仿刺参共附生放线菌Brevibacterium sp.中的环二肽成分的分离和鉴定

目的对仿刺参共附生放线菌Brevibacterium sp.的次生代谢产物进行研究。方法运用硅胶柱色谱、Seph-adex LH-20凝胶柱色谱、高效液相色谱(HPLC)等现代色谱技术对放线菌的乙酸乙酯提取物进行分离纯化,在核磁共振(NMR)、质谱(MS)等现代波谱技术及与文献比对的基础上对其结构进行鉴定。结果共分离得到7个环二肽类化合物,分别鉴定为:环-(L-脯氨酸-L-苯丙氨酸)(1)、环-(L-脯氨酸-L-甲硫氨酸)(2)、环-(L-脯氨酸-L-酪氨酸)(3)、环-(L-脯氨酸-L-缬氨酸)(4)、环-(L-脯氨酸-L-脯氨酸)(5)、环(L-缬氨酸-甘氨酸)(6)、环-(L-脯氨酸-L-亮氨酸)(7)。结论本研究是对仿刺参共附生微生物次生代谢产物研究的首次报道,这7个化合物均为首次从放线菌Brevi-bacterium sp.中分离得到。

中药制剂补肺活血胶囊临床安慰剂的制备与评价

目的:建立中药制剂补肺活血胶囊安慰剂的制备方法,并评价安慰剂与真药的相似性,为中药制剂安慰剂的制备提供参考。方法:通过筛选安慰剂的基质、香精、色素,探索并获得补肺活血胶囊安慰剂制备的处方和工艺,然后经过生产验证,最终评价安慰剂与真药的相似性。结果:通过二次制粒后填充胶囊制得补肺活血胶囊模拟剂,安慰剂与真药的相似性大于90%,不易被研究者和受试者识别,能够最大限度地防止双盲、安慰剂对照的临床试验中出现偏倚和破盲,从而保证临床试验的质量。结论:制得的补肺活血安慰剂具有实用性,可以作为临床研究的对照药物。

UPLC-Q-TOF/MS法分析加参片提取物入血成分

目的:采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)法分析加参片提取物入血成分。方法:大鼠灌胃加参片提取物后眼静脉丛采集血液,分析采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm);流动相0.1%甲酸水-甲醇;梯度洗脱;流速0.3 mL·min-1。MSE扫描正负离子模式检测。结果:检测到14种入血原型成分,主要来源于丹参、黄芪、香加皮和三七。鉴定出的5种代谢产物分别为咖啡酸的硫酸酯化产物、毛蕊异黄酮葡萄糖苷的葡醛酸结合产物、毛蕊异黄酮的硫酸酯化产物以及隐丹参酮开环断裂而产生的代谢产物。结论:该方法稳定可靠,初步阐释了加参片的药效物质基础,为研究加参片治疗慢性心力衰竭在体内的药效物质提供一定依据。

补肺活血胶囊UPLC指纹图谱建立及质量评价

目的:建立补肺活血胶囊超高效液相色谱法(UPLC)指纹图谱。方法:采用ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)为流动相梯度洗脱,流速为0.4 mL·min^(-1),检测波长为246 nm,建立补肺活血胶囊指纹图谱;采用UPLC串联四极杆飞行时间质谱法结合对照品对所建立的指纹图谱共有峰进行定性分析;采用主成分分析(PCA)进一步对影响补肺活血胶囊质量均一性的差异性成分进行筛选。结果:依据11批样品建立的指纹图谱相似度评价均大于0.969;指纹图谱中共标定20个共有峰,对其中18个共有峰进行了化学成分鉴定。PCA显示,影响补肺活血胶囊批间质量均一性的主要化学组分为补骨脂苷和异补骨脂苷。结论:所建立的UPLC指纹图谱方法专属性强,可用于补肺活血胶囊的质量评价。

补肺活血胶囊大鼠体内代谢产物鉴定及代谢途径分析

目的 研究补肺活血胶囊(Bufei Huoxue Capsules,BHC)在大鼠血浆、胆汁、尿液、粪便中的原型成分及其代谢产物,归纳总结不同类型化合物的体内代谢规律。方法 大鼠igBHC后,收集血浆、胆汁、尿液和粪便样品并进行预处理,采用超高效液相色谱-飞行时间质谱(ultra-high performance liquid chromatography-time-of-flight mass spectrometry,UPLC-Q-TOF-MS)及质量亏损过滤技术,分别在正、负离子模式下对原型成分及代谢产物进行分析鉴定。结果 共检测到没食子酸、芍药苷、毛蕊异黄酮、新补骨脂异黄酮、(S)-异补骨脂二氢黄酮、补骨脂苷等原型成分及代谢产物67个,其中酚酸类成分10个、单萜类成分7个、黄酮类成分35个、香豆素类成分12个、皂苷类成分3个,主要代谢途径包括氧化、还原、甲基化、葡糖醛酸结合、硫酸结合等。结论 初步阐明了BHC大鼠体内的代谢产物及其代谢转化特征,为基于体内过程揭示其药效物质基础奠定了基础,为其临床安全用药提供了科学依据。

丹参水溶性酚酸类成分化学结构和药理活性研究进展

丹参是我国传统中药之一,临床上常用来治疗冠心病、脑血栓、肝炎及肝硬化等。丹参的有效成分主要是脂溶性的丹参酮类和水溶性的酚酸类。水溶性酚酸类化合物主要包括丹参素、原儿茶醛和各种丹酚酸,主要有抗氧化、抗肝纤维化、抗心血管疾病、抗神经性疾病等。本文对丹参水溶性丹酚酸类化合物的种类及药理活性进行综述,为丹酚酸类化合物的进一步研究开发提供参考依据。

