右心室功能不全患者β-羟丁酸代谢特征及与临床指标的相关性分析

目的 探讨右心室功能不全(RVD)患者β-羟丁酸(β-OHB)代谢特征及与临床指标的相关性。方法 选择2021年10月至2023年10月在该院心血管内科治疗的38例RVD患者纳入病例组。对照组按照年龄、性别、心血管危险因素等进行匹配,最终纳入47例研究对象。根据RVD患者疾病类型将其分为致心律失常性右室心肌病(ARVC)组和肺动脉高压(PAH)组2个亚组。检测并对比所有研究对象的血浆N末端-B型脑钠肽前体(NT-proBNP)及β-OHB水平。采用Pearson相关分析RVD患者β-OHB水平与其他指标的相关性。结果 病例组、对照组在年龄、性别、体质量指数、吸烟,以及合并高血压、高脂血症、糖尿病患者比例等方面比较,差异均无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,病例组血浆NT-proBNP和β-OHB水平明显升高(P<0.05)。ARVC组患者的血浆NT-proBNP[(2 126.1±708.9)pg/mL]和β-OHB[(142.4±55.9)μmol/L]水平高于PAH组患者[(688.4±317.7)pg/mL、(30.6±13.8)μmol/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析显示,血浆β-OHB水平与NT-proBNP(r=0.734,P<0.001)和右心室舒张末期直径(r=0.445,P=0.005)呈正相关,与肺动脉压呈负相关(r=-0.423,P=0.008)。结论 RVD患者血浆β-OHB水平明显升高,尤其是ARVC患者高于单纯PAH患者,提示病理性的右室心肌病患者发生了显著的β-OHB水平改变。

凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1在C反应蛋白诱导人脐静脉内皮细胞组织因子表达中的作用

目的研究凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(lectin-type oxidized LDL receptor1,LOX-1)在C-反应蛋白(c-reactive protein,CRP)诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)组织因子(tissue factor,TF)表达中的作用。方法用人重组质粒pTracer CMV2-CRP转染HUVECs细胞,分正常对照组、空质粒GFP组和CRP-GFP组(n=3),RT-PCR、Western blot检测TF、LOX-1 mRNA和蛋白表达。Western blot检测各组P-ERK1/2、T-ERK1/2、P-JNK、T-JNK蛋白表达。CRP-GFP组分别加LOX-1阻断剂、ERK1/2阻断剂(U0126)、JNK阻断剂(SP600125),Westernblot检测TF蛋白。结果用表达人CRP的质粒转染HUVECs显著增加LOX-1 mRNA和蛋白表达[(0.70±0.03)vs(0.24±0.01),(0.661 6±0.020 0)vs(0.255 8±0.040 0),P<0.05]、TF的mRNA和蛋白表达[(0.442±0.040)vs(0.146 0±0.030 0),(0.727 4±0.020 0)vs(0.217 4±0.020 0),P<0.05]。CRP启动了ERK1/2 MAPK,未启动JNKMAPK。CRP上调TF表达被ERK1/2阻断剂而非JNK阻断剂阻断.抗LOX-1的中和抗体显著减少CRP诱导的TF mRNA和蛋白表达[(0.264 0±0.030 0)vs(0.442 0±0.040 0),(0.324 4±0.040 0)vs(0.727 4±0.020 0),P<0.05]。结论CRP诱导HUVECs细胞LOX-1表达上调,并通过LOX-1受体这一新途径上调TF表达,且CRP通过ERK1/2 MAPK信号途径非JNK MAPK途径上调了HUVEC细胞TF的表达。

经犬心房外膜涂布实现外源基因在心房肌(细胞)的高效转染

心房肌高效的基因转染是一项技术难题.心房血供少、心房壁薄等原因限制了心房肌基因转染方法的发展.但心肌基因治疗作为一种研究和治疗心脏疾病的有效方法而逐渐被学者重视.本研究探讨一种经心房外膜涂抹使携带有绿色荧光蛋白(EGFP)基因的腺病毒高效靶向转染心房肌细胞方法的可行性.经犬胸骨正中开胸术,将含有一定浓度携带EGFP基因的腺病毒、胰蛋白酶和poloxamer F407的混合溶液涂抹至右心房外膜.术后经荧光显微镜观察荧光强度和实时PCR检测EGFP mRNA表达水平.EGFP荧光强度和mRNA表达水平在第1～6周呈现先增高后减低的趋势,其高峰在第3周出现;第3周右心房前壁各层心肌细胞均有EGFP表达;右心耳EGFP mRNA表达水平高于右心房前壁,右心房前壁和后壁表达水平无明显差异;房间隔的表达水平低于右心房,但明显高于左心房;心室和其它脏器如肺脏、肝脏、脾脏、骨骼肌、胃壁及小肠壁等的表达水平远低于右心房;通过HE染色及Masson's染色,第3周心肌无明显炎症反应和纤维化改变.因此,经心房外膜涂抹的方法使基因靶向转染心肌细胞具有较好的高效性、靶向性和安全性.

