国产多孔钽对成骨细胞生物相容性及其相关成骨基因表达的影响

目的 探讨国产多孔钽材料对成骨细胞粘附、增殖及成骨基因OPN、OC及FN mRNA表达的影响。 方法 分离培养新生SD大鼠颅盖骨成骨细胞并鉴定。根据国家标准制备多孔钽浸提液，以多孔钽浸提液与成骨细胞作为实验组，以DMEM完全培养基培养成骨细胞作为对照组。MTT法检测多孔钽浸提液对成骨细胞生长及增殖的影响；倒置相差显微镜及扫描电镜观察成骨细胞在多孔钽上粘附、生长及增殖的情况；实时荧光定量PCR技术检测OPN、OC及FN mRNA的表达并进行定量分析。 结果 肉眼及扫描电镜观察多孔钽外观呈深灰色、多孔状三维立体结构，表面及断面均匀分布直径400～600 μm的微孔，内部孔隙相互连通。MTT法检测结果显示，实验组及对照组成骨细胞培养1～8 d，除第3天外，各时间点细胞光密度值差异无统计学意义（P〉0.05）。成骨细胞种植于多孔钽培养结果显示，材料表面和孔隙内细胞叠层生长，分泌的骨基质完全覆盖材料表面。实时荧光定量PCR检测结果显示，实验组成骨基因OPN、OC、FN mRNA的相对表达量分别为1.45、1.79、1.69。 结论 国产多孔钽材料具有良好三维立体空间构型及良好的生物相容性，可刺激成骨细胞的粘附、增殖及成骨基因OPN、OC及FN mRNA的表达。

国产多孔钽材料兔竖脊肌植入组织学及生物学效应

目的：观察国产多孔钽材料的三维孔隙结构以及兔竖脊肌植入后组织形态学特点,对其组织相容性进行评价,为临床骨缺损修复重建提供实验依据。方法：扫描电镜观察国产多孔钽结构;成年新西兰大白兔24只,建立多孔钽兔竖脊肌植入动物模型。将2枚直径1.5 cm。厚0.2 cm圆型多孔钽植入脊柱一侧竖脊肌内（实验组）,对侧植入同等数量及体积的多孔钛（对照组）。于术后2。4。8。12 周处死行硬组织切片观察肌肉周围纤维包膜及新生血管形成,并计算小血管生成数量;扫描电镜观察肌肉组织在两种材料内的生长状态。结果：扫描电镜观察多孔钽具有三维立体多孔结构,孔隙直径在400－600 μm;肌肉及纤维组织早期在多孔钽表面及孔隙内生长;晚期胶原纤维延展,相互连接并充满孔隙。硬组织切片显示：随时间的延长多孔钽-肌肉界面形成薄而致密的血管化包膜。孔隙内充满肌肉。纤维组织及小血管。结论：国产多孔钽材料具有良好的组织相容性,其三维结构可使肌肉组织在表面及孔隙内生长及延伸,有可能成为骨缺损修复材料。

人参皂苷Rg1对帕金森病模型小鼠黑质区FADD和FLIP表达的影响及其意义

目的:探讨人参皂苷Rg1对帕金森病(PD)模型小鼠黑质区凋亡信号蛋白Fas死亡结构域蛋白(FADD)、FADD样白细胞介素1-转化酶样抑制蛋白(FLIP)及Caspase-3表达的影响,阐明FADD和FLIP在PD发病机制中的作用及人参皂苷Rg1对多巴胺(DA)能神经元的保护作用。方法:45只C57BL/6N小鼠随机分为对照组、模型组和人参皂苷Rg1组,每组15只。模型组小鼠腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP),人参皂苷Rg1组小鼠注射MPTP前先注射人参皂苷Rg1,对照组小鼠腹腔注射生理盐水。观察各组小鼠行为学变化;采用免疫组织化学法和免疫蛋白印迹法检测各组小鼠中脑黑质区酪氨酸羟化酶(TH)、FLIP、FADD及Caspase-3的表达。结果:与对照组比较,模型组小鼠出现典型PD症状,黑质区TH阳性细胞数明显减少(P<0.01),FADD、FLIP及Caspase-3阳性细胞数明显增加(P<0.01),胞浆染色深;FADD、FLIP及Caspase-3蛋白表达水平升高(P<0.01)。与模型组比较,人参皂苷Rg1组小鼠PD症状减轻,黑质区TH阳性细胞数明显增多(P<0.01),FADD、FLIP及Caspase-3阳性细胞数明显减少(P<0.01),胞浆染色浅;FADD、FLIP和Caspase-3蛋白表达水平降低(P<0.01)。FADD与Caspase-3阳性细胞数呈正相关关系(r=0.791,P<0.05)。结论:人参皂苷Rg1可通过影响PD模型小鼠黑质区FADD和FLIP的表达对DA能神经元起到一定的保护作用。

