小鼠骨髓干细胞的分离培养鉴定及诱导分化的研究

目的分离培养鉴定小鼠的骨髓间充质干细胞,观察体外培养生长特性,并在特定条件下诱导分化,探讨其成脂成骨分化能力。方法采用全骨髓培养法培养小鼠骨髓间充质干细胞,观察干细胞的形态和生长特性,用流式细胞仪对其细胞表型CD29、CD90、CD34、CD44、CD31、CD45进行鉴定,成脂成骨诱导分化能力鉴定。结果原代分离的细胞培养24 h,干细胞开始贴壁,胞体呈圆形,其他血细胞悬浮。培养3 d,贴壁细胞逐渐变梭形;培养第4 d,细胞开始分裂;随着细胞数目的增加,逐渐形成漩涡状排列,细胞形态呈梭形、三角形、多边形、不规则形;培养第10 d,贴壁细胞长满瓶底的80%,按1∶2传代。选择第3代骨髓干细胞分析显示,CD29、CD44、CD90阳性表达,CD31、CD34、CD45阴性表达。细胞成脂成骨诱导后染色鉴定呈阳性。结论采用全骨髓法培养可获得生长状态良好,增殖能力强的骨髓间充质干细胞,方法简便、实用。

锁骨上动脉皮瓣在口腔颌面部缺损修复中的应用进展

口腔颌面部肿瘤术后一期重建是临床治疗中的难点,尽管游离皮瓣是目前修复口腔颌面缺损的主流,但带蒂组织瓣仍然十分重要。锁骨上动脉皮瓣因其血供稳定、颜色质地与面颈部相近、厚薄适中、无需血管吻合、重建效果良好等特点逐渐受到口腔颌面外科医生的青睐,且锁骨上动脉皮瓣的应用可能有助于节约医疗资源,减轻患者负担。本文就该皮瓣的解剖、设计、制备、优缺点及其临床应用等做一综述。

兔骨髓干细胞和脂肪干细胞体外成骨能力的比较

目的:评价两种不同来源的间充质干细胞,即骨髓干细胞(BMSC)和脂肪干细胞(ADSC)的体外成骨能力,为其将来应用于细胞治疗和组织工程研究提供一定的理论依据。方法:分别取同一只兔的髂骨骨髓和腹股沟脂肪作为BMSC和ADSC的来源,分离培养后比较成骨、成脂分化潜能,细胞表面抗原标记物;成骨诱导后检测碱性磷酸酶(ALP)活性,RT-PCR分析其成骨相关基因的表达情况。结果:BMSC和ADSC都具有向成骨、成脂分化的潜能;在成骨诱导分化后,BMSC有较高的ALP活性和较多的钙结节形成。RT-PCR结果显示:BMSC表达较高的BMP-2、OCN和OPN等成骨基因。结论:BMSC和ADSC都具有向成骨、成脂分化的潜能,ADSC有较好的成脂分化能力,BMSC有较好的成骨分化能力;两者都可以作为组织工程的种子细胞。

上颌中切牙种植累及鼻腭管的处理的初步研究

目的:探索上颌中切牙位点种植累及鼻腭管的外科处理方法,评估其安全性和有效性。方法:回顾性分析2016年7月~2018年6月上颌中切牙位点种植的病例。纳入标准为术前数字化种植规划中种植体进入鼻腭管,及术中种植窝预备完成后牙周探针检查发现种植窝与鼻腭管穿通。根据穿孔的大小,采取不同的术式处理鼻腭管,最终完成种植治疗。评估内容包括:前腭的感觉异常情况,术后疼痛以及种植体的存留率。结果:共收集48例患者(71个中切牙区种植位点),符合纳入标准的病例10例(10个中切牙区种植位点)。10例中切牙位点种植体骨结合良好,仅有1例患者报告了术后暂时性的前腭感觉异常,但在3个月内自行恢复。在最后一次复查(随访期6~18个月),10例患者没有出现种植体失败,无一例种植位点近远中骨吸收超过1 mm,种植体周围组织健康。结论:在上颌中切牙位点的种植治疗前必须评估鼻腭管的形态和大小,按照修复为导向的种植原则,当无法避免种植体穿通鼻腭管,可根据穿孔大小采取不同的术式,获得可预期的临床疗效。

兔骨髓基质干细胞向血管内皮样细胞的诱导分化

目的:研究血管内皮细胞生长因子(VEGF)联合碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)促进兔骨髓基质干细胞向血管内皮样细胞的定向诱导分化,为血管化组织工程骨研究提供实验基础。方法:采集2周龄兔后肢长骨骨髓,用全骨骨髓贴壁法进行原代培养,将获得的第2代骨髓基质干细胞以1×105/mL密度接种于内皮细胞条件培养基(含10μg/L VEGF,10μg/L bFGF,10%胎牛血清的DMEM/F12培养液)进行体外诱导培养,对诱导2周的细胞进行细胞形态观察和表型、功能鉴定。结果:经血管内皮细胞条件培养基诱导2周后的细胞呈扁平形,多边形,表达血管内皮细胞特异性标志CD31、VWF因子,细胞具有吞噬DiI-Ac-LDL和摄取FITC-UEA-1的功能,诱导的细胞可在BD基质胶内形成管腔样结构。结论:血管内皮细胞生长因子联合碱性成纤维细胞生长因子可以成功诱导兔骨髓基质干细胞为血管内皮样细胞,有希望作为组织工程骨的血管化的种子细胞。

