类风湿性关节炎患者滑膜组织中HIF-1α与MMPs相关性研究

目的探讨类风湿性关节炎(RA)患者滑膜组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达与基质金属蛋白酶家族成员(MMPs)表达的相关性。方法利用real-time PCR方法检测RA和骨关节炎(OA)患者滑膜组织中HIF-1α和MMPs的表达并进行相关性分析。结果 RA滑膜组织中HIF-1α、MMP-1、MMP-3、MMP-9与MMP-13 mRNA表达量显著高于OA对照组,且RA滑膜组织中高表达的HIF-1α与MMP-9呈显著的正相关。结论 RA滑膜组织中高表达的HIF-1α可能参与调控MMP-9的表达,参与RA的病理变化进程。

IL-17调控类风湿性关节炎滑膜细胞SENP6表达与Cyr61关系初探

探讨IL-17调控类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞SENP家族分子表达与Cyr61表达间的关系,取8例类风湿关节炎患者的成纤维样滑膜细胞进行原代培养与鉴定,并利用real-time PCR检测了经IL-17刺激后,滑膜细胞中SENP家族分子与Cyr61表达格局。结果显示:经IL-17刺激后,有四例滑膜细胞Cyr61的表达上调,同时SENP6的表达也上调,另外四例经IL-17刺激Cyr61未见上调的滑膜细胞,其SENP6的表达却未见上调。初步分析表明IL-17调控类风湿性关节炎滑膜细胞SENP6表达与Cyr61表达存在正相关性,提示SENP6可能在IL-17刺激类风湿性关节炎滑膜细胞Cyr61的表达中起着调控作用。

利用单克隆抗体靶向清除Treg的肿瘤免疫疗法

以抗PD-1/PD-L1免疫检查点为靶点,通过激活肿瘤微环境T细胞杀伤肿瘤的作用机制,已在多种实体瘤临床免疫治疗中获得验证。但以清除肿瘤微环境免疫抑制性Treg细胞为靶点,通过激活肿瘤微环境效应性免疫反应来杀伤肿瘤的作用机制目前仍有待更深入研究。本文系统探讨了以CTLA-4、TIGIT、CCR8为代表的靶向Treg表面分子的单克隆抗体疗法的最新进展及潜在作用机制,以期为更加安全有效地靶向清除Treg的抗体药物研发提供新思路,为更多晚期恶性肿瘤患者免疫治疗临床获益提供新的可选药物。

Cyr61上调人角质形成细胞系表达趋化因子与银屑病发生机制初探

银屑病是一种常见的慢性炎症性皮肤疾病,多种炎症细胞与炎症因子参与其发病。我们已有研究发现促炎因子Cyr61/CCN1通过活化角质细胞而加剧皮损,但是否还有其他促炎机制尚不清楚。本研究通过Cyr61介导角质细胞产生趋化因子的体外实验,探讨Cyr61参与银屑病发生新途径。采用Real-time PCR方法检测人角质形成细胞系(HaCat细胞)在外源性Cyr61作用下趋化因子的表达格局。实验结果显示Cyr61能够在体外促进人角质形成细胞系表达多种趋化因子(如CCL2,CCL17,CCL22,CXCL1,CXCL10,CXCL11(P<0.05)),提示Cyr61可能通过促进角质形成细胞系表达多种趋化因子从而参与DC,Th17,Th1等细胞的趋化。提示Cyr61可能通过促进角质形成细胞系表达趋化因子介导炎性细胞局部浸润增多,加剧银屑病发病。

Cyr61上调人角质形成细胞表达IL-36α的实验研究

银屑病是多种炎症因子参与的慢性炎症性皮肤疾病,其中IL-1家族分子IL-36α与银屑病发生发展密切相关。在基因敲除小鼠研究中发现,当敲除IL-36α基因后,再用咪喹莫特制备小鼠银屑病样模型时,皮损和炎症都明显减轻。我们前期研究发现促炎因子Cyr61/CCN1能通过活化角质细胞、促进趋化因子产生而加剧银屑病发生,但其是否也参与IL-36α表达与调控则未见报道。本研究采用人永生化角质形成细胞(human immortalized keratinocytes cell line,HaCaT cell)在体外研究Cyr61对IL-36α表达的调控作用。结果发现Cyr61能显著上调HaCaT细胞表达IL-36α,而且呈剂量依赖性。进一步通过siRNA干扰技术下调HaCaT细胞中Cyr61的内源性表达,发现当Cyr61表达受抑制后,IL-36α表达也被有效抑制,表明Cyr61能够介导角质细胞表达IL-36α。已有报道表明TNF-α、IL-17和IL-22能够上调角质细胞表达IL-36α,因此我们还采用TNF-α、IL-17和IL-22特异性siRNA干扰这些炎症因子的内源性表达,观察Cyr61对IL-36α的作用。结果表明这些因子被干扰后并不影响Cyr61对IL-36α表达的影响,说明Cyr61能直接促进IL-36α表达。本研究的结果提示Cyr61/CCN1还可能通过上调IL-1家族分子IL-36α而参与银屑病发生。

软骨蛋白聚糖诱导的脊柱关节炎小鼠模型的建立及富含半胱氨酸蛋白61单克隆抗体治疗效应初探

目的尝试建立SpA的小鼠模型,分析小鼠的临床表型及影像学和病理学特征。并初步探讨富含半胱氨酸蛋白61(CCN1)在SpA小鼠模型中的治疗作用。方法牛软骨蛋白聚糖和弗氏佐剂免疫14~16周龄雌性BALB/c小鼠,诱导SpA。SpA小鼠腹腔注射CCN1单克隆抗体093G9或者无关抗体免疫球蛋白(Ig)G。对小鼠外周关节炎进行评分,采用t检验进行统计分析,分析其外周及中轴关节Mirco-CT和组织病理学表现。结果免疫后小鼠从第8周陆续出现外周关节炎症,这一表现在第11周达到高峰[关节炎评分(10.5±1.5)]。第12周踝、膝关节骨赘形成,腰、尾椎椎间盘炎,膝关节半月板和腰椎椎间盘软骨细胞聚集。第18周胸、颈椎也出现椎间盘炎,伴软骨生成。2次CCN1单克隆抗体093G9治疗后的SpA小鼠外周关节炎评分明显下降,治疗组及正常对照组分别为[(2.8±1.3)和(4.2±2.1),t=2.516,P<0.05]。8次治疗后2组关节炎评分差异有统计学意义,治疗组为(2.0±2.0),而正常对照组为(5.3±2.0)(t=4.082,P<0.01)。治疗组外周关节炎症减轻,新骨形成减少,中轴关节椎间隙狭窄和新骨形成改善。结论本研究建立的SpA小鼠模型可以基本模拟人类SpA,包括外周、中轴炎症及新骨形成。CCN1单克隆抗体可改善SpA小鼠模型的炎症和新骨形成。