小白菊内酯对帕金森病小鼠模型黑质多巴胺能神经元的保护作用

目的:探讨小白菊内酯在帕金森病小鼠模型中抑制核因子NF-κB(nuclear factor kappa B)信号通路对多巴胺(DA)能神经元的保护作用。方法:将C57BL/6N小鼠随机分为模型组、干预组和对照组。通过行为学、免疫组织化学和免疫蛋白印记法观察各组小鼠中脑黑质区酪氨酸羟化酶(TH)、核因子NF-κB、环氧合酶-2(COX-2)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的表达变化情况。结果:与对照组相比,模型组小鼠出现典型PD症状,TH阳性神经元明显丢失、蛋白水平下降,NF-κB、COX-2和caspase-3阳性细胞大量表达,蛋白水平显著升高(P<0.01)。抑制剂组小鼠上述变化明显减轻(P<0.01)。结论:在MPTP所致PD模型小鼠中,小白菊内酯通过抑制核因子NF-κB信号通路减少凋亡蛋白caspase-3表达,从而发挥神经保护作用。

多孔钽的生物学特性与关节重建

髋、膝关节置换重建中应用传统的多孔材料涂层关节假体已取得了较好的临床效果。这些多孔移植材料在关节重建术中被用来实现非骨水泥的生物固定。如钴铬合金和钛等离子涂层的应用代表着大多数常规应用多孔涂层材料来实现骨长入。尽管这些常规多孔涂层材料已经显示具有较好的临床效果，但是它们具有一些与生俱来的弊端，例如与骨相关的低孔隙率（30%～50%）、低摩擦特性和和较高的弹性模量。

均衡凝固理论在大型飞轮铸件上的应用

69-01飞轮材质HT250,铸件质量3 100 kg,轮缘外径2 000 mm,属大平面铸件。经常出现缩松、缩孔,尤其表面夹渣问题严重。运用均衡凝固技术,采用径向引入、集渣包与挡渣板配合使用、内浇道对面安置溢流冒口,解决铸件带脏问题;通过浇冒口联合补缩不但消除了缩松、缩孔,工艺出品率可达84%。

帕金森病发病机制的研究

帕金森病（Parkinson’s disease，PD）也称震颤麻痹，是中老年人群中常见的一种神经系统退行性疾病。表现为中脑黑质致密部多巴胺能神经元选择性缺失，残存的神经元内出现以α-突触共核蛋白（α-synuclein）主要成分的嗜酸性包涵体-路易小体（Lewy body，LD），LD 是本病重要的病理特点［1～3］。该病起病缓慢，呈渐进性发展，主要临床表现为以静止性震颤、肌强直、运动减少和姿势步态异常等。患者晚期生活无法自理，生活质量很差，最终死于肺部感染等并发症。PD 发病可能与遗传因素、环境因素、线粒体功能障碍、免疫炎症反应等有关。

MG63细胞与国产多孔钽材料共培养后成骨相关因子的表达研究

目的观察MG63细胞与国产多孔钽材料共培养后成骨相关因子的表达,探讨该材料作为骨组织工程支架的可行性。方法实验分为3组,A组为多孔钽材料与MG63细胞共培养组,B组为多孔钽浸提液与MG63细胞共培养组,C组为单纯MG63细胞培养组。A组于培养后3、5、7 d行扫描电镜观察细胞在材料上的黏附情况;培养5 d分别采用免疫组织化学染色和Western blot检测各组成骨相关因子Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor2,Runx-2)、骨钙素(osteocalcin,OC)和纤维连接蛋白(fi bronectin,FN)的表达。结果培养3 d,A组细胞在材料表面及孔隙内黏附生长,细胞排列较稀疏,突起少;5 d,相邻细胞互相连接成片状,覆盖材料表面及孔隙内壁;7 d,细胞分泌大量细胞外基质,覆盖大部分材料表面。各组细胞均有不同程度Runx-2、OC和FN表达,其中A组细胞质深染,表达较其余2组明显。免疫组织化学染色和Western blot定量分析示,A组Runx-2、OC表达量显著高于B、C组(P<0.05);B、C组间差异无统计学意义(P>0.05)。3组间FN表达量比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论国产多孔钽材料有利于MG63细胞的早期黏附、生长,并可能影响Runx-2、OC的表达,可用作骨组织工程支架材料。

国产多孔钽复合MG63细胞培养Col-1、OC和OPN蛋白表达及意义

[目的]观察国产多孔钽材料复合MG63细胞培养后细胞增殖粘附情况,并检测成骨相关因子Col-1、OC和OPN表达情况,研究国产多孔钽材料的生物相容性,为国产多孔钽的临床应用提供理论依据。[方法]将MG63细胞与国产多孔钽材料复合培养,通过倒置相差显微镜、扫描电镜观察检测细胞粘附情况,MTT法检测细胞增殖情况,免疫细胞化学和免疫蛋白印迹法,检测Ⅰ型胶原(collagen typeⅠ,Col-1)、骨钙素(osteocalcin,OC)和骨桥蛋白(osteopontin,OPN)表达变化情况。[结果]MG63细胞与多孔钽材料复合培养后,细胞增殖情况良好,与对照组比较无差异(P>0.05);细胞在材料表面及孔隙内生长粘附并长入孔隙中,并逐渐完全覆盖材料;免疫细胞化学与免疫蛋白印迹结果提示复合培养组出现Col-1、OC表达增强(P<0.05),OPN的表达无明显差异(P>0.05)。[结论]国产多孔钽材料有利于MG63细胞的黏附、生长,具备良好的生物相容性,并可能影响Col-1、OC的表达。