型胶原表达的情况。结果:与空白组相比,蒿属香豆素组的细胞增殖水平、MDA水平、α-SMA、Ⅰ型胶原的表达明显降低,SOD水平显著增高(P<0.05)。结论:蒿属香豆素能有效降低PSCs的氧化应激水平,抑制其活化进而减轻纤维化。

阿司匹林对胰腺癌细胞上皮间质转化和吉西他滨耐药性的影响

目的探讨阿司匹林对人胰腺癌细胞上皮间质转化(EMT)和吉西他滨耐药性的影响。方法应用MTT法检测阿司匹林(0、1、2、5、10mmol/L)对三种胰腺癌细胞(SW1990、PATU-8988、PANC-1)生存率的影响以及阿司匹林(2mmol/L)与吉西他滨(0.05mg/L)联合用药对SW1990细胞增殖的影响。平板克隆实验检测药物对克隆形成能力的影响;流式细胞术检测细胞凋亡情况;细胞划痕实验观察细胞的迁移能力;Western blot检测凋亡相关蛋白及EMT相关蛋白表达水平。结果(1)与对照组相比,低浓度阿司匹林(1、2mmol/L)对PATU-8988、PANC-1有生长抑制作用(P<0.05、P<0.01);高浓度阿司匹林(5、10mmol/L)对SW1990、PATU-8988、PANC-1均有较明显的生长抑制作用(P<0.05、P<0.01)。(2)与单药组相比,联合用药组中SW1990细胞增殖率显著降低,克隆形成率显著降低,凋亡率显著升高(P<0.05),细胞中的Bcl-2蛋白表达水平显著降低。(3)与单药组相比,联合用药组细胞迁移率显著降低,细胞中的EMT相关蛋白E-钙黏蛋白表达显著升高,波形蛋白表达显著降低。结论阿司匹林有抑制胰腺癌细胞增殖的作用,并且能增强细胞对吉西他滨的敏感性,同时逆转胰腺癌细胞EMT。

靶向Lin28B基因沉默对胰腺癌细胞增殖的影响

目的探讨靶向Lin28B基因沉默对细胞增殖的影响。方法设计Lin28B及GFP短发夹核糖核酸(shRNA)序列,装入Tet-on-pLKO-puro质粒,进行慢病毒包装,感染胰腺癌细胞Panc1,嘌呤霉素筛选并培养稳定干扰细胞株。实验组为Panc1-Tet-on-pLKO-sh-Lin28B;对照组为Panc1-Tet-on-pLKO-sh-GFP。筛选强力霉素最佳诱导浓度并诱导干扰序列表达,Western blot检测干扰效率,细胞增殖与活性实验CCK8检测沉默Lin28B对Panc1细胞增殖的影响。结果构建的Tet-on-pLKO-sh-Lin28B慢病毒可显著抑制Panc1细胞内Lin28B的表达。与对照组Panc1-Tet-onpLKO-sh-GFP相比,实验组Panc1-Tet-on-pLKO-sh-Lin28B的增殖速度减缓(P<0.05)。结论成功筛选出沉默Lin28B的稳定干扰细胞株,沉默Lin28B对胰腺癌细胞的增殖有抑制作用,为进一步研究Lin28B基因的功能或基因治疗提供有用技术。

LIN28/let-7信号通路与肿瘤发生发展的关系

Let-7家族是最古老而保守的micro RNAs(mi RNAs)之一,由于它在许多肿瘤中表达下降或缺失,故被认为是肿瘤抑制因子。LIN28是一种高度保守的RNA结合蛋白,在多种恶性肿瘤中过度表达,通过抑制let-7而发挥致癌功能。目前认为,LIN28/let-7通路与恶性肿瘤发生发展密切相关,因此深入研究LIN28/let-7信号通路的调控机制将为恶性肿瘤的诊断和治疗提供新的策略。