小立碗藓PpCDC48Ⅱ基因的定点敲除导致冷驯化后的冻害敏感

CDC48是真核生物AAA蛋白家族的一个重要成员,进化上相当保守,能与许多不同的协同因子相互作用,形成各种蛋白复合体参与调节细胞内多种重要的生理活动.本研究利用小立碗藓EST数据库信息克隆了小立碗藓AAA蛋白家族中PpCDC48II基因,其含有2个典型的ATPase结构域与拟南芥AtCDC48A具有非常高的同源性.0℃冷胁迫处理48和72h后,PpCDC48II在转录水平表现了诱导表达的特性.为了进一步阐明这个基因的功能,利用小立碗藓通过高效同源重组实现基因敲除的这一特点,获得了PpCDC48II单基因敲除的突变体.通过抗冻实验发现,冷驯化后的Ppcdc48II抗冻的能力明显降低,推测PpCDC48II在植物低温驯化诱导的抗冻过程中发挥了重要的作用.

植物基因打靶——模式植物小立碗藓的应用

"基因打靶"是利用同源重组的基本原理定向改变目标基因,并使其活性改变或者丧失的技术,是研究基因功能最直接和最有效的方法之一,给现代生物学和医学研究带来了革命性的变化。近年来,对一种模式藓类植物——小立碗藓的深入研究,发展出了植物高效"基因打靶"的实验系统,对植物基因功能研究起到了积极推动作用。对小立碗藓基因打靶的优点、研究历史、遗传学原理及载体类型作简要介绍。

“比较过氧化氢在不同条件下的分解”实验改进

通过实验证明,香菇中含有大量过氧化氢酶,用香菇代替动物肝脏进行“比较过氧化氢在不同条件下的分解”实验,可以降低实验风险,提高学生的实验参与度,减轻教师准备实验的工作量。用排水法改进实验,通过比较量筒中收集到相同体积水所需的时间长短比较过氧化氢在不同催化剂下的分解速率,变定性实验为定量实验,直观地得出酶的催化效率较无机催化剂高的结论。