弓形虫TR与ROP18双基因缺失及对NF-κB-IL-12-ROS信号通路相关因子的影响

为探究弓形虫的TR与ROP18基因对NF-κB-IL-12-ROS信号通路的影响和抗宿主ROS损伤中是否具有协同作用,本研究利用CRISPR/Cas9技术构建了TR与ROP18双基因敲除株(TR-ROP18-KO)。通过检测TR/ROP18单、双基因缺失株氧化应激水平以及对小鼠巨噬细胞活性氧(ROS)水平影响的研究发现,TR-ROP18-KO株引发的氧化应激水平极显著高于RH株(P<0.01),但与TR单基因缺失株无显著差异(P>0.05);利用RT-PCR检测TR/ROP18单、双基因缺失株感染小鼠巨噬细胞产生的NF-κB、IL-12 mRNA水平和ELISA检测小鼠血清中IL-12的水平发现,TR-ROP18-KO株感染组虽然极显著高于RH株感染组(P<0.01),但TR-ROP18-KO株感染组却未显著高于TR-KO株感染组(P>0.05),表明弓形虫TR与ROP18基因在抗宿主ROS损伤中不存在协同作用。本研究利用TR与ROP18双基因缺失株能够明确解析这两个基因在抗宿主ROS损伤中有无协同作用,为深入研究这两个基因在I型弓形虫免疫逃避途径中的协同作用奠定基础,这也为后续弓形虫双基因功能协同作用的研究提供了一个新思路。

弓形虫ROP5与ROP18的双基因缺失株构建及表型鉴定

ROP5与ROP18都是弓形虫重要的毒力因子,本研究旨在构建弓形虫RH株ROP5单基因缺失株,在此基础上构建ROP5与ROP18的双基因缺失株,并研究ROP5基因、ROP18基因的表型功能,为探究两个基因的协同作用奠定基础。首先构建质粒pSAG1:CAS9::TgU6:sgROP5、pROP5::DHFR-D质粒,并将质粒电转至弓形虫RH株速殖子,经息疟定筛选及PCR鉴定;再将质粒pSAG1:CAS9::TgU6:sgROP18、pROP18::CAT-D电转至鉴定正确的ROP5单基因缺失株(ROP5-KO)速殖子中,经氯霉素筛选并进行PCR鉴定。结果显示:本试验成功获得ROP5-KO株及ROP5与ROP18的双基因缺失株(ROP5/ROP18-KO);两个基因同时缺失可明显降低弓形虫的入侵能力及生长速度;此外,双基因缺失后,弓形虫对小鼠的毒力明显减弱。本研究表明,同时敲除ROP5基因与ROP18基因后,弓形虫毒力显著降低,为进一步探究ROP5与ROP18的协同作用奠定了基础。

社区护理干预对糖尿病患者遵医行为的影响

①目的调查社区糖尿病(DM)患者的遵医行为,对其进行健康教育和行为干预。②方法随机抽取社区卫生服务站门诊诊断为DM的患者128例,分为两组,即护理干预组和对照组。对护理干预组患者及家属进行遵医行为相关的健康教育;对照组不加任何干预。③结果两组患者进行比较,护理干预组患者的血糖得到了较好的控制,无并发症发生,与对照组比较差异有显著性(P<0.01)。④结论社区护理干预可以提高DM患者的生活质量和遵医行为。

日光温室中4个草莓品种光合特性、产量及品质比较

以幸香、桃熏、鬼怒甘、法兰地等4个草莓品种为试验材料,将其种植在宁夏地区日光温室内,比较其生长特性、光合特性、产量及品质等指标。结果表明,幸香草莓光合性能优于其他品种,品质相对最好,维生素C、可溶性糖、可溶性固性物、可滴定酸含量分别为600. 9 mg/kg、12. 89%、10. 3%、0. 468%,糖酸比为22. 11,硬度为0. 40 kg/cm^2,产量相对较高,为41 925. 36 kg/hm^2,畸形果率相对较低,为14%,适合宁夏地区种植。

