长非编码RNA lnc-ALVE1-AS1抑制ALV-J在鸡巨噬细胞中增殖

研究表明,源自内源性反转录病毒的长非编码RNA可能是巨噬细胞抗病毒免疫反应的重要组成部分。鸡内源性反转录病毒衍生的长非编码RNA lnc-ALVE1-AS1与宿主遗传抗性有关,能够激活非免疫细胞抗病毒天然免疫反应。为进一步探讨lnc-ALVE1-AS1在鸡巨噬细胞中的抗病毒作用及其机制,本研究通过荧光定量PCR发现lnc-ALVE1-AS1在ALV-J感染鸡巨噬细胞系HD11后24 h显著下调。进一步通过lnc-ALVE1-AS1过表达实验证实,lnc-ALVE1-AS1可以显著抑制ALV-J在HD11细胞中增殖。机制上,lnc-ALVE1-AS1显著上调HD11细胞dsRNA识别受体(TLR3)、Ⅰ型干扰素(IFN-α和IFN-β)和其他抗病毒天然免疫基因(IRF7、MX1、OASL和IFITM3)表达。然而,干扰TLR3或者抑制TLR3信号后lnc-ALVE1-AS1诱导Ⅰ型干扰素(IFN-α和IFN-β)的能力显著减弱。共聚焦定位分析显示在HD11细胞中lnc-ALVE1-AS1可以与TLR3蛋白直接结合。这说明激活TLR3信号可能是lnc-ALVE1-AS1抑制ALV-J在巨噬细胞中增殖的一个重要机制。本研究揭示了lnc-ALVE1-AS1在巨噬细胞中抗病毒功能及其作用机制,为抗病育种研究提供了新的遗传基础。

雪山草鸡种母鸡育雏期能量和蛋白质适宜需要量的研究

【目的】研究饲粮不同能量和蛋白质水平对雪山草鸡种母鸡育雏期生长性能、体尺性状、血清生化指标和屠宰性能的影响,明确其育雏期适宜的饲粮能量和蛋白质水平。【方法】选取体重接近、健康状态良好的1日龄雪山草鸡种母鸡2250只,按3×3两因素试验设计随机分为9组,3个能量水平(11.7、11.9、12.1 MJ/kg)和3个蛋白质水平(18.0%、19.0%、20.0%),每组10个重复,每个重复25只鸡,试验期为42 d。试验结束时统计生长性能指标;每重复选取2只鸡采血,1只鸡屠宰,测定血清生化指标和屠宰性能。【结果】①饲粮能量水平对雏鸡平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)、料重比(F/G)和终末体重均有显著影响(P<0.05),随着能量水平的升高,ADFI和F/G呈下降趋势,ADG和终末体重呈上升趋势,均匀度无显著变化(P>0.05);饲粮蛋白质水平对ADFI有显著影响(P<0.05),ADFI随着蛋白质水平的升高而降低,而其他生长性能指标均无显著变化(P>0.05);饲粮能量和蛋白质水平对雏鸡的生长性能指标均无显著交互作用(P>0.05)。②饲粮蛋白质水平除对雏鸡龙骨长、血清甘油三酯水平和腹脂率有显著影响外(P<0.05),对其余各体尺指标、血清生化指标和屠宰性能指标均无显著影响(P>0.05);饲粮能量水平对雏鸡以上指标均无显著影响(P>0.05),且饲粮能量和蛋白质水平对这些指标也无显著交互作用(P>0.05)。【结论】综合考虑生长性能、体尺性状、血清生化指标和屠宰性能,推荐雪山草鸡种母鸡育雏期饲粮能量适宜水平为12.1 MJ/kg,蛋白质适宜水平为20.0%。

长非编码RNA lnc-ALVE1-AS1与禽白血病病毒抗性和易感品系鸡相关性分析

内源性反转录病毒是长非编码RNA的重要来源,在抗病毒先天性免疫中发挥重要作用。鸡内源性反转录病毒衍生的长非编码RNA lnc-ALVE1-AS1能够激活细胞免疫功能并抑制禽白血病病毒增殖。为进一步探讨lnc-ALVE1-AS1在ALV抗性和易感品系鸡中的表达规律及其与禽白血病病毒抗性的相关性,本研究通过荧光定量PCR发现,lnc-ALVE1-AS1在ALV抗性(G1)品系鸡免疫器官(胸腺、脾脏和法氏囊)和CEF细胞中的表达水平显著高于ALV易感(G3)品系鸡。病毒感染实验表明lnc-ALVE1-AS1在ALVJ感染CEF(G1和G3来源)细胞24h和96h后均显著下调;但是,lnc-ALVE1-AS1在G3来源CEF细胞中的表达水平下降更为明显,且ALVJ病毒复制水平显著高于G1鸡来源的CEF细胞。进一步通过lnc-ALVE1-AS1过表达实验证实,lnc-ALVE1-AS1不仅可以显著上调G3来源CEF细胞dsRNA识别受体(TLR3和IFIH1)和抗病毒天然免疫基因(IFI27-L2、IFIT5、IFITM3、IFN-β、ISG12-2和RASD2)表达,还显著抑制ALVJ复制。本研究揭示了lnc-ALVE1-AS1在禽白血病病毒抗性和易感品系鸡细胞和免疫组织器官中的表达规律和抗病毒功能,为抗病育种研究提供了新的遗传基础。

