一株产纤维素酶菌株的筛选及酶学性质

以羧甲基纤维素钠为惟一碳源,从土壤中筛选出一株产纤维素酶的菌株XW-13,其摇瓶培养液的CMC酶活力为15.05μg/mL,滤纸酶活力为15.13μg/mL。酶学性质试验表明,该酶的最适反应pH 7.0,在pH 5.0～9.0时有较好的稳定性,酶活力保持60%以上。该酶的最适反应温度为40℃,在温度为20℃时基本稳定,保温2 h仍有80%以上的活力。在化合物浓度为0.2 mg/mL的条件下,NH4+、Na+、Fe2+、K+、Ca2+、Mn2+、Zn2+、Mg2+和Li+对酶活力有增进作用,Hg+和Cu2+对酶活力有抑制作用。

小单孢菌40027菌株质粒pJTU112复制区的克隆与序列特性

福堤霉素A产生菌——小单孢菌40027菌株含有两个质粒pJTU101和pJTU112。【目的】对质粒pJTU112复制区进行克隆,并对质粒pJTU112复制区序列进行测定和分析。【方法】克隆质粒pJTU112的不同DNA片段导入消除质粒的小单孢菌40027菌株,通过复制功能的测定,确定质粒pJTU112的复制区,并进行测序和生物信息学分析。【结果】质粒pJTU112的复制区定位在约4.7 kb的SacI-KpnI DNA片段上,测序和生物信息学分析表明:4.7 kb的SacI-KpnI DNA片段包含5个ORFs(open reading frames),其中pJTU112.1和pJTU112.2与质粒接合转移有关,pJTU112.3、pJTU112.4和pJTU112.5与质粒复制有关。【结论】质粒pJTU112的复制区定位在约4.7 kb的SacI-KpnI DNA片段上。