基于UPLC-Q-TOF-MS的加参片提取物化学成分分析

目的通过建立超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-Q-TOF-MS)分析方法,对加参片提取物化学成分进行定性分析,确定加参片提取物的主要化学成分。方法采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以0.1%甲酸水(A)-甲醇(B)为流动相梯度洗脱;体积流量0.3 m L/min,采用电喷雾离子化源(ESI),MSE扫描正负离子模式检测。结果通过与对照品比对、数据库匹配、质谱数据分析及参考相关文献,从加参片提取物中共鉴定出68个化学成分,并发现了4个未知化合物,其中包括13个酚酸类成分、6个丹参酮类成分、11个黄酮及其苷类成分、4个强心苷类成分、15个三萜皂苷类成分、7个C21甾体类成分、12个其他类成分及4个未知成分。结论对加参片提取物化学成分进行了较为全面的分析,为加参片的物质基础及质量控制研究打下了良好的基础。

UPLC结合化学计量学方法的胡黄连指纹图谱研究

目的建立胡黄连UPLC指纹图谱,为科学评价及有效控制其质量提供可靠方法。方法采用Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以0.5%乙酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相梯度洗脱;体积流量0.3 m L/min,柱温为32℃,检测波长为295 nm,对25批以胡黄连名称出售的药材进行检测。通过相似度评价,结合聚类分析(HCA)和主成分分析(PCA),对不同批次胡黄连药材进行质量评价。ESI-Q-TOF/MS正、负2种离子模式扫描对其化学成分定性分析。结果 22批胡黄连药材与3批混淆品的指纹图谱明显不同。通过建立的22批胡黄连药材UPLC指纹图谱确证了16个共有峰,并对12个共有峰进行了明确化学成分指认;胡黄连药材的相似度为0.939~0.998;通过聚类分析可大致聚成3类;PCA结果支持了HCA结果;并结合偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)方法发现区分胡黄连样品的4个标志性化合物,指认出1、9、12号峰分别为藏黄连酚苷C、胡黄连苷I和胡黄连苷III。结论胡黄连的UPLC指纹图谱的构建和化学模式的识别为药材质量控制提供更全面的参考。

UHPLC-MS/MS测定补肺活血胶囊中8种有效成分在大鼠体内血药浓度及药代动力学研究

建立用于血浆中补肺活血胶囊活性成分含量测定的超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)方法,并应用于药代动力学研究。SD大鼠灌胃补肺活血胶囊混悬液后,于不同时间点经眼眶静脉丛取血,血浆样品经蛋白沉淀,采用ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm)分离,流动相为乙腈(A)-0.1%甲酸水(B),梯度洗脱;在多反应监测模式(MRM)下正、负离子同时测定;采用DAS 3.2.8软件拟合计算药动学参数。结果显示,大鼠灌胃补肺活血胶囊后,血浆中可测得补骨脂苷、异补骨脂苷、毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、补骨脂素、异补骨脂素、3-羟基-9,10-二甲氧基紫檀烷、新补骨脂异黄酮,其药动学参数药时曲线下面积(AUC_(0-t))分别为(3357±1348)、(3555±1696)、(3.03±0.88)、(2.21±0.33)、(1787±522)、(2295±539)、(5.69±1.41)、(3.40±0.75)μg·L^(-1)·h;达峰时间(T_(max))分别为(1.56±0.62)、(1.40±0.70)、(0.21±0.05)、(0.25±0.12)、(0.26±0.11)、(0.34±0.29)、(0.74±0.59)、0.25 h。该检测方法专属性强、重复性好,适用于补肺活血胶囊中补骨脂苷、异补骨脂苷、毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、补骨脂素、异补骨脂素、3-羟基-9,10-二甲氧基紫檀烷、新补骨脂异黄酮在大鼠体内的药动学研究。

UHPLC法分析补肺活血胶囊中12种指标成分

目的建立超高效液相色谱法(UHPLC)同时测定补肺活血胶囊(Bufei Huoxue Capsules,BHC)中12种指标成分没食子酸、氧化芍药苷、芍药内酯苷、补骨脂苷、芍药苷、异补骨脂苷、毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、补骨脂素、异补骨脂素、苯甲酰芍药苷的含量。方法采用Acquity UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm);流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱;体积流量0.4 mL/min,柱温35℃,进样量4μL,检测波长246 nm。结果BHC中12种指标成分在18min内色谱峰分离良好,没食子酸、氧化芍药苷、芍药内酯苷、补骨脂苷、芍药苷、异补骨脂苷、毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、补骨脂素、异补骨脂素和苯甲酰芍药苷分别在0.38~195.20(r=0.9999)、0.17~21.44(r=0.9996)、0.85~433.80(r=0.9999)、0.68~345.60(r=0.9999)、1.11~566.60(r=0.9998)、0.47~241.40(r=0.9999)、0.08~39.36(r=0.9998)、0.05~26.16(r=0.9999)、0.03~16.42(r=0.9999)、0.25~129.10(r=0.9998)、0.26~133.10(r=0.9997)、0.09~47.28μg/mL(r=0.9999)线性关系良好;精密度、稳定性、重复性、加样回收率均符合分析要求。11批补肺活血胶囊中没食子酸、氧化芍药苷、芍药内酯苷、补骨脂苷、芍药苷、异补骨脂苷、毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、补骨脂素、异补骨脂素和苯甲酰芍药苷平均质量分数分别为2.6242、0.2224、16.4099、7.4595、18.9742、7.8875、0.5057、0.1099、0.1707、1.3647、1.1700、0.2036 mg/g。结论所建立的方法分析速度快、准确度高、重复性好,为BHC质量标准提升提供了方法支撑。