血清H-FABP、GDF-15、sICAM-1与PCI后心肌损伤的关系分析

目的分析冠心病相关血清指标心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)、生长分化因子15(GDF-15)、可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)与经皮冠状动脉介入术(PCI)后心肌损伤的关系。方法回顾性选取2020年3月至2022年3月在本院接受PCI治疗的200例冠心病患者为研究对象,根据术后3个月是否出现心肌损伤,将其分为心肌损伤组(n=42)和心肌未损伤组(n=158)。比较2组各项临床资料及血清H-FABP、GDF-15、sICAM-1等实验室指标水平,并采用受试者工作特征(ROC)曲线分析以上指标与冠心病患者PCI后心肌损伤的关系。结果心肌损伤组患者从发病到治疗时间明显长于心肌未损伤组,血清H-FABP、GDF-15、sICAM-1水平均高于心肌未损伤组(P<0.05)。建立相关性模型,结果显示,PCI后心肌受损与从发病到治疗时间相关性较弱(r=0.168,P<0.05),与血清H-FABP、GDF-15、sICAM-1均存在中等程度相关(r=0.424、0.403、0.442,P<0.05)。ROC曲线模型显示,血清H-FABP、GDF-15、sICAM-1均对PCI后心肌损伤具有一般诊断效能,三项联合检测具有较高准确性,其诊断AUC、约登指数、灵敏度、特异性分别为0.912、0.585、95.24%、63.29%。结论血清H-FABP、GDF-15、sICAM-1与冠心病患者PCI后心肌损伤的发生密切相关,三项血液指标联合检测对心肌损伤具有较高诊断和预测价值。

心脏再同步化治疗心力衰竭的Meta分析

目的:评价心脏再同步化治疗(伴或不伴除颤功能)在降低心力衰竭患者的死亡率方面的作用。方法:查阅已公开发表的有关心脏再同步化治疗心力衰竭的临床随机对照试验文献,以死亡率为主要评价指标,用Cochrane协作网的软件RevMan5.1进行Meta分析。结果:本次分析最终纳入文献12篇(n=7 539)。与单纯药物治疗组相比,心脏再同步化治疗(Cardiac resyn-chronization therapy,CRT)加药物治疗组的死亡率明显降低(RR 0.73,95%CI 0.62-0.85);而与埋藏式除颤器(Implantable car-dioverter defibrillator,ICD)治疗组相比,带除颤功能的心脏再同步化治疗组(CRT-D)死亡率亦显著降低(RR 0.83,95%CI 0.72-0.96)。在心功能Ⅰ、Ⅱ级(NYHA)的心力衰竭患者中,上述结果十分明显(RR 0.81,95%CI 0.67-0.97);但在心功能Ⅲ、Ⅳ级的患者中则不然(RR 0.86,95%CI 0.69-1.07)。结论:药物加心脏再同步化治疗及具备除颤功能的心脏再同步化治疗能显著降低心力衰竭患者的死亡率。

柿叶提取物减轻大鼠心梗后心肌细胞凋亡和心室重塑相关机制研究

目的:探讨大鼠心梗模型下柿叶提取物对心室重塑的影响及相关机制。方法:用24只Sprague Dawley大鼠结扎左冠状动脉前降支制作心肌梗死大鼠模型,随机分为心肌梗死组(n=8)、柿叶提取物组(n=8)、假手术组(n=8)。6周后,用TUNEL法测定心肌细胞凋亡,免疫印迹法检测心肌Fas、Caspase-3蛋白含量,并测定大鼠血流动力学参数和左心室质量指数。结果:柿叶提取物组、心肌梗死组左心室质量指数分别为2.417±0.053、2.514±0.101(F=136.762,P=0.011),明显低于心肌梗死组;柿叶提取物组、心肌梗死组Fas分别是0.342±0.058、0.585±0.059(F=163.991,P=0.000);柿叶提取物组、心肌梗死组Caspase-3蛋白水平分别是0.124±0.019、0.478±0.079(F=183.553,P=0.000),明显低于心肌梗死组。柿叶提取物组、心肌梗死组心肌细胞凋亡指数分别是1.198±0.171、0.507±0.132(F=93.023,P=0.000),明显低于心肌梗死组。柿叶提取物组左心室舒张末期压(left ventricular end diastolic pressure,LVEDP)明显降低(F=347.661,P=0.000),左心室收缩压(left ventricular systolic pressure,LVSP)明显增加(F=444.949,P=0.000)。结论:心肌细胞凋亡参与心肌梗死后心室重塑过程,柿叶提取物可能通过减少凋亡相关蛋白表达抑制心肌细胞凋亡从而预防心室重塑,改善心肌梗死后心脏收缩功能。