餐后血糖监测对糖尿病患者社区干预的意义

①目的探讨餐后血糖监测对糖尿病患者社区干预的意义。②方法将社区管理在册的450例2型糖尿病患者中餐后血糖为7.1～11.1mmol/L和>11.1mmol/L中的62例为干预组,开展健康行为指导,纠正不良生活习惯,提供适宜个体的饮食、运动处方,进行血压(SBP、DBP)、体质指数(BMI)、餐后2小时血糖(2HPG)、糖化血红蛋白(GHbA1C)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)及血流动力学指标检测跟踪1年后进行对比,并对检测结果进行分析,③结果干预前后血压的变化与血糖变化之间没有必然关系,血压没有受到餐后血糖波动影响;干预前后体质指数(BMI)变化不同;干预前后2HPG、GHbA1C、TG、TC及血流变学指数较前好转(P<0.05)。④结论糖尿病患者必须重视对餐后血糖监测。长期餐后高血糖可以更敏感反映糖代谢紊乱,更加重心血管危险因素,并且加重了胰岛β功能障碍,逐渐发展为空腹及餐后血糖都增高。

唐山市工人医院社区卫生服务站成立残疾人康复基地

为了给社区残疾人提供更好的服务，加强社区康复指导功能，2004年唐山市团结楼社区卫生服务站与唐山市残联合作正式挂牌成立残疾人康复基地。

弓形虫RH株CDPK1蛋白表达及鉴定

为了研究刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)CDPK1的生物学功能,并深入了解其在免疫保护中所发挥的作用,本试验以弓形虫RH株cDNA为模板,表达CDPK1基因并鉴定其生物学功能。本研究将截短的CDPK1基因片段克隆到原核表达载体pGEX-6p-1中后,转化大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE电泳分析;利用GST标签亲和层析法纯化重组蛋白,以纯化后蛋白为抗原免疫新西兰兔,制备抗CDPK1多克隆抗体;通过蛋白质印迹技术(Western blot)及间接免疫荧光试验(IFA)鉴定重组蛋白的免疫活性。结果显示:从弓形虫RH株cDNA中扩增出489 bp截短的CDPK1基因片段,编码162个氨基酸,与GenBank中已知基因序列及氨基酸序列的同源性为100%;获得的重组蛋白CDPK1分子量约为44 kDa,且在37℃、180 rpm和IPTG浓度0.2 mmol/L条件下,重组蛋白可获得高效可溶性表达;Western blot分析发现,重组蛋白能被GST标签抗体识别,不能被感染弓形虫的犬阳性血清识别,说明此重组蛋白不具有反应原性;IFA结果显示,重组蛋白的抗血清能够识别刚地弓形虫的天然蛋白CDPK1,说明重组蛋白CDPK1具有良好的免疫原性,且证实其主要位于刚地弓形虫虫体的细胞质和细胞核。本研究成功获得重组蛋白CDPK1及CDPK1多克隆抗体,为CDPK1特性与功能的研究奠定基础。

当归芍药散穴位敷贴对湿热瘀结型SPID患者血液流变学、炎性因子的影响

目的评价当归芍药散穴位敷贴对湿热瘀结型盆腔炎性疾病后遗症(SPID)患者血液流变学、炎性因子的影响。方法抽选医院收治的94例湿热瘀结型SPID患者进行研究,按照区组随机原则分为两组,对照组44例:经头孢丙烯分散片治疗,观察组50例:经当归芍药散穴位敷贴治疗,对比不同用药方法治疗效果。结果观察组治疗后的血液流变学指标以及炎性因子指标水平改善优于对照组(P<0.05)。结论湿热瘀结型SPID患者采用当归芍药散穴位敷贴治疗,作用于患者血液流变学以及炎性因子水平效果显著。

转铁蛋白受体在食道鳞癌细胞的表达

转铁蛋白受体是细胞膜上的一种糖蛋白,其主要生理功能是介导转铁蛋白转运铁进入细胞。近年来,文献报道:转铁蛋白受体(TFR)与细胞增殖程度密切相关。恶性肿瘤细胞增殖活性高,对铁需要量多,TFR表达就增加。有作者进行肝细胞癌TFR免疫组化研究,提示TFR可作为HCC的一种肿瘤抗原标记物:宫颈鳞癌细胞TFR则具有对癌细胞早期诊断的价值。关于食道鳞癌细胞TFR的表达研究,国内外尚未见报道,我们自1994年2月至1996年8月对食道鳞癌93例,不典型增生86例,对照组45例正常人食道粘膜组织进行TFR免疫组化研究,现报告如下。