制何首乌标准饮片的均匀化工艺研究

目的优选制何首乌标准饮片的均匀化工艺。方法以出粉率为指标进行单因素考察,再在此基础上设计L_9(3~4)正交试验,以出粉率、粒度跨距、醇溶性浸出物、二苯乙烯苷和游离蒽醌的质量分数,以及指纹图谱总峰面积为指标,对投药体积、单次打粉时间、打粉次数3个影响因素进行考察,优选制何首乌标准饮片的均匀化工艺。结果优选出最佳均匀化工艺条件为:投药体积占打粉机体积的2/3,单次打粉40 s,打粉2次。结论优选出的最佳均匀化工艺稳定,合理可行,可为制何首乌标准饮片均匀化技术规范的制定提供参考依据。

何首乌标准饮片均匀化方法研究

目的:选择并优化何首乌标准饮片的均匀化方法。方法:结合现代分析技术,运用正交试验法,以试验所得粉末的出粉率、二苯乙烯苷、结合蒽醌、浸出物、粉末径距、HPLC指纹图谱指纹峰总面积的测定值为考察指标,考察粉碎时间(A)、投料量(B)、粉碎次数(C)对均匀化方法的影响。结果:采用综合评分法对正交试验结果进行评价,最终优选出最佳均匀化方法为A1B1C2,即粉碎时间30s、投料量1/3、打粉次数3次。结论:通过验证试验,表明最佳均匀化方法稳定可行,为何首乌均匀化标准饮片的质量标准研究提供了参考依据。

制何首乌饮片HPLC特征图谱研究

目的:建立制何首乌饮片HPLC特征图谱,为制何首乌饮片鉴别提供可靠方法。方法:采用HPLC色谱法,AQ-C(18)色谱柱(4.6 mm×250mm,5μm),甲醇-0.05%磷酸水为流动相梯度洗脱,流速0.8 mL·min^(-1),检测波长260 nm,柱温30℃。运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统进行分析。结果:以2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡萄糖苷为参照峰,初步构建了由4个特征峰组成的制何首乌饮片HPLC特征图谱。结论:该法建立的特征图谱可为制何首乌饮片的鉴别提供参考。

HPLC指纹图谱评价何首乌和制何首乌不同提取部位肝毒性

目的 HPLC指纹图谱评价何首乌和制何首乌不同提取部位肝毒性。方法基于内毒素(脂多糖,LPS)的特异质肝损伤动物模型,HPLC法测定何首乌和制何首乌不同提取部位信噪比(S/N)大于10的指纹峰总面积,并以大鼠ALT、AST水平为评价指标,从而获得特异质肝损伤评价。结果何首乌与制何首乌3种提取部位的S/N比值大于10的指纹峰总面积从大到小依次为50%乙醇、75%乙醇、水,何首乌联合LPS给药组的肝损伤严重程度从重到轻依次为LPS+50%乙醇-何首乌、LPS+75%乙醇-何首乌、LPS+水-何首乌,制何首乌联合LPS给药组的肝损伤严重程度从重到轻依次为LPS+50%乙醇-制何首乌、LPS+75%乙醇-制何首乌、LPS+水-制何首乌。结论何首乌、制何首乌50%乙醇提取的部位毒性最大,HPLC总峰面积也最大,能更好的体现毒性成分信息。

基于内毒素特异质模型的何首乌毒性与炮制工艺研究

目的基于内毒素特异质肝损伤模型,考察不同炮制程度的何首乌对大鼠肝脏的损伤作用,以优选何首乌最为安全的炮制工艺。方法采用无毒剂量的脂多糖(LPS,尾静脉注射2.8 mg/kg)制备内毒素特异质模型大鼠,模型大鼠和正常大鼠均灌胃给予12.96 g/kg不同炮制程度(0、8、16、24、32 h)的何首乌50%乙醇提取物,各给药1次,检测大鼠血浆中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平以及HE染色观察肝脏病理学改变。结果在灌胃给予不同炮制程度的何首乌50%乙醇提取物后,正常SD大鼠上,未见明显肝损伤作用,炮制24 h,32 h组ALT,AST值低于正常组;在内毒素特异质模型上,生首乌的ALT,AST值显著升高,炮制8 h,炮制16 h的ALT,AST值均高于正常组。结论何首乌以常压炮制32 h最为安全。

高效液相色谱法测定阳和膏中双酯型生物碱限量

目的建立测定阳和膏3种双酯型生物碱限量的高效液相色谱(HPLC)法。方法色谱柱采用Inertsil ODS-3柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-四氢呋喃(25∶15)及以0.1 mol/L醋酸铵溶液(每1 000 m L加冰醋酸0.5 m L),梯度洗脱;体积流量为1.0 m L/min;柱温为20℃;检测波长为235 nm。结果新乌头碱、次乌头碱和乌头碱分别在0.214 8~2.148 0μg,0.196 8~1.968 0μg,0.204 0~2.040 0μg范围内与峰面积线性关系良好,平均回收率分别为93.24%,98.49%,94.93%,RSD分别为2.12%,2.51%,2.65%(n=6)。结论该方法可靠,重复性好,可用于阳和膏的质量控制。

牡丹皮炮制前后HPLC指纹图谱比较

目的:建立牡丹皮、酒牡丹皮HPLC指纹图谱,并进行比较研究。方法:采用高效液相色谱法,Luna C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.2%磷酸水梯度洗脱,流速0.8 m L·min^(-1),柱温25℃,检测波长230 nm,进样量10μL。结果:牡丹皮、酒牡丹皮HPLC指纹图谱均含有相同的12个共有峰,与其相应的对照图谱的相似度均>0.90。炮制前后牡丹皮指纹图谱差异不大,但酒牡丹皮3号和6号峰的峰面积明显增加。结论:该方法准确可靠,为酒牡丹皮进一步研究提供试验依据。

何首乌标准饮片的HPLC特征图谱分析

目的:建立何首乌标准饮片的HPLC特征图谱,并与何首乌原形饮片、原料药材、对照药材的HPLC特征图谱进行对比分析。方法:采用HPLC,Waters BEH-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇(A)-0.1%磷酸水溶液(B)梯度洗脱(0~20 min,15%~30%A;20~35 min,30%~40%A;35~55 min,40%~75%A;55~75 min,75%~100%A),柱温30℃,检测波长270 nm,流速0.8 mL·min^-1,进样量10μL;对何首乌标准饮片及其原形饮片、原料药材、对照药材的HPLC特征图谱进行相似度分析和聚类分析。结果:构建了由7个色谱峰组成的何首乌标准饮片HPLC特征图谱;何首乌标准饮片与原形饮片特征图谱的相似度达0.999,优于原料药材、对照药材与原形饮片特征图谱的相似度;标准饮片与原形饮片的图谱在色谱峰个数上无明显差异,而对照药材与原形饮片图谱在峰个数上有明显差异;并且标准饮片与原形饮片、对照药材大体上聚为一类,而原料药材大体上聚为一类。结论:相比较原料药材和对照药材,所建立的何首乌标准饮片HPLC特征图谱能更好地反映原形饮片的内在质量,可用于何首乌饮片的质量控制。