鸡、鹌鹑及其属间杂交种DMRT1b转录本初步分析

DMRT基因家族是一个与性别决定相关的发育基因家族。以鸡、鹌鹑及其属间杂交种胚胎为试验对象,分别采集孵化72 h的鸡、鹌鹑和杂交种胚胎,以DMRT1b为目的基因进行扩增,对DMRT1b基因原序列、扩增序列分析,应用Ex PASy网站对序列编码蛋白进行蛋白质生物信息学分析,结果发现杂交种DMRT1b基因较其父母本发生部分碱基缺失,预测蛋白质功能存在差异,推测由于基因缺失导致蛋白质不同,这种现象可能与杂交种早期死亡、不育存在相关性。研究结果为鸡与鹌鹑属间杂交种雌性致死与雄性不育的研究奠定基础。

乏情期新疆哈萨克绵羊血清中P_4、E_2、FSH和LH生殖激素变化规律分析

采用酶联免疫法(ELISA)测定孕酮(P4)、雌激素(E2)、促卵泡素(LH)和促黄体素(FSH)浓度,研究新疆哈萨克绵羊乏情期发情及不发情绵羊体内激素变化。结果表明:乏情期发情绵羊P4的含量显著低于不发情绵羊(P<0.05),发情绵羊E2、LH和FSH的含量显著高于不发情绵羊(P<0.05),且P4浓度变化趋势可以作为乏情期绵羊发情鉴定的手段。结果表明:乏情期发情绵羊P4的含量显著低于不发情绵羊(P<0.05),发情绵羊E2、LH和FSH的含量显著高于不发情绵羊(P<0.05),且P4浓度变化趋势可以作为乏情期绵羊发情鉴定的手段。

散养对皖南三黄鸡生长性能及肉品质的影响

为探究散养对皖南三黄鸡生长性能和肉品质的影响,试验选择80羽4周龄、体重相近、健康无病的的皖南三黄鸡,随机分为笼养组和散养组,笼养组每只鸡单笼,每组40个重复。试验期9周。结果表明:6周龄时散养组体重高于笼养组(P<0.05),试验期散养组胫围高于笼养组(P<0.05);笼养组的肌肉滴水损失率、蒸煮损失率和失水率以及腿肌水分、粗脂肪含量和pH高于散养组(P<0.05);与散养鸡相比,笼养鸡生长速度较快,但散养鸡肌肉系水力高于笼养鸡(P<0.05),表明散养鸡肉品质优于笼养鸡。综上,生产者应该根据自身情况以及不同市场对鸡肉产品的不同要求选用适宜的饲养方式。

新疆哈萨克绵羊在乏情期和发情期生殖激素的变化规律

旨在通过检测乏情期和发情期的发情绵羊外周血液中4种重要生殖激素孕酮(P4)、雌激素(E2)、促卵泡素(LH)和促黄体素(FSH)浓度,解析绵羊乏情期和发情期哈萨克绵羊发情时生殖激素的变化规律,以期阐明哈萨克绵羊发情时生殖激素变化规律,为调控绵羊的季节性发情提高激素方面的理论。采用ELISA方法测定4种生殖激素浓度,结果表明:哈萨克绵羊P4和E2在发情周期内呈现波动式变化,LH和FSH在发情周期内呈现脉冲式变化,且乏情期和发情期4种激素浓度变化显著(P<0.05)。

新媒体时代时事新闻版权保护刍议

版权是文化产业的核心要素，版权作品的合理、合法使用是出版业健康发展的有力保障。本期栏目选取的一组来稿是中国传媒大学编辑出版研究中心在读硕士研究生对于网络传播平台上版权问题的观察与思考。笔触尽管稚嫩但行文间不乏新鲜见地，青年学子对于出版业诸多现象的关注与表达值得鼓励。此外，这组文章经由编辑部与作者沟通修改，采用短小篇幅讨论具体问题，是为本刊文风追求简明了当的持续尝试。

