单细胞转录组测序技术在帕金森病中的应用

背景:帕金森病以中脑特别是黑质致密部为主要病理改变,导致患者运动和非运动功能受损。目前研究受制于细胞异质性,其发病机制仍需要更深入的阐明。近些年,单细胞转录组测序(single-cell RNA sequencing,scRNA-seq)逐渐应用于神经退行性疾病中,对于理解细胞间异质性、疾病发展机制和治疗策略有重要意义。目的:综述近些年scRNA-seq技术应用于帕金森病的研究进展,为scRNA-seq在帕金森病诊断和治疗中应用提供理论基础。方法:由第一作者应用计算机系统检索中国知网、万方医学网数据库、PubMed、Web of Science数据库的相关文献,中文检索词为“单细胞RNA测序,帕金森病,细胞异质性,细胞亚型,多巴胺能神经元,胶质细胞”;英文检索词为“single-cell RNA-seq,Parkinson Disease,heterogeneity,subtypes,dopaminergic neurons,glial cells”,最终纳入71篇文献进行综述分析。结果与结论:(1)scRNA-seq是一种在单细胞水平上利用RNA测序对特定细胞群体进行基因表达谱定量的高通量实验技术,从分子水平揭示细胞奥秘。与传统的测序技术相比,scRNA-seq技术通过对细胞转录组进行自动聚类分析,从而揭示各种生理和病理情况下复杂组织中细胞类型多样性和特异性基因表达的变化。(2)通过scRNA-seq阐明多巴胺能神经元发育过程以及各种细胞亚型的独特功能特性,从而更好地了解具有潜在治疗作用的分子靶点。(3)利用scRNA-seq分析,提高了研究者对帕金森病胶质细胞反应的了解,从而全面表征了不同的细胞类型群体,并鉴定出与神经变性相关的胶质细胞亚群,绘制了有价值的单细胞图谱,作为未来研究的参考数据。(4)应用scRNA-seq检测胚胎小鼠以及干细胞,将有助于改善细胞治疗的体外分化方案和质量控制,以及评估干细胞衍生的中脑多巴胺能神经元的整体细胞质量和发育阶段。

宫腔粘连的中医药治疗方法

宫腔粘连(intrauterine adhesion,IUA)是妇科常见的子宫内膜基底层损伤性疾病,高危因素包括人工流产、诊断性刮宫术、流产后清宫术、宫腔镜手术、宫内节育器放置、宫腔感染等,临床多表现为月经量少、闭经、痛经、不孕等[1],严重影响女性的生育力和身心健康。据报道,90%以上的IUA发病与宫腔操作及感染密切相关,宫腔操作次数越多,宫内感染的风险越大,IUA的发病率越高[2]。

上海市老年人中医健康素养与健康促进水平的相关性研究

目的了解上海市老年人健康促进行为现状,并分析其与中医健康素养的相关性,为从中医药角度制定措施提升老年人健康行为提供参考。方法于2023年5-8月,采用便利抽样法以261例上海市老年人为研究对象,使用一般资料调查表、中医健康素养量表、老年健康促进量表进行调查。结果上海市老年人健康促进行为得分为(50.59±6.47)分,中医健康素养得分为(90.96±12.04)分。分层线性回归分析显示:教育程度、月收入、自评健康状况、慢性疾病数量、身体活动能力、生活自理能力是健康促进行为的影响因素(P均<0.05),自变量纳入中医健康素养后对健康促进行为总变异的解释率提升12.5%。结论上海市老年人中医健康素养处于较低水平,健康促进水平处于中等程度,老年人中医健康素养水平与健康促进水平密切相关,即中医健康素养越好,健康促进水平越高。因此,对于护理管理者而言,应关注中医药在老年群体中的应用效果,并采取科学的方法提升老年人的中医健康素养,从而促进其健康水平的提高和健康行为的改善。

温阳化浊方佐治气阴两虚型肺腺癌疗效观察

目的:研究温阳化浊方治疗肺腺癌患者的疗效及对患者相关免疫功能的影响。方法:选取睢县中医院2021年1月—2023年6月收治的60例肺腺癌患者为研究对象,根据治疗方案分为对照组和研究组各30例。对照组给予培美曲塞^(+)顺铂化疗,研究组在对照组基础上给予温阳化浊方治疗。经治3个周期后,比较两组患者治疗前后简易疲乏量表(PFI)评分、临床疗效、免疫功能指标(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+))、血清相关因子[癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、内皮细胞特异性分子-1(ESM-1)、腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)]水平,及不良反应发生率。结果:治疗后,研究组PFI评分低于对照组(P<0.05);研究组疾病控制率为93.33%(28/30),高于对照组的73.33%(22/30)(P<0.05);治疗后,研究组CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平高于对照组,CD8^(+)水平低于对照组(P<0.05);治疗后,研究组血清CEA、CYFRA21-1、ESM-1、TSLP水平低于对照组(P<0.05);研究组血小板减少、白细胞减少、恶心呕吐、肝功能损伤发生率均低于对照组(P<0.05)。结论:采用温阳化浊方辅助治疗肺腺癌,可显著提高抗癌效果,减轻化疗所致的免疫功能损伤,减少不良反应发生,进一步改善预后。

