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靶向磷脂酰肌醇蛋白聚糖1的DNA适配体筛选
1
作者
翟景勤
窦晓倩
+3 位作者
王文宇
付洁
王宇光
宋海峰
《生物技术通讯》
CAS
2018年第1期31-37,共7页
目的:筛选获得特异性结合磷脂酰肌醇蛋白聚糖1(GPC1)的单链DNA适配体。方法:合成全长81 nt,中间含39个随机序列的单链寡核苷酸(ss DNA)文库,运用指数富集配基系统进化(SELEX)技术筛选获得GPC1适配体;酶联免疫吸附分析法(ELISA)实验确定...
目的:筛选获得特异性结合磷脂酰肌醇蛋白聚糖1(GPC1)的单链DNA适配体。方法:合成全长81 nt,中间含39个随机序列的单链寡核苷酸(ss DNA)文库,运用指数富集配基系统进化(SELEX)技术筛选获得GPC1适配体;酶联免疫吸附分析法(ELISA)实验确定候选适配体与GPC1蛋白的亲和力,流式细胞术确定候选适配体与2种GPC1高表达细胞系(胰腺癌Panc-1细胞和工具细胞Luc-ZR-75-1^(GPC1))的结合特异性。结果:经过10轮SELEX筛选获得#9适配体,ELISA分析其亲和力为44±0.69 nmol/L,流式细胞术结果表明其与胰腺癌Panc-1细胞和Luc-ZR-75-1^(GPC1)细胞的阳性结合率分别为44.69%和51.44%。结论:筛选获得与GPC1蛋白有较高亲和力、与表达GPC1细胞系特异结合的ss DNA适配体。
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关键词
磷脂酰肌醇蛋白聚糖1(GPC1)
适配体
SELEX技术
流式细胞术
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职称材料
题名
靶向磷脂酰肌醇蛋白聚糖1的DNA适配体筛选
1
作者
翟景勤
窦晓倩
王文宇
付洁
王宇光
宋海峰
机构
安徽医科大学
军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所
军事科学院军事医学研究院生命组学医学研究所
出处
《生物技术通讯》
CAS
2018年第1期31-37,共7页
基金
国家重大专项"生物大分子药物非临床评价关键技术研究"(2015ZX09501007)
文摘
目的:筛选获得特异性结合磷脂酰肌醇蛋白聚糖1(GPC1)的单链DNA适配体。方法:合成全长81 nt,中间含39个随机序列的单链寡核苷酸(ss DNA)文库,运用指数富集配基系统进化(SELEX)技术筛选获得GPC1适配体;酶联免疫吸附分析法(ELISA)实验确定候选适配体与GPC1蛋白的亲和力,流式细胞术确定候选适配体与2种GPC1高表达细胞系(胰腺癌Panc-1细胞和工具细胞Luc-ZR-75-1^(GPC1))的结合特异性。结果:经过10轮SELEX筛选获得#9适配体,ELISA分析其亲和力为44±0.69 nmol/L,流式细胞术结果表明其与胰腺癌Panc-1细胞和Luc-ZR-75-1^(GPC1)细胞的阳性结合率分别为44.69%和51.44%。结论:筛选获得与GPC1蛋白有较高亲和力、与表达GPC1细胞系特异结合的ss DNA适配体。
关键词
磷脂酰肌醇蛋白聚糖1(GPC1)
适配体
SELEX技术
流式细胞术
Keywords
glypican-1(GPC1)
aptamer
SELEX technology
flow cytometry
分类号
Q24 [生物学—细胞生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
靶向磷脂酰肌醇蛋白聚糖1的DNA适配体筛选
翟景勤
窦晓倩
王文宇
付洁
王宇光
宋海峰
《生物技术通讯》
CAS
2018
0
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