非繁殖季节发情与乏情哈萨克羊下丘脑差异表达基因分析

通过构建数字基因表达谱(Digital Gene Expression,DGE)文库,筛选出非繁殖季节乏情与营养诱导的发情哈萨克羊下丘脑差异表达基因,为丰富绵羊发情机制奠定基础。本研究选取36只哈萨克羊随机分为补饲组和对照组各18只。非繁殖季节采集3只乏情和3只补饲后发情的哈萨克羊下丘脑,构建DGE文库并进行差异基因数字表达谱分析。结果表明:通过补饲能够使处于非繁殖季节的哈萨克羊发情,其发情率为44%,而对照组没有发情现象。经差异基因数字表达谱分析,补饲组发情与对照组乏情下丘脑共筛选出828个差异表达基因,其中728个上调,100个下调。GO功能富集分析表明,差异表达基因主要在神经元胞体、轴突、细胞膜上表达,具有调节GTP酶的活性等功能,这些基因还参与细胞通讯、信号调控、神经冲动传导、细胞定位等生物过程。通过Pathway分析发现,差异表达基因显著富集在Gn RH信号通路、神经营养因子的信号转导通路、胰岛素信号通路等31条信号通路。结合DGE文库及已有文献筛选出GNAQ、ERα、PI3K、POMC可能是参与营养诱导的调控哈萨克羊非繁殖季节发情相关通路的关键基因。

利用DGE技术筛选雌雄鹌鹑胚胎发育至第3天与性别分化相关的差异表达基因

为了研究鹌鹑早期性别分化时期基因的表达情况,本研究利用数字表达谱技术(DGE)对发育至第3天的雌性鹌鹑胚胎和雄性鹌鹑胚胎进行研究。结果显示:建立了雌性鹌鹑胚胎和雄性鹌鹑胚胎2个DGE文库,对比分析后得到了34个差异表达的基因,其中雌性胚胎相对于雄性胚胎10个为上调基因,24个为下调基因,通过对这些差异基因进行GO/KO富集性分析,筛选出了4个跟性别分化相关的基因,分别为HINT1、ASW、HSD17B4基因和未知功能的ID为ENSGALG00000013312的基因。

FGF8、SHH、FOXL2基因在鸡胚成纤维细胞中的调控作用研究

为了研究SHH、FGF8和FOXL2三个基因在鸡和鹌鹑杂交禽胚胎早期发育中的作用,分别构建鸡SHH、FGF8和FOXL2三个基因共9个RNA干扰载体,构建FGF8基因和SHH基因的过表达载体;将干扰载体和过表达载体分别转染鸡胚成纤维细胞。结果表明:FGF8基因通过MAPK信号通路影响杂交种胚胎早期发育;SHH基因通过Hedgehog信号通路影响杂交种胚胎早期发育;FOXL2基因通过调节DMRT1、SOX9和CYP19等基因的表达变化来影响杂交种胚胎早期发育。本研究可为进一步研究雌性杂交种胚胎早期死亡的原因奠定理论基础。

基于数字基因表达谱筛选雌雄鸡胚胎性别分化相关的差异表达基因

目的为探究家禽早期胚胎发育中与性别分化相关基因的表达情况。方法本试验通过数字基因表达谱技术(DGE技术)以发育到72 h的雌性和雄性鸡胚胎为研究对象。结果成功构建了雌性和雄性鸡胚胎文库,通过对比及分析后得出有66个表达差异基因,包括雌性对雄性表现上调的基因为25个、下调的基因为41个。通过对这些差异基因进行GO功能和KEGG Pathway显著性富集分析显示差异基因主要参与生长发育、生殖、细胞的增殖分化相关,筛选出了5个与鸡性别分化相关的基因,分别是HINT1Z、SOX 9、RSPO1、DMRT1和LHX 9基因。结论经实时荧光定量PCR验证,结果显示HINT1Z基因在雄鸡中比在雌鸡中的表达量较高,在雌雄鸡中表达差异不显著;RSPO 1基因表达雌鸡比雄鸡中高;SOX 9基因表达量雄鸡高于雌鸡且差异极显著(P<0.01);DMRT 1基因在雄鸡中的表达量高于雌鸡且差异极显著(P<0.01);LHX 9雄鸡中的表达量较雌鸡中高但差异不显著。

不同水平酪氨酸对体外培养绵羊下丘脑神经细胞分泌GnRH的影响

实验旨在验证脑内神经递质酪氨酸(Tyrosinase,Tyr)通过调控多巴胺的合成,作用于下丘脑神经细胞分泌的促性腺激素释放激素(GnRH)能够引起绵羊发情的可能浓度和机制。本实验分别对绵羊下丘脑神经细胞采用0(对照组)、0.02、0.2、2 mmol/L Tyr处理,24 h后检测绵羊发情相关基因DRD1蛋白、mRNA表达量及GnRH水平。结果表明:0.2 mmol/L Tyr组DRD1蛋白、mRNA表达量及GnRH水平均高于其他处理组(P<0.05),0.02、0.2、2 mmol/L Tyr组的GnRH水平较对照组分别提高12%(P<0.05)、29%(P<0.01)、-35%(P<0.05)。可见,绵羊下丘脑神经细胞中0.2 mmol/L Tyr可高效率调控多巴胺的合成,其作用于基因DRD1进而放大GnRH效应,为诱导绵羊发情的内分泌机制研究提供科学依据。