miR-222-3p在鹅肥肝形成中的作用及靶基因验证

为了检测miR-222-3p在填饲鹅不同组织中的表达情况,并对其靶基因进行预测和验证,探讨miR-222-3p在鹅肥肝形成中的功能。运用实时荧光定量PCR技术检测miR-222-3p在填饲鹅肝脏、胸肌和腹脂中的表达量;采用生物信息学方法对鹅miR-222-3p的靶基因进行预测,荧光定量PCR技术检测预测靶基因在肝脏中的表达量,并利用双荧光素酶基因报告系统验证其靶向关系。结果显示:相比对照组,miR-222-3p在填饲鹅肝脏和腹脂中的表达量均显著升高;生物信息学预测结果显示MARF1和B4GALNT3基因在3’UTR区域存在miR-222-3p的潜在结合位点,且这两个基因在鹅肥肝中均显著下调,而双荧光素酶基因报告系统显示只有MARF1基因与鹅miR-222-3p存在靶向关系。结果表明,miR-222-3p在鹅肥肝中表达量显著上调,且可能通过其靶基因MARF1对鹅肥肝的形成发挥调控作用。

MC5R介导鹅肌肉对营养/能量水平变化的响应

为探究黑皮质素受体MC5R在鹅营养/能量代谢中的作用及其机制,着重检测禁食/再饲喂模型中鹅胸肌和营养/能量代谢相关因子处理后鹅原代胸肌细胞中MC5R的mRNA表达水平,通过过表达MC5R后的转录组测序分析筛查MC5R调控的基因与通路,以及检测活体和细胞模型中MC5R下游基因的mRNA表达量。结果表明:肌肉中MC5R的表达为禁食所诱导,而这种诱导可被再饲喂所抑制;鹅原代肌细胞中MC5R的表达可被葡萄糖和油酸所诱导,但被甲状腺素所抑制;MC5R过表达影响的差异表达基因主要富集于糖脂代谢和炎症相关的通路;在鹅活体和细胞模型中筛选到的PLA2G4A、PTGS2、TRAF2、IL6和PLPP4基因可能介导MC5R的生物学作用。综上,MC5R可能通过糖脂代谢和炎症相关通路介导鹅肌肉中营养/能量水平变化所引起的生物学效应。

线粒体和鹅肥肝形成的关系

鹅脂肪肝(俗称肥肝)作为高档水禽产品,富含不饱和脂肪酸,由营养过剩所引起。鹅肥肝是一种生理性脂肪肝,与人和其他哺乳动物中出现的病理性非酒精性脂肪肝病(NAFLD)不同,即使在严重的肝脂肪变性情况下,也不出现炎症、纤维化等病理症状,提示鹅肥肝存在某种独特的形成与保护机制。由于线粒体参与细胞的能量代谢和氧化应激,因此可能在鹅肥肝形成中扮演重要角色。本文着重围绕鹅肥肝的特点,对鹅肥肝的形成机理、线粒体的研究进展以及线粒体与鹅肥肝形成的关系进行综述,并展开适当讨论,为鹅肥肝的深入研究以及其他动物NAFLD的防治提供参考。

泰和乌鸡出雏后黑色素的分布与沉积

对1～28周龄的泰和乌鸡进行外表和解剖观察。就个体而言 ,除腿部皮肤略黑一些外 ,全身皮肤的黑度非常接近 ,胸肌的黑度明显浅于腿肌 ,黑度随周龄增加而变浅 ;气管、肺、嗉囊、腺胃外皮、肌胃外皮、睾丸、卵巢在2周龄时可见黑色素沉积 ,随周龄增加而逐渐加深 ;胸皮、腿皮、胸肌、腿肌和腿骨(带骨膜)中黑色素沉积率及左侧髋关节处皮肤黑度之间的表型相关均呈显著的正强相关 ,它们均能较好地代表乌鸡体内黑色素的沉积速度 ;