兔骨髓干细胞和脂肪干细胞增殖和分化能力的比较

目的:评价两种不同来源的间充质干细胞,即骨髓干细胞(BMSC)和脂肪干细胞(ADSC)增殖和分化能力,为其将来更好的应用于细胞治疗和组织工程提供一定的理论支持和依据。方法:分别取同一只兔的髂骨骨髓和其腹股沟脂肪作为BMSC和ADSC的来源,分离培养后比较其生物学特性包括细胞的增殖能力(MTT),成骨成脂分化潜能,细胞表面抗原标记物。结果:BMSC类似纤维细胞样,呈长梭形紧密排列;而ADSC细胞整体呈旋涡状排列;但ADSC倍增时间更短,增殖速度更快;两者都具有向成骨成脂分化的潜能,但BMSC的成骨能力更好。结论:ADSC有更短地倍增时间和更快地增殖速度;两者都具有向成骨成脂分化的潜能,但相较于ADSC更强的成脂分化能力,BMSC的成骨分化能力更好。两者都可以作为组织工程的种子细胞。

颌面颈部重度多间隙感染的负压封闭引流治疗方法研究

目的:分析颌面颈部重度多间隙的化脓性感染负压封闭引流方法的微创治疗技巧及效果。方法:分析我院160例患者分别采用全麻下微创切开联合全管负压引流冲洗技术与较大范围切开联合VSD引流技术,总结不同程度和类型感染治疗适应症、手术技巧和疗效。结果:全管负压引流技术主要针对局限性或广泛性多间隙感染,蜂窝组织炎期和脓肿形成期均适合,切口小、换药简单、病人痛苦小、疗效较确切,完成病例140例,平均切口大小2~4 cm,临床发热、疼痛、张口受限等症状1~7天得到控制,伤口一期愈合率达到85%。VSD技术主要针对坏死性筋膜炎、组织器官广泛坏死、延期愈合等类型的感染,切口大、创伤大,但术后同样换药简单、患者痛苦小、疗效确切,能解决危重或疑难感染。完成病例20例,病情1~7能得到控制,但伤口愈合延迟到7~30天,部分需二次手术拔出引流海绵并关创。结论:两种方法均能有效地解决颌面部重度多间隙感染,二者配合使用,能达到更好的疗效。

咽旁间隙感染50例临床分析

目的:探讨咽旁间隙感染的临床特点、治疗和预后。方法:回顾性分析我院近5年来50例咽旁间隙感染患者的诊治经过及疗效。结果:纳入的50例咽旁间隙感染患者中,单纯咽旁间隙感染38例(76%),合并两个以上间隙12例(24%),腺源性感染为主39例(78%),牙源性感染8例(16%),不明原因感染3例(6%)。其中29例(58%)采取单纯抗感染对症支持治疗,抗感染加穿刺引流4例(8%),抗感染加咽旁切开引流8例(16%),抗感染加颌下切开引流9例(18%),所有患者均治愈出院。结论:单纯咽旁间隙感染,通过早期积极有效的抗感染对症支持治疗,可能获得良好治疗效果,不建议过早、过激的大创伤性手术,但合并多间隙感染时主张早期手术引流。

上海会展中心方舱医院新型冠状病毒奥密克戎变异株感染者临床特征

目的 分析方舱医院新型冠状病毒奥密克戎变异株感染者流行病学及临床特征以及感染者年龄、性别、疫苗接种情况对病程的影响,为新冠疫情防控提供参考。方法 以回顾性分析上海(国家)会展中心方舱医院2022年4月9日—5月31日收治新型冠状病毒感染者流行病学及临床特征,并进一步队列分析作者所在方舱分院新冠感染者年龄、性别及疫苗接种情况对患者病程的影响。结果 方舱医院174 466例新冠感染者中,男性为主,占比59.38%;以18~59岁青中年为主(占83.50%),其次≥60岁老年组12.30%;平均住院时间7.40 d;发热患者占比27.79%;合并基础疾病者占15.37%(26 817/174 466),前三位依次为高血压、糖尿病和冠心病;接种新冠疫苗者占比79.56%(13 799/17 956),其中三剂比例最高44.09%。方舱医院作者所在分院17 956例新冠感染者病程时间为10.18(7.34,13.05)d,老年组感染者病程时间最长,11.34(8.35,14.37)d,随后依次为学龄前组11.17(9.07,14.33)d、中年组10.37(8.14,13.34)d、学龄组10.07(7.37,12.37)d、青年组9.34(7.05,12.16)d,五组感染者病程时间总体分布差异有统计学意义(H=550.479,P<0.01)。男性感染者病程时间为10.27(7.34,12.57)d,女性感染者为10.10(7.25,13.09)d,差异无统计学意义(Z=-1.505,P>0.05)。接种疫苗者病程时间为10.24(7.35,13.05)d,未接种者病程时间为9.47(7.09,12.47)d,两组感染者病程时间差值有统计学意义(Z=-4.338,P<0.01)。结论 新冠病毒奥密克戎变异株感染者男性比例高,以青中年为主,发热患者比例低于30%;病程时间明显低于武汉原始株,且随各年龄段呈现“V”分布;性别对病程无影响;接种新冠疫苗未对病程产生临床意义的影响。