巨型犬股骨头和股骨颈切除术的治疗和术后护理

股骨头和股骨颈切除术是一种常见的用于髋关节疾病治疗的手术方法。但受限于巨型犬体重相关的术后并发症,该术式极少在体重40 kg以上的患犬施行。本病例报道为1例2岁,体重64 kg,患髋关节发育不良的圣伯纳犬,实施股骨头和股骨颈切除术,并应用富血小板血浆和水下跑步机的治疗和康复理疗方法,取得了良好的治疗效果,为超大体重巨型犬应用该手术方法和术后护理提供了新思路。

一例犬口腔成釉细胞癌病例的诊断与治疗

上海每诺家宠物医院接诊1例右侧面部、鼻腔肿胀溃烂的法国斗牛犬病例,经临床检查、血常规及生化检测、影像学检查,初步诊断该犬患口腔肿瘤,遂实施部分单侧上颌骨切除、右眼球摘除及肿瘤减瘤术,术后7 d内给予消炎、止血、镇痛药物治疗;术后第11天,患病犬食欲、大小便正常,精神佳,伤口愈合,顺利出院。摘除的口腔肿瘤组织经病理学检查,确诊为罕见的成釉细胞癌。

表皮生长因子改善老年大鼠自发运动活性衰退伴随黑质多巴胺含量升高

目的:探讨表皮生长因子(EGF)对老年大鼠自发运动活性及黑质-纹状体多巴胺体系(NSDAs)的影响。方法:经皮给予健康24月龄大鼠EGF(0.15 mg/mL)7 d,通过旷场试验检测大鼠的自发运动活性;通过实时定量PCR和免疫印迹检测NSDAs中酪氨酸羟化酶(TH)和多巴胺转运体(DAT)的表达;通过液相色谱-串联质谱分析NSDAs中多巴胺(DA)的含量变化。结果:老年组大鼠自发运动活性、NSDAs中TH和DAT的表达以及DA的含量均较成年大鼠显著下降。EGF处理后,老年大鼠自发运动活性、NSDAs中TH和DAT的表达以及黑质(而非纹状体)DA的含量显著上升,但未达到成年大鼠水平。结论:EGF改善老年大鼠自发运动活性衰退伴随黑质DA含量升高。

磁悬浮左心室辅助装置植入术后患者Ⅰ期心脏康复的护理

总结7例磁悬浮左心室辅助装置植入术患者Ⅰ期心脏康复的护理体会。针对患者在磁悬浮左心室辅助装置植入术后病情较重、运动能力下降、设备管理复杂等问题,采取心脏康复前评估、呼吸功能及运动功能训练、设备参数及安全管理、心电及平均动脉压监测、经皮线缆切口管理等措施。该组患者经35~61 d的积极治疗与护理后,痊愈出院,出院后随访3个月,患者恢复情况良好。

环状RNA在阿尔茨海默病中的作用及研究进展

环状RNA(circRNA)是一类内源性表达的非编码RNA,通过反向剪接共价闭合环化而形成。近年来,已鉴定出多种在真核生物中具有高度保守性和细胞类型特异性的circRNA。阿尔茨海默病(AD)是常见的神经退行性疾病,是老年痴呆的主要原因。近年来的研究表明,circRNA参与了AD病理进程的发生发展,如β-淀粉样蛋白(Aβ)代谢、神经元分化和炎症损伤、氧化应激、自噬以及突触可塑性。我们就circRNA在AD病理中的作用及应用价值进行综述,为circRNA在AD诊断和治疗中的应用提供理论基础。

环状RNA在衰老中研究进展

衰老是在年龄增长过程中,机体损伤不断累积,进而各组织、器官、系统发生退行性变化的复杂过程。衰老与电离辐射、活性氧、诱变蛋白等环境和遗传因素密切相关,但其具体机制仍不清晰。衰老相关疾病的发生,如阿尔茨海默病、帕金森病、心血管疾病等是全球危害老年人身心健康的重要原因〔1〕。

