一种单克隆多抗体ELISA测定降钙素原方法的建立及其临床价值的探讨

自20世纪90年代起,降钙素原（procalcitonin,PCT）作为一种生物标志物逐渐进入临床应用,临床价值越来越被认可。PCT的含量反映了全身性细菌感染的存在和严重程度[1],同时它的升高或降低直接反映疾病恶化或好转的趋势[2],也可用于对治疗结果的评价以及指导抗菌药物的使用[3],对于细菌性感染的标志性高于其他生物标志物。但由于检测方法的不同,试验的敏感性和特异性各不相同,

真菌(1,3)-β-D-葡聚糖多克隆抗体制备及ELISA竞争法检测体系的建立

目的：建立高特异性和敏感性的（1，3）-β-D-葡聚糖酶联免疫吸附试验（ ELISA）检测体系。方法经蛋白修饰的（1，3）-β-D-葡聚糖和真菌提取物作为免疫原制备兔多克隆抗体，并对高效价交叉反应弱的抗体进行纯化和辣根过氧化物酶（HRP）标记，最后建立真菌（1，3）-β-D-葡聚糖ELISA竞争法检测体系。结果建立的ELISA竞争法检测体系线性范围为3．125～200 pg／mL。添加100、25和6．25 pg／mL抗原的血清回收率为97．8％～113．6％，重复试验的变异系数＜15％。该检测体系能有效地从血清样本中检出低浓度的烟曲霉、白念珠菌和高浓度的隐球菌，并且对结核分枝杆菌、大肠埃希菌、沙门氏菌、克雷伯菌和金黄色葡萄球菌5种细菌抗干扰能力强。结论利用（1，3）-β-D-葡聚糖作为包被抗原，酶标抗体HRP-Ab3B作为检测抗体，成功建立了（1，3）-β-D-葡聚糖ELISA竞争法检测体系。