新狼山鸡和固始鸡部分抗病力相关遗传因子的初步研究

测定了新狼山鸡和固始鸡的细胞吞噬能力和T细胞介导免疫反应能力，获得以下结果：细胞吞噬能力和T细胞介导免疫反应能力在这两个品种之间以及性别之间均存在显著差异，而且细胞吞噬能力与T细胞介导免疫反应能力之间几乎不存在表型相关。

隆昌鹅和以其为母本的杂交后代的产肉及产肝性能

产肉性能作为鹅的一个主要生产性能,一直为广大饲养者所关心,产肉性能的优劣直接关系到饲养者的经济收益。产肝性能作为鹅的另一生产性能,随着鹅肥肝生产在我国的兴起,科研者在这方面的兴趣正日渐浓厚。我国有着丰富的鹅品种资源。

影响家禽抗病力的因素

影响家禽抗病力的因素■耿拓宇杨恒东（江苏省家禽科学研究所２２５００３）疾病和抗病现象是机体防御系统与致病因子在一定环境下相互作用的两种结果。机体能否抵抗疾病取决于防御作用和致病作用的相对大小。环境因素和遗传因素均能影响机体的防御作用。接种疫苗、施用药...

朗德鹅和朗德鹅×太湖鹅的产肝性能研究

朗德鹅和朗德鹅×太湖鹅(简称朗太鹅)经过21天的填肥,体重分别达到6.74千克、5.22千克,是填肥开始时的1.54倍、1.55倍,肥肝重分别达到0.600千克、0.248千克,腹脂重分别达到0.287千克,0.319千克,体重和肥肝重在这两种鹅间差异显著,而腹脂重不显著。填肥结束时,期德鹅和朗太鹅的血浆TG(甘油三酯 TCH(总胆固醇)PL(磷脂)VLDL(极低密度脂蛋白)浓度均显著高于填肥开始时的浓度。填肥开始时血浆AKP(碱性磷酸酶)活性、血浆TCH、PL、VLDL浓度和填肥结束时血浆AKP、LDH(乳酸脱氩酶)活性、血浆TG、TCH、PL、VLDL浓度在两种鹅间差异显著,血液生化指标在填肥开始和结束间的显著差异在一定程度上说明了填肥使机体内的脂肪代谢明显增强,而血液生化指标在两种鹅间的显著差异则从生化水平上体现了各自的遗传特点,至于这种遗传特点是否与产肝性能的优劣有内在联系,还有待进一步研究。

优质鸡内涵与选育

关于优质鸡的讨论专家们各抒己见,优质鸡在我国家禽业中也占有重要的位置。本文作者从一名专家的角度探讨了影响优质鸡的质量和上市价格的因素,重点突出了包装性状、肉质测定以及饲养管理等问题。

微卫星技术分析地方鸡种群体的遗传结构

利用微卫星技术和 1 4对引物MCW1 5 0、MCW1 3 4、MCW1 45、MCW1 0 4、ADL2 1 0、MCW88、ADL2 3 7、ADL2 0 1、ADL2 89、MCW5、MCW2 1 7、MCW2 9、ADL1 76、MCW4对 7个地方鸡种和 1个引进鸡种的群体遗传结构特征进行了分析。根据池DNA所获得的品种间相似指数计算遗传距离。结果表明 :AA鸡与其它品种鸡遗传距离最远 ,白耳鸡次之 ,其余品种间较近。这些鸡种的遗传结构特征与其地理分布有关 ,说明微卫星技术作为畜禽遗传结构分析的辅助手段是可行的 。

中国部分地方鸡种肌肉氨基酸含量比较

采用高效液相技术对中国肖山鸡、白耳鸡、狼山鸡、乌骨鸡、油鸡以及白耳鸡（ ♂） ×肖山鸡（ ♀）和肖山鸡（ ♂） ×白耳鸡（ ♀） 等７ 个地方鸡种（ 组合） 进行胸肌氨基酸含量的比较研究，结果表明：①地方鸡种胸肌中大多数氨基酸含量在品种间差异显著（ Ｐ＜０ ．０５），必需氨基酸、氨基酸总量在品种间差异显著（ Ｐ＜０ ．０５） ，７ 个地方鸡种肌肉蛋白质的营养价值乌骨鸡最高，其它依次为白耳鸡、肖山鸡、白耳鸡（ ♂） ×肖山鸡（ ♀） 、油鸡、肖山鸡（ ♂） ×白耳鸡（ ♀） 、狼山鸡；② 地方鸡种肌肉氨基酸含量在性别间差异不显著（ Ｐ＞０ ．０５） ；③地方鸡种中鲜味氨基酸的含量与鸡种中口感风味基本一致，含量从高到低依次为：肖山鸡（ ♂） ×白耳鸡（ ♀） 、乌骨鸡、肖山鸡、白耳鸡、白耳鸡（ ♂） ×肖山鸡（ ♀） 、油鸡、狼山鸡；④构成胸肌蛋白质的氨基酸间大多数相关显著或极显著（ Ｐ＜ ０ ．０５ 或Ｐ＜０ ．０１） 。