HPLC-DAD-ESI/MS^n-DPPH在线筛选与鉴别丹参和康定鼠尾草中抗氧化活性成分

本研究建立了在线高效液相色谱-质谱-二苯基三硝基苯肼(HPLC-DAD-ESI/MSn-DPPH)快速筛选和鉴别丹参和康定鼠尾草中抗氧化活性成分和含量的方法。经液相色谱、质谱和文献报道综合分析鉴定出丹参和康定鼠尾草中的3种抗氧化活性化合物,分别为咖啡酸、异迷迭香酸苷和迷迭香酸。比较了热回流、超声辅助提取和快速溶剂萃取的提取效果,并对色谱条件进行优化。在优化条件下,这3种化合物均可有效分离,并在1.7~35.3μg/m L范围内线性关系良好,相关系数为0.999 5~0.999 8,检出限为0.05~1.85μg/m L,定量下限为0.18~6.16μg/m L,平均回收率为96.6%~97.2%,相对标准偏差为1.1%~1.3%。运用该方法测定丹参和鼠尾草样品中这3个化合物的含量分别为:咖啡酸0.303,0.254 mg/g;异迷迭香酸苷1.019,1.401 mg/g;迷迭香酸17.279,8.104 mg/g。本方法简便、快速、准确、重现性好,适用于从复杂天然产物中快速筛选与鉴别抗氧化活性成分。

离子色谱法测定黑果枸杞中的甜菜碱

建立黑果枸杞中甜菜碱的离子色谱测定法。采用Metrosep C4阳离子分析柱（150 mm×4.6 mm,4μm）,柱温为38.5℃,1.5 mmol/L甲烷磺酸溶液为流动相,流速为0.8 m L/min,电导检测器。结果表明,甜菜碱在10.4～830.0 mg/L质量浓度范围内线性关系良好（R2=0.999 8）,加标回收率在95.51%～98.06%（n=3）之间。所建方法操作简便、重复性好,适用于黑果枸杞中甜菜碱含量测定。

自主学习模式在局部解剖学教学中的探索

局部解剖学是基础与临床的桥梁课。传统的局部解剖学教学多采用“教师讲,学生听”的单一授课模式,教学过程中只注重教师的主导作用,忽略了学生的主观能动性及其主体作用[1]。学生按照既定的内容分组进行解剖操作,并在解剖过程中观察验证教师所讲的理论知识,学习兴趣和主动性递减。学习成为了被动接受记忆的过程,严重阻碍了学生创新批判性思维的发展,降低了学生的学习积极性和探索热情[2]。

背侧抑制性轴突导向蛋白抑制鸡胚脊髓神经嵴细胞的迁移

目的:初步探讨背侧抑制性轴突导向蛋白(draxin)在鸡胚脊髓神经嵴细胞迁移过程中的作用。方法:应用神经嵴细胞特异性标记物HNK-1免疫组化染色检测不同发育阶段正常鸡全胚脊髓神经嵴细胞迁移特性;鸡draxin表达载体质粒转染COS7细胞株,收集上清作为条件培养液。分别用含draxin的条件培养液处理体外培养的鸡全胚和鸡胚脊髓神经管,观察在体和离体条件下draxin对脊髓神经嵴细胞迁移特性的影响。结果:HH12-13到HH18-19阶段正常鸡胚脊髓发育过程中,神经嵴形成明显的从头侧到尾侧的渐进性、节段性迁移特性;draxin对体外培养的全胚和神经管内神经嵴细胞的迁移均具有明显抑制性调控作用。结论:Draxin抑制早期鸡胚脊髓神经嵴细胞的迁移。

条件性味觉厌恶分化后臂旁核c-fos表达的变化

以口内注入糖精或蔗糖溶液为条件刺激,腹腔内注射L iC l为非条件刺激,在大鼠形成条件性味觉厌恶后进行分化训练,观察味质和嗜好性对臂旁核各亚核c-fos表达的影响及其交互作用。结果表明:味质和嗜好性对背侧外侧亚核(d ls)和腹侧外侧亚核(vls)的c-fos表达无影响;在内侧外侧亚核(ils)和外部内侧亚核(em s),蔗糖诱导的c-fos表达高于糖精,但在外部外侧亚核(els),糖精诱导的表达高于蔗糖;嗜好性刺激引起ils、中央外侧亚核(c ls)和cm s内c-fos高表达,厌恶性刺激引起em s和els内的高表达。在ils和cm s嗜好性与味质的影响各自独立,在els和em s内嗜好性与味质的影响存在交互作用。提示PBN内存在味质辨别和报酬评价的代表区,两种代表区有交迭,em s和els对味质信息和报酬信息的整合有重要作用。