血管紧张素(-1-7)对血管紧张素Ⅱ在大鼠心脏成纤维细胞中信号转导的影响及其机制

目的探讨血管紧张素(-1-7)[Angiotensin(-1-7),Ang(-1-7)]对血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)在大鼠心脏成纤维细胞(Cardiac fibroblasts,CFs)中信号转导的影响及其机制。方法原代分离培养并鉴定新生SD大鼠的CFs,将细胞分为8组:空白对照组、AngⅡ组、Ang(-1-7)组、AngⅡ+Ang(-1-7)组、AngⅡ+Ang(-1-7)+A-779组、AngⅡ+Ang(-1-7)+PAO组、Ang(-1-7)+PAO组和AngⅡ+PAO组,Western blot法检测细胞外信号调节激酶1/2(Extracellular signal regulated kinase 1/2,ERK1/2)和磷酸化的ERK1/2(p-ERK1/2)的表达;免疫沉淀捕捉分析法检测蛋白酪氨酸磷酸酶-1(Src-homology domain 2 containing protein tyrosine phosphatase-1,SHP-1)的酶活性;实时荧光定量PCR检测转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)、I型胶原蛋白(CollagenⅠ,ColⅠ)和Ⅲ型胶原蛋白(CollagenⅢ,ColⅢ)基因mRNA的转录水平。结果 AngⅡ可增加细胞内p-ERK1/2的表达水平和p-ERK/ERK值(磷酸化的p-ERK1/2与总的ERK1/2的比值),Ang(-1-7)通过与Mas受体结合可拮抗AngⅡ引起的上述效应;Ang(-1-7)通过与Mas受体结合而激活胞内SHP-1的活性,并可拮抗AngⅡ所致的SHP-1活性降低;抑制SHP-1的活性后,Ang(-1-7)拮抗AngⅡ诱导的p-ERK1/2表达水平和p-ERK/ERK值增高的效应被抑制。Ang(-1-7)对TGF-β1、ColⅠ和ColⅢ基因mRNA的转录水平无显著影响,但可抑制AngⅡ所诱导的上述基因mRNA转录水平的增加。结论 Ang(-1-7)通过与Mas受体结合而激活SHP-1,该效应与Ang(-1-7)拮抗AngⅡ诱导的p-ERK1/2的表达水平和p-ERK/ERK值增高密切相关;Ang(-1-7)可抑制AngⅡ所诱导的TGF-β1、ColⅠ和ColⅢ基因表达上调,这些现象可能体现了一种Ang(-1-7)拮抗AngⅡ所致的不良效应的保护性机制。

羟基红花黄色素A对缺氧/复氧心肌细胞增殖与凋亡的影响

目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)调控微小RNA-499(miR-499)表达对缺氧/复氧心肌细胞增殖与凋亡的影响。方法将大鼠H9c2心肌细胞分为空白组(正常培养)、模型组(缺氧/复氧处理)和实验组(20μmol HSYA+缺氧/复氧处理)。干预48 h后于光学倒置显微镜下观察细胞形态,以活细胞计数试剂盒法检测细胞存活率,以DCF-DA荧光染色检测细胞内活性氧(ROS)水平,以试剂盒检测细胞损伤指标含量,以蛋白质印迹法检测心肌细胞凋亡相关蛋白及miR-499表达。结果干预48 h后,空白组、模型组及实验组H9c2心肌细胞存活率分别为(99.26±0.15)%,(45.12±3.62)%,(78.69±2.15)%,细胞上清液中肌酸激酶(CK)分别为(2.63±0.14),(6.25±0.29),(4.63±0.21)U·L-1,乳酸脱氢酶(LDH)分别为(22.63±3.15),(46.85±2.96),(32.16±2.86)U·L-1,细胞凋亡率分别为(2.63±0.24)%,(36.25±4.92)%,(13.29±4.15)%。细胞中Bax相对表达量分别为0.24±0.03,0.69±0.03,0.42±0.02,Caspase-3相对表达量分别为0.28±0.04,2.56±0.21,1.85±0.03,miR-499相对表达量分别为1.63±0.02,0.56±0.05,1.16±0.02,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 HSYA通过调控miR-499蛋白表达,抑制缺氧/复氧心肌细胞氧化应激反应,抑制细胞凋亡,促进细胞增殖,减轻心肌损伤。