木犀草素通过ROS/TXNIP轴减轻脓毒症小鼠急性肺损伤的机制

目的基于活性氧簇(ROS)/硫氧还蛋白结合蛋白(TXNIP)通路探讨木犀草素减轻脓毒症小鼠急性肺损伤的机制。方法取雄性C57BL/6小鼠,使用盲肠结扎穿刺术诱导建立模型,按随机数字表法分为模型组、木犀草素组(80 mg/kg,灌胃)、TXNIP过表达(ad-TXNIP)组、TXNIP过表达阴性对照(ad-NC)组、木犀草素+ad-TXNIP组,每组20只,另取20只为假手术组。观察小鼠一般行为,检测肺泡灌洗液中炎症细胞数量;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎症因子白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平、肺组织氧化应激产物丙二醛(MDA)水平;取肺组织,苏木素-伊红(HE)染色观察组织病理损伤;DCFH-DA荧光探针法测ROS含量;免疫组化法测TXNIP阳性表达水平;Western印迹测ROS/TXNIP通路相关蛋白NOD样受体家族蛋白(NLRP)3、IL-6、TNF-α、超氧化物歧化酶(SOD)2、过氧化氢酶(CAT)、硫氧还蛋白(TRX)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-1水平。结果与假手术组相比,模型组死亡及呼吸困难现象明显增加,肺泡灌洗液炎症细胞数目及肺组织炎症损伤评分明显升高,ROS/TXNIP活化及其介导的炎症及氧化应激反应明显加重(P<0.05)。与模型组相比,木犀草素组无死亡,肺泡灌洗液炎症细胞数目及肺组织炎症损伤评分明显降低,ROS/TXNIP活化及其介导的炎症及氧化应激反应明显减弱(P<0.05)。过表达TXNIP可明显逆转木犀草素的上述作用(P<0.05)。结论木犀草素可能通过抑制ROS/TXNIP轴活化,来改善脓毒症急性肺损伤小鼠肺组织炎症及氧化应激损伤。

基于NLRP3/IL-1β/TGF-β1通路探讨萝卜硫素对脂多糖诱导的小鼠肺炎的改善作用

目的探讨萝卜硫素对脂多糖(LPS)诱导的小鼠肺炎的改善作用及核苷酸结合域样受体蛋白(NLRP)3/白细胞介素(IL)-1β/转化生长因子(TGF)-β1信号通路的影响。方法ICR小鼠随机分为对照组、模型组、萝卜硫素组(腹腔注射20 mg/kg的萝卜硫素)、抑制剂组(腹腔注射50 mg/kg的NLRP3通路抑制剂)、萝卜硫素+激活剂组(腹腔注射20 mg/kg萝卜硫素、1.5 mg/kg的NLRP3通路激活剂),每组10只,除对照组滴入相同体积的生理盐水,其余各组均滴鼻LPS(2 mg/kg)构建肺炎模型,造模成功后24 h开始药物干预,对照组、模型组腹腔注射等量生理盐水,每天干预1次,连续干预1 w。血气分析仪测定各组动脉血氧分压(PaO_(2))、二氧化碳分压(PaCO_(2))值,酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测血清、肺泡灌洗液中炎症因子水平,计数肺泡灌洗液中炎症细胞数量,计算肺湿/干比,苏木素-伊红(HE)染色检测各组肺组织病理变化,以Western印迹检测肺组织中NLRP3/IL-1β/TGF-β1通路蛋白的表达。结果与对照组相比,模型组肺组织受损严重,PaO_(2)值显著降低,PaCO_(2)、肺湿/干值、血清及肺泡灌洗液中炎症因子水平、炎症细胞数量、肺组织中NLRP3/IL-1β/TGF-β1通路相关蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与模型组相比,萝卜硫素组、抑制剂组肺组织损伤得到缓解,PaO_(2)值显著升高,PaCO_(2)、肺湿/干值、血清及肺泡灌洗液中炎症因子水平、炎症细胞数量、肺组织中NLRP3/IL-1β/TGF-β1通路相关蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与萝卜硫素组相比,萝卜硫素+激活剂组肺组织损伤加重,PaO_(2)值显著降低,PaCO_(2)、肺湿/干值、血清及肺泡灌洗液中炎症因子水平、炎症细胞数量、肺组织中NLRP3/IL-1β/TGF-β1通路相关蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论萝卜硫素对LPS诱导的小鼠肺炎具有一定的改善作用,可能是通过抑制NLRP3/IL-1β/TGF-β1信号通路实现的。