《家畜育种学》课程教学方法改革与实践

《家畜育种学》是动物科学专业的一门必修核心专业基础课程。为了提高《家畜育种学》课程的教学效果,通过对《家畜育种学》课程的理论教学方法、实践教学方法、考核方式改革及案例库与试题库建设,将多种教学方法和手段相结合,提高了学生的学习兴趣,取得了良好的教学效果,为培养高质量的创新实践型畜牧专业人才打下基础。

CIDEA基因上游调控区变异对猪肌内脂肪性状的影响

[目的]本文旨在鉴定诱导细胞死亡DNA片段化因子α样效应因子A(CIDEA)基因上游调控区内与猪肌内脂肪沉积相关的单核苷酸多态性(SNP)位点,并分析关联位点对基因表达的影响,为解析CIDEA基因对猪肌内脂肪性状的影响机制提供参考。[方法]通过对猪CIDEA上游调控区2 kb片段测序,挖掘出肌内脂肪含量相关的候选SNP位点,在杜洛克×长白猪×大白猪群体中对候选位点进行关联分析;通过荧光定量PCR检测关联位点不同基因型个体的CIDEA基因表达量和肌内脂肪标记基因脂肪酸结合蛋白4基因(FABP4)、脂肪酸结合蛋白3基因(FABP3)的表达量;双荧光素酶报告基因系统分析突变位点对CIDEA基因转录活性的影响。[结果]猪CIDEA基因上游调控区包含6个SNP位点,连锁分析后选择g.97268816 T>A、g.97269217 G>A和g.97269353 C>T 3个标签SNP位点进行关联分析,发现g.97268816 T>A位点中AA基因型个体的肌内脂肪含量显著高于TT基因型个体(P<0.05),而g.97269217 G>A和g.97269353 C>T位点中3种基因型个体之间的肌内脂肪含量差异不显著(P>0.05)。g.97268816 T>A位点中AA基因型个体的CIDEA基因表达水平显著高于TT基因型个体(P<0.05),而FABP4基因表达水平则显著高于TT基因型个体(P<0.01)和TA基因型个体(P<0.05)。双荧光素酶报告基因活性的结果显示AA型个体的荧光素酶活性极显著高于TT型个体(P<0.01)。[结论]CIDEA基因上游调控区g.97268816 T>A位点与猪的肌内脂肪含量显著相关,突变可以导致CIDEA基因的表达水平升高,进而影响猪的肌内脂肪含量。

中国美利奴羊(新疆型)繁殖性状的遗传参数估计

本研究旨在估计中国美利奴羊(新疆型)繁殖性状的遗传参数,为优化中国美利奴羊(新疆型)选育方案提供理论支撑。本研究收集了新疆巩乃斯种羊场2003—2017年的中国美利奴羊(新疆型)系谱信息及配种产羔记录8033条。利用SAS 9.2的GLM过程分析群别、出生年份对4个繁殖性状(头胎妊娠天数、平均妊娠天数、头胎羔羊平均初生重、羔羊平均初生重)的影响,结果表明群别和出生年份对4个繁殖性状均有极显著影响;通过DMU软件对4个繁殖性状进行遗传参数估计,结果表明本研究中头胎妊娠天数(0.05±0.05)与平均妊娠天数(0.04±0.02)均属于低遗传力,羔羊平均初生重(0.11±0.02)属于中等遗传力,头胎羔羊平均初生重(0.38±0.05)属于高遗传力;平均妊娠天数和头胎妊娠天数之间的遗传相关为0.89,羔羊平均初生重与头胎羔羊平均初生重之间的遗传相关为0.53。研究结果发现,在中国美利奴羊(新疆型)育种、选育过程中不应忽视出生年份和群别的影响,在培育繁殖性能优良的细毛羊过程中应提高牧场管理水平及牧工操作技术。