乌骨鸡种群遗传结构的RAPD分析

利用RAPD技术对3个品系的乌骨鸡鸡种群体遗传结构进行分析,筛选的5个引物对3个品系的乌骨鸡均能产生特异性的条带,获得的多态性可用于乌骨鸡鸡种的遗传分析。品种间相似指数:两个白丝毛品系间(Ⅰ系和Ⅱ系)最高,黑丝毛乌骨鸡(Ⅲ系)与两个白丝毛品系间均较低,这可能与其品种间的外貌特征以及品种的来源有关。

鹅乙酰辅酶A酰基转移酶2基因的克隆及其在鹅肥肝形成过程中的表达变化

为了探讨ACAA2基因与鹅(Anser anser)肝脂肪代谢的关系,本试验选取35只朗德鹅分为填饲组(15只)和对照组(20只),填饲组包括填饲7、14和19天3个阶段。运用RT-PCR方法克隆出朗德鹅ACAA2基因的完整编码序列并进行生物信息学分析,采用实时定量PCR技术测定了朗德鹅填饲不同阶段该基因在肝中的表达水平,并用葡萄糖、脂肪酸和胰岛素分别处理鹅原代肝细胞,观察这些因子对基因表达的影响。朗德鹅ACAA2基因完整CDS区长1 194bp,编码397个氨基酸;各阶段填饲组肝中该基因的表达量显著高于对照组(P<0.05),但随填饲时间的延长,表达水平呈下降趋势。另外,在培养的鹅原代肝细胞中,相较于对照组,0.5mmol·L^(-1)的油酸能使ACAA2的表达量显著上调,而0.25mmol·L^(-1)的棕榈酸和不同浓度的胰岛素能显著下调ACAA2的表达(P<0.05)。结果表明,ACAA2基因的表达与鹅肥肝的形成密切相关,为深入研究ACAA2基因在鹅肥肝形成过程中的作用奠定了基础。

肥肝鹅恢复期血液生化指标、肝脏常规营养成分及脂代谢相关基因表达水平的变化研究

试验旨在研究朗德鹅填饲形成肥肝及恢复后其体重、肝脏重、腹脂重、常规营养成分、血液生化指标和肝脏中与脂代谢相关基因的表达变化情况,为进一步阐明鹅肥肝的恢复或保护机制提供依据。将18只70日龄朗德鹅随机分为3组(每组6只):组1为对照组,用玉米饲料进行常规饲喂;组2为填饲组,填饲玉米饲料19d;组3为填饲19d后再用玉米饲料常规饲养20d进行肝脏恢复。结果显示,与组2相比,组3鹅体重、肝脏重均极显著降低(P<0.01),而腹脂重下降不显著(P>0.05);与组2相比,组3肝脏水分、灰分和粗蛋白质均显著上升(P<0.05),而粗脂肪含量显著下降(P<0.05),但与组1相比,除水分外,各项指标均无显著变化(P>0.05);与组2相比,组3血浆中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)浓度与组2相比均显著下降(P<0.05),但与组1相比,均无显著差异(P>0.05);与组2相比,组3肝脏中脂肪酸脱氢酶(FADS1)、硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD1)和细胞色素P450 2C45(CYP2C45)基因的表达量均显著下降(P<0.05),但与组1相比均无显著变化(P>0.05)。综上所述,本研究从不同层面揭示了鹅肥肝的可逆性,为深入研究鹅肥肝的恢复或保护机制,促进动物脂肪肝问题的解决奠定了基础。

禽内源性反转录病毒ALVE1LTR转录水平分析

本研究以禽内源性反转录病毒ALVE1为研究对象,分析了ALVE1长末端重复序列(long terminal repeat,LTR)自身转录的变化规律。荧光定量PCR结果显示LTR在2日龄SPF鸡(发育早期)器官组织中转录水平高,而在35日龄SPF鸡(发育晚期)器官组织中转录水平低。焦磷酸测序和荧光定量PCR关联分析发现,ALVE1 LTR在鸡巨噬细胞系HD11和鸡T淋巴细胞系MSB1细胞中的转录水平可能受DNA甲基化调控,去甲基化处理HD11或MSB1 24 h后,LTR转录水平显著增加。通过序列分析发现ALVE1 LTR高度保守且存在先天性免疫应答激活转录因子如NF-AT、c-JUN等。本研究揭示了ALVE1 LTR自身转录的变化规律,为进一步分析ALVE1 LTR功能奠定了基础。