佛手柑内酯对大鼠成骨细胞增殖与分化的影响

为研究佛手柑内酯对大鼠成骨细胞增殖、分化的影响。原代培养新生大鼠颅骨细胞,利用MTT法、微量酶标法、酶联免疫吸附法(ELISA)、q PCR等方法分别测定不同浓度佛手柑内酯对大鼠成骨细胞增殖,碱性磷酸酶(ALP),骨钙素(BGP),Ⅰ型胶原mRNA(CollagenⅠmRNA)表达的影响。结果显示,与对照组相比,佛手柑内酯作用于细胞24、48、72 h均对成骨细胞的增殖有促进作用(P<0.05);作用48、72 h均能促进ALP、BGP、CollagenⅠmRNA表达(P<0.05)。表明佛手柑内酯可促进大鼠成骨细胞的增殖和分化,为防治骨质疏松症的新药研究提供理论依据。

快速老化小鼠海马突触体内NMDA受体的表达变化

目的:观察NMDA受体在SAMP8小鼠海马突触体内的表达变化。方法:首先应用生物化学的方法分离海马突触蛋白,并对其进行鉴定。其次,Western Blot检测NMDA受体的主要亚基NR1、NR2A和NR2B在SAMP8小鼠海马突触体内的表达变化。结果:PSD-95和synaptophysin特异性抗体检测显示突触蛋白的分离是成功的。SAMP8小鼠海马内NR1、NR2A和NR2B在突触的表达均显著低于SAMR1小鼠。进一步分析NR1、NR2A和NR2B蛋白在突触的表达量占总表达量的比值,SAMP8小鼠同样显著低于SAMR1小鼠,而SAMR1和CD-1小鼠间没有显著性差异。结论:SAMP8小鼠海马突触体内NR1、NR2A和NR2B的蛋白表达水平均显著性降低,推测NMDA受体在突触表达水平的降低可能是导致受体功能失调,激发突触功能损伤信号途径的原因之一,进而导致SAMP8小鼠学习记忆功能的下降。

原代培养海马神经元Drebrin和Synaptophysin的表达与动态变化

目的:观察原代海马神经元不同时期树突棘的变化以及树突棘蛋白Drebrin和突触囊泡膜蛋白SYN的表达水平。方法:光镜观察原代培养7、14和20 d的海马神经元的形态改变。应用免疫荧光对Drebrin和SYN进行染色,观察树突棘形态和数量的改变。进一步应用Western Blot检测Drebrin和SYN蛋白的表达变化。结果:培养7 d的海马神经元,未见树突棘结构,SYN斑点状阳性产物较少。随着海马神经元培养时间的加长,突起数量逐渐增加,14 d和20 d的树突棘数量和SYN阳性产物均显著增加。Drebrin和SYN蛋白表达水平也随培养时间的加长而显著增加。结论:原代培养的海马神经元在14 d已有树突棘形成,20 d显示出成熟树突棘的形态和数量。Drebrin和SYN的蛋白表达水平反映了树突棘和突触的形成和功能状态。

β淀粉样蛋白1-42对大鼠海马神经元树突棘的影响

目的:研究β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)对于原代培养的大鼠海马神经元树突棘形态和数量的影响。方法:将原代培养的新生大鼠海马神经元随机分为对照组(control)和Aβ1-42处理组(Aβ1-42),用浓度为500nmol/L的Aβ1-42处理细胞,应用免疫荧光染色检测树突棘上大脑发育调节蛋白(drebrin)的表达,分析Aβ1-42处理不同时间对海马神经元树突棘形态和密度改变的影响。结果:随着Aβ1-42处理时间的增加,drebrin免疫荧光强度明显降低,树突棘形态和密度发生显著变化。对照组树突棘头靠近树突干,多为短粗型或蘑菇型,具有成熟树突棘的典型特征。Aβ1-42处理组丝状伪足样细长树突棘显著增加,异常增长的树突棘数量增多,树突棘密度显著降低。结论:Aβ1-42可明显降低原代培养海马神经元内的drebrin免疫荧光强度和树突棘数量,为进一步探讨Aβ1-42诱导树突棘退行性变的机制提供了直接的细胞生物学依据。

大鼠的条件性味觉厌恶对其他个体食物选择的影响

目的:为了探讨中毒大鼠对其他个体食物选择的影响,本实验用成年雄性SD大鼠25只,分为对照组、条件性味觉厌恶(CTA)组和3个观察组,其中观察1组观察CTA建立和测试全过程,观察2组仅观察CTA建立过程,观察3组仅观察CTA测试过程。以摄取糖精溶液为条件刺激,腹腔注射LiCl为无条件刺激,让CTA组大鼠获得对糖精的CTA,然后观察其他组的糖精嗜好性变化。结果:CTA组、观察1组和观察3组的糖精嗜好比均显著小于对照组;观察2组与对照组之间无显著差异。提示大鼠中毒后的味觉嗜好行为是影响其他个体的食物选择的重要因素。