聚合酶链反应检测结核分支杆菌临床标本制备方法的研究

分别检测６种结核菌ＤＮＡ提取方法的裂解效能、聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增灵敏度及其对临床标本的阳性检出率。结果显示，ＴＥ－ＴｒｉｔｏｎＸ法和Ｃｈｅｌｅｘ－１００法能裂解绝大多数的细菌并具最高的敏感性，可检测出少至１０个菌细胞，其临床标本的阳性检出率分别为９３．３％和８６．６％；而其余４种方法效果较差，ＴＥ－Ｔｒｉｔｏｎ和Ｃｈｅｌｅｘ－１００两种沸水浴法简捷、经济、高效，值得临床实验室推广使用。

聚合酶链反应银染色检测病原体DNA

聚合酶链反应(PCR)技术自问世以来,以其灵敏度高,特异性强,简单快速等特点广泛用于临床检验。我们参照Bright等的银染技术并加以改进用以检测扩增后的结核杆菌(TB)、人巨细胞病毒(HCMV)和乙型肝炎病毒(HBV)的DNA。实验结果表明,其灵敏度与溴化乙锭法近似,且不需特殊的仪器和设备,结果容易保存并可通过光密度计扫描,便于比较和观察。

聚合酶链反应银染色检测病原体DNA

聚合酶链反应(PCR)技术自问世以来,以惊人的速度应用于生物学和医学研究的各个领域,以其灵敏度高、特异性强、简便、快速广泛用于临床检验。PCR扩增后,通常进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)或琼脂糖凝胶电泳分离DNA,溴化乙锭(EB)染色,或用同位素标记显示DNA。同位素标记费用高,操作繁杂,受同位素半衰期限制,临床实验室不易开展,而EB染色。