基于全自动管式化学发光免疫检测系统的人结核感染T细胞检测方法的建立

目的建立基于化学发光平台的人结核感染T细胞检测方法。方法将一株γ-干扰素单抗标记在磁微粒上,另一株γ-干扰素单抗标记在吖啶酯上,然后将检测体系与已有的细胞刺激培养体系相结合。结果本研究成功建立基于化学发光平台的人结核感染T细胞检测方法。以ELISA平台检测试剂的检测结果作为参考,该方法的灵敏度为98.3%,特异性为99.2%,总体符合率达到98.8%。结论该方法具有更高的分析灵敏度(可达0.27 pg/m L)、更宽的线性范围(1 pg/m L^5 000 pg/m L)、更好的重复性(批内与批间变异系数均<6.0%)及更易实现高通量检测,为临床诊断结核感染提供了有力的工具。

新型基于吖啶酯平台的乙型肝炎病毒表面抗原全自动管式化学发光定量检测试剂的建立和评价

目的拟建立一种新型基于吖啶酯平台的乙型肝炎病毒表面抗原全自动管式化学发光定量检测试剂。方法基于自主研发的全自动化学发光免疫检测系统,通过抗体配对筛选,体系调整等方法建立HBsA g全自动化学发光定量检测试剂,并与罗氏试剂进行定量相关性比较,使用不同亚型标本进行评价。结果研发的HBs Ag定量检测试剂定量范围为0~250 IU/ml,与罗氏试剂检测临床标本具有良好的一致性(r2=0.9794),对国家参考品中的灵敏度参考品检测结果均符合国家标准,试剂对不同亚型的检测性能良好,在0.05~250 IU/ml范围内具有很好的线性(r=0.9990),试剂对国家参考品中的准确度参考品检测结果符合国家标准,稀释400倍检测的可报告上限为100 000 IU/ml,批内精密度均小于10%,批间精密度小于15%。结论该研发的试剂具有良好的检测性能,具有广阔的应用前景。

一种糖类抗原242全自动管式化学发光定量免疫检测试剂的建立

目的建立一种全自动测定血清糖类抗原242(CA242)的管式化学发光定量免疫检测试剂。方法采用均相磁微粒标记技术与高灵敏的吖啶酯化学发光技术,依据双抗体夹心原理,以4株单克隆抗体为原料进行配对单抗筛选,从而建立CA242化学发光磁微粒测定试剂,并在全自动管式化学发光仪上对其灵敏度、精密度、回收率与相关性等进行初步评价。结果筛选的最优单抗配对7C10(包被)-3H1(标记)的反应活性最高,且CA19-9和CA50对CA242检测的干扰很小。该试剂的分析灵敏度为0.69 U/ml,高浓度样本精密度为3.0%,低浓度样本精密度为5.7%,回收率为101.5%。与当前主流的商品化试剂的定量相关性良好(y=1.027x–0.2991,r=0.9911,P<0.05)。结论利用抗CA242单抗为原料建立CA242全自动管式化学发光定量免疫检测试剂,该试剂性能良好,所有检测操作均由仪器自动完成,可满足目前临床医学的高通量检测需求。

硫酸脱氢表雄酮化学发光微粒子免疫法定量测定试剂的研制

目的研制硫酸脱氢表雄酮化学发光免疫定量检测试剂。方法利用硫酸脱氢表雄酮人工完全抗原免疫小鼠,通过杂交瘤技术制备特异性抗硫酸脱氢表雄酮单克隆抗体,采用竞争抑制法建立硫酸脱氢表雄酮化学发光免疫定量检测试剂。结果筛选获得了27株稳定分泌抗硫酸脱氢表雄酮的单克隆抗体细胞株,建立了化学发光微粒子免疫法定量测定硫酸脱氢表雄酮的试剂盒雏形,与雅培公司的硫酸脱氢表雄酮定量检测试剂在检测临床标本上的相关系数r达0.99以上。结论本研究为国产化硫酸脱氢表雄酮化学发光微粒子免疫法定量测定试剂盒的研发奠定了基础。

细胞角蛋白19片段抗原21-1含量化学发光微粒子定量免疫检测方法的建立

目的建立细胞角蛋白19片段抗原21-1(cytokeratin 19 fragment 21-1,CYFRA21-1,简称CY21-1)含量的化学发光微粒子免疫检测方法(chemiluminescent microparticle immunoassay,CMIA)。方法原核表达制备重组CY21-1(r CY21-1),用其免疫BALB/c小鼠后,收集小鼠脾脏细胞,常规杂交瘤技术与Sp2/0进行融合,制备CY21-1单抗。间接ELISA法筛选可稳定分泌CY21-1抗体的杂交瘤细胞,分别标记微性磁珠(magnetic beads,MB)和吖啶酯(acridinium ester,AE),筛选可特异检测CY21-1的单抗配对,建立CY21-1 CMIA,同时验证方法的线性及灵敏度,并与同类试剂盒进行比较。结果经筛选获得了一组能特异检测CY21-1的单抗配对MB*26B5-3E4*AE,建立的CY21-1 CMIA对检测CY21-1校准品的线性范围为0.1~1 000 ng/m L,R^2=0.992 3,检测灵敏度为0.076 ng/m L。该方法与美国雅培公司生产的Abbott CY21-1 CMIA诊断试剂盒平行检测250份临床血清标本的结果具有良好的相关性(R^2=0.961 6)。结论成功建立了CY21-1 CMIA,且具有良好的线性及灵敏度,为我国肺癌的临床筛查和早期诊断奠定了基础。

三明市按C-DRG收付费改革经验介绍

2017年6月三明市被国家卫生计生委列入全国按疾病诊断相关分组(C-DRG)收付费改革"三+3"试点城市,在全国率先实行了覆盖面最广泛、最深入、最全面的C-DRG收付费方式改革,取得了较好的成效。文章主要介绍了三明市按C-DRG收付费改革的背景、发展历程、设计思路、改革特色,并简要介绍了三明市医保基金打包支付制度和医保基金双打包改革的成效。