利用DGE筛选早期雌性鸡与鹌鹑属间杂交种性分化相关基因

已有研究表明鸡与鹌鹑属间杂交种胚胎早期死亡与性别分化存在关联性,本试验通过高通量测序构建数字基因表达谱(DGE)筛选雌性鸡与鹌鹑杂交种早期(3d)性别分化的相关基因,有助于揭示胚胎性腺分化时期相关基因与其早期死亡间的作用,利用实时荧光定量PCR技术对筛选出与相关表达差异基因进行验证。结果表明,构建雌雄鸡、雌雄杂交种3d胚胎DGE文库,雌鸡与雄鸡之间差异表达基因中有25个上调,41个下调;雌杂交种与雌鸡之间差异表达基因中有55个上调,175个下调;雌杂交禽和雄杂交禽之间差异表达基因中有36个上调,36个下调;这些差异基因大都与胚胎生长发育、细胞分化繁殖相关基因为代表。GO功能富集分析表明,差异表达基因主要定位在参与细胞增殖、分化、胚胎发育等行使催化、促进生物学过程的功能;Pathway分析得出,雌雄鸡、雌鸡与雌杂交种、雌雄杂交种的差异基因分别富集在12、13、15条pathway中。分析推测得出可能由于这些差异基因在体内紊乱表达,导致调控胚胎发育、分化相关信号通路异常是雌杂交种早期死亡原因之一,筛选出的差异基因将为后续的雌性杂交种早期发育、死亡研究提供依据。

绵羊下丘脑神经元细胞培养与鉴定

通过改良神经元细胞体外培养体系,建立一种高效、可行的绵羊下丘脑神经元体外培养方法,为研究绵羊神经内分泌调节体系及季节性发情机理奠定基础。通过Ⅳ型胶原酶将90 d左右的胎羊下丘脑组织消化成单细胞悬液,接种到预先用多聚赖氨酸包被的培养皿中,2 d后更换为无血清培养基进行培养,并采用两种方法对神经元细胞进行鉴定。结果显示：培养2 d的下丘脑神经细胞,胞体较小且单个独立分布。培养4~6 d神经元的突起明显增多增长,神经元胞体变大。培养8d的神经元细胞更加成熟,突起联系更加紧密,形成密集的神经细胞网络。培养12d后,下丘脑神经元细胞活性减弱,部分细胞开始凋亡。通过RT-PCR检测发现,培养的下丘脑细胞能够表达神经元特异基因Noggin、TUBA4A,经免疫荧光鉴定下丘脑神经元细胞纯度为95.6%。这些结果表明,通过此细胞培养方法能够获得纯度较高的绵羊下丘脑神经元细胞,为进一步研究绵羊神经内分泌调节体系及季节性发情机理提供目标细胞。

哈萨克羊骨骼肌卫星细胞的分离培养及鉴定

为了建立可稳定传代的哈萨克羊骨骼肌卫星细胞培养体系,以90日龄的哈萨克羊胎羊后腿肌为试验材料,采用酶消化法(胶原酶与胰蛋白酶)对绵羊骨骼肌卫星细胞进行分离,差速贴壁法对细胞纯化;对得到的骨骼肌卫星细胞进行形态学鉴定;使用Pax7特异性标志蛋白进行免疫荧光鉴定。经过免疫荧光染色的Pax7基因的免疫阳性产物,呈明显的绿荧光,分布于细胞质中。本研究成功从哈萨克胎羊中分离出了具有良好增殖分化能力且便于传代的骨骼肌卫星细胞,为研究调控哈萨克羊肌肉生长发育的分子机制,为完善哈萨克羊肉品质的研究提供基础。

猪唾液中DNA的获取方法研究

为建立一套从猪口腔中采集唾液并高效地从唾液中提取DNA的方法,选取约15日龄的仔猪和180日龄成年公猪各5头,分别用不同唾液采样工具来采集唾液样品并进行DNA提取,通过NanoDrop 2000和琼脂糖凝胶电泳检测DNA的浓度和纯度;同时以猪肌肉组织样品提取的DNA为参照,对比不同方法和不同日龄猪唾液提取的DNA质量差异,PCR扩增GAPDH基因以验证唾液DNA的可用性。结果显示:针对不同日龄的猪可以利用棉签和海绵采样工具进行唾液采集;建立的裂解法可以成功地从猪唾液中提取DNA,比人唾液DNA提取的碘化钾法质量更优;DNA纯度、浓度以及GAPDH基因扩增产物与肌肉组织提取的DNA效果相比趋近一致。提示:本文建立的猪唾液DNA的获取方法成功。