橙皮素通过Nrf2-ARE通路对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究橙皮素(HSP)对大鼠肾缺血再灌注损伤(RIRI)的作用,并探讨其作用机制。方法将50只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、HSP预处理组、全反式维甲酸(ATRA)预处理组(ATRA+I/R)、HSP+ATRA预处理组(HSP+ATRA+I/R),每组10只。假手术组仅打开腹腔暴露双肾。其余各组采用夹闭双侧肾蒂45 min,再用灌注24 h的方法建立RIRI模型。用苏木精-伊红(HE)染色法确定肾组织损伤水平;用微板法检测血清肌酸酐(Scr)水平;用脲酶法检测血清尿素氮(BUN)水平;用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL^(-1)β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;用试剂盒法检测肾组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)和过氧化氢酶(CAT)水平;用蛋白质印迹法检测肾组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)及其下游抗氧化蛋白血红素氧合酶-1(HO-1)和醌氧化物还原酶1(NQO1)的表达。结果假手术组、模型组、HSP预处理组肾小管损伤评分分别为(0.20±0.45)、(4.20±0.84)和(2.40±0.55)分;Scr含量分别为(55.52±11.23)、(207.10±19.22)和(105.60±18.11)μmol·L^(-1);IL-6含量分别为(33.66±6.83)、(172.50±8.09)和(105.40±10.03)pg·mL^(-1)。假手术组、模型组、HSP预处理组、ATRA预处理组和HSP+ATRA预处理组SOD水平分别为(57.04±3.44)、(37.29±3.60)、(51.61±9.41)、(32.55±5.58)和(37.40±3.66)U·mg·prot^(-1);Nrf2蛋白相对表达水平分别为0.37±0.24、0.57±0.28、1.31±0.34、0.44±0.17和0.77±0.25;HO-1蛋白相对表达水平分别为0.26±0.14、0.57±0.30、1.32±0.61、0.53±0.28和0.67±0.50。模型组与假手术组相比,肾小管损伤评分、Scr、IL-6、SOD指标比较,在统计学上差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);HSP预处理组与模型组相比,上述指标在统计学上差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论HSP可能通过激活Nrf2-抗氧化反应元件(ARE)通路上调其下游抗氧化蛋白的表达,减轻氧化应激对肾的损伤,进而改善RIRI。

橙皮素对高脂血症大鼠的血管内皮保护作用

目的研究橙皮素(HSP)对高脂血症(HLP)大鼠的血管功能障碍以及血管内皮损伤的保护作用。方法将50只大鼠随机分为对照组、模型组、低剂量实验组、中剂量实验组和高剂量实验组,每组10只。除对照组外其余各组均以高脂饲料喂养法制备高脂大鼠模型。4周后,低、中、高剂量实验组分别灌胃50、100、150 mg·kg^(-1)·d^(-1)HSP,对照组和模型组灌胃等剂量0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)。各组均灌胃4周,每日1次。4周后腹主动脉取血。以酶联免疫吸附(ELISA)法测定大鼠血脂总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)、血管内皮生长因子(VEGF)、前列环素2(PGI_(2))和血栓收缩素2(TXA_(2));以血管张力法测定HSP对冠状动脉舒张功能的影响。结果对照组、模型组和低、中、高剂量实验组的TC水平分别为(2.15±0.66),(6.38±1.31),(4.05±0.67),(3.98±1.20)和(3.06±0.92)mmol·L^(-1);这5组的TG水平分别为(0.89±0.17),(1.44±0.21),(1.45±0.23),(1.15±0.13)和(0.92±0.27)mmol·L^(-1);这5组的LDL-C水平分别为(0.62±0.12),(1.47±0.37),(1.33±0.35),(1.23±0.36)和(1.01±0.29)mmol·L^(-1);这5组的HDL-C水平分别为(1.34±0.15),(1.30±0.27),(1.39±0.18),(1.36±0.19)和(1.41±0.11)mmol·L^(-1);这5组的Ang-Ⅱ水平分别为(422.19±12.27),(553.79±13.17),(551.15±11.57),(533.00±11.69)和(496.00±16.67)pg·mL^(-1);这5组的VEGF水平分别为(184.81±2.45),(234.40±3.15),(226.00±4.87),(209.87±4.94)和(196.59±5.41)pg·mL^(-1);这5组的PGI2水平分别为(67.40±5.76),(86.03±5.02),(86.07±4.15),(70.53±7.03)和(68.59±5.86)pg·mL^(-1);这5组的TXA2水平分别为(101.44±5.47),(129.41±6.87),(126.50±5.27),(121.31±5.77)和(114.21±8.09)pg·mL^(-1);这5组对乙酰胆碱(ACh)的最大舒张率分别为(52.57±2.07)%,(32.12±1.93)%,(34.45±2.84)%,(42.97±1.75)%和(50.25±1.28)%。上述指标,模型组与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);中、高剂量实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论橙皮素可以减轻高脂所致的血管内皮损伤,对血管内皮细胞有一定的保护作用。