成体胰腺导管干细胞的研究进展

动物出生后,胰腺导管组织仍然存在干细胞,称为成体胰腺导管干细胞。综述了成体胰腺导管干细胞的分离培养、生长特性、表面标志及体外定向诱导分化形成胰岛的研究进展。成体胰腺导管干细胞的研究对于阐释胰岛再生的机制及诱导胰岛移植治疗糖尿病具有重要意义。

中国小型猪在生物医药领域的研究进展

小型猪在生理、解剖结构、营养代谢、药物代谢以及疾病发生发展上与人类相似,被广泛应用于人类疾病研究中。我国小型猪资源丰富,不同种群遗传性状稳定并各具特色。但如何结合中国小型猪的特点,建立符合生物医药研究需要的人类疾病小型猪模型仍处于探索阶段。本文对不同品种中国小型猪在人类疾病模型研究中的应用现状进行概述,以期为进一步利用中国小型猪研究人类疾病提供参考和指导。

猪作为人类疾病模型的研究进展

人类疾病动物模型在阐明疾病发生机制、探索治疗方法等基础医学及临床前研究具有重要作用。与啮齿类动物相比,猪在解剖、生理、营养代谢以及伦理方面更有优势,更适合做人类疾病动物模型。目前,通过基因编辑技术和体细胞克隆技术等方法产生了多种人类疾病模型猪。本文综述了近年来猪模型在糖尿病、心血管疾病、神经退行性疾病、遗传病以及肿瘤等多领域的研究进展,并探讨了不同模型存在的表型不稳定、不能准确模拟人类疾病等问题。本文为了解和推动猪在人类疾病动物模型中的应用提供重要参考。

野生动物种间体细胞核移植研究进展

种间体细胞核移植(Interspecies somatic cell nuclear transfer,iSCNT)作为体细胞核移植(Somatic cell nuclear transfer,SCNT)中极具潜力的研究方向之一,在转基因动物的生产、优良种群的繁育、濒危动物的保护、灭绝物种的“再生”以及野生动物繁育和生物多样性保护等方面具有广泛的应用前景。本文通过对猫科、犬科、牛科、猪科和西貒科等野生动物的种间核移植技术的研究进展和技术屏障进行阐述,为促进iSCNT技术在野生动物繁殖、育种和多样性保护等方面的进一步应用提供理论基础和技术指导。

胰腺导管单克隆上皮样干细胞的多分化潜能

体外诱导源于成年大鼠的胰腺导管单克隆上皮样干细胞分化形成胰岛、神经、脂肪及成骨细胞,探讨干细胞的多分化潜能。扩增培养源于成年大鼠的胰腺导管单克隆上皮样干细胞,采用不同的诱导液体外诱导其向胰岛、神经、脂肪及成骨细胞分化,并通过DTZ染色、糖刺激试验、免疫荧光反应、油红O染色、茜素红染色或Vonkossa染色的方法对分化细胞进行检测。结果显示,体外诱导培养干细胞分化形成类胰岛,DTZ染色阳性,糖刺激分泌胰岛素、C-肽;分化形成类神经细胞,表达神经元特异性烯醇化酶;分化形成类脂肪细胞,油红O染色阳性;分化形成类成骨细胞,其分泌物呈岛状矿化结节,茜素红和Vonkossa染色阳性。这表明,该源于成年大鼠的胰腺导管上皮样干细胞系具有多分化潜能。

培养液添加物对精原干细胞分化形成精子影响的研究进展

精原干细胞(Spermatogonial stem cells,SSCs)具有自我更新和分化产生子代的能力,并且SSCs本身就是生殖细胞,能将遗传信息传递给下一代,是雄性成体内唯一可复制的二倍体永生细胞。SSCs在有限时间内可在体外培养扩增,并且能定向诱导为特异性细胞,可以为探讨精子的发生机制,治疗雄性不育和胚胎干细胞建系提供一条新的途径。笔者通过对SSCs的体外培养,分别以维生素、激素等作为精原干细胞体外分化诱导剂,将精原干细胞诱导使其分化为精子,以研究诱导剂对精原干细胞分化的影响。探讨精原干细胞(SSCs)在体外特定的培养条件下向精子分化的可能性。

牛骨髓间充质干细胞体外培养体系的优化

结合红细胞裂解法和全骨髓细胞贴壁培养法分离获得胎牛骨髓MSCs（bBMSCs），经贴壁培养、传代纯化后对其生物学特性进行检测，进而设定不同浓度胎牛血清-血清替代物（FBS-KSR）组合培养基（10％FBS、5％FBS＋5％KSR、2．5％FBS＋7．5％KSR、10％KSR），对第5代bBMSCs进行体外培养，并对其增殖、多能性及凋亡情况进行检测。结果显示：原代bBMSCs具有贴壁特性，呈成纤维样细胞形态，表达MSCs相关标记分子CD73、CD90、CDl05，不表达相关阴性分子标记CD45、CD34；体外具有成脂及成骨分化潜能，生长曲线呈典型的“s”型。CCK8检测显示，5％和7．5％的KSR可作为FBS的替代品，对bBMSCs体外增殖有显著促进作用。荧光定量PCR结果显示：添加不同浓度KSR后增殖相关基因bFGFmRNA水平显著升高（P〈0．01），进一步证明KSR可以提高bBMSCs的增殖能力；多能性相关基因检测显示，添加KSR纽中Oct4、Sox2rnRNA表达水平也显著上调；凋亡相关基因检测显示，5％FBS＋5％KSR组中抗凋亡基因Bcl2tuRNA水平显著上调，而2．5％FBS＋7．5％KSR组中Bcl2表达显著下降而促凋亡基因Ba．rmRNA水平显著提高。推测这是由于细胞传代培养1周时，各组中细胞可能处于生长周期的不同时期，5％FBS＋5％KSR和2．5％FBS＋7．5％KSR组中细胞已到达平台期，发生生长抑制，需及时传代，而10％FBS组中细胞仍处于对数生长期，未发生细胞凋亡。这也进一步说明，适当浓度KSR缩短了bBMsCs体外增殖周期，提高了细胞的增殖效率。结果表明：培养基中适当添加KSR有利于bBMSCs的体外扩增和多能性维持，同时需注意根据增殖周期变化调整传代时间，这对进一步优化牛及其他动物BMSCs的体外培养条件具有借鉴意义。