胞浆抗原检测在急性双表型白血病中的诊断价值

目的 探讨胞浆抗原检测在急性双表型白血病 (BAL)中的临床诊断、鉴别诊断价值。方法 采用流式细胞术 (FCM )对 5 0 0例初治急性白血病 (AL)患者 ,统一进行常规一线抗体的检测 ,其中对一线抗体诊断不清的 80例加做二线胞浆抗原染色。结果 80例加做胞浆抗原检测后 ,依据EGIL(1998年 )积分系统 ,符合BAL有 10例 (10 /5 0 0例 ,2 0 % ) :T系 /B系双表型 3例 (cCD3、cCD79a双阳性 )、T系 /髓系双表型 3例 (cCD3、MPO双阳性 )、B系 /髓系双表型 4例 (cCD79a、MPO双阳性 ) ;符合急性未分化型白血病 1例 (0 2 % ) ;符合AL伴系表达 6 9例。结论 对诊断不清的AL病例 ,加做胞浆抗原检测 ,对进一步提高白血病的诊断水平 ,特别是对未分化型、双表型以及双表型的分类诊断。

流式细胞仪检测杂合型急性白血病免疫表型

采用流式细胞仪（FCM）及一组单克隆抗体对18例杂合型急性白血病（HAL）免疫分型。结果显示HAL主要可以分成三级：①B、髓混合型，12例；②T、髓混合型，2例；③T、B、髓3系混合型，4例。6例HAL双标记显示为双表型5例，双克隆型1例。表明FCM对HAL的诊断及分型具有重要价值。

免疫分型在FAB难以分类急性白血病中的诊断价值

分析40例按FAB标准难以分类的急性白血病（AL）免疫表型主要分为3种类型：①M2／M3难以鉴别；③过氧化酶阴性的AL；③杂合型急性白血病（HAL）。提示在FAB难以分类AL的诊断中具有不可缺少的作用。

淋系抗原表达在成人急性非淋巴细胞白血病的临床意义

采用流式细胞仪间接免疫荧光法检测91例初治成人急性非淋巴细胞白血病（ANLL）免疫表型。42.9％患者伴有淋系抗原（Ly+ANLL）。CD7+、CD19+及CD2+者分别为22％、13．2％及7.7％。与Ly－ANLL相比，CD7+患者外周血WBC高、CD34及P-糖蛋白表达也高（P＜0.05），CD7+ANLL之完全缓解率（CR）为35％，明显低于Ly－ANLL的73.1％（P＜0．05）。CD2表达与M3／t（15；17）及M5相关，CD19表达与t（8；21）及M5相关，CD2+与CD119+（8；21）ANLL之CR率分别为71．4％及80％，与Ly－ANLL无明显差异（P＞0.05）。不伴t（8；21）异常CD19+患者的CR率28．6％，明显低于Ly-ANLL（P＜0．05）。结果表明Ly+ANLL具有独特的临床及生物学特征。

HL-60/VCR多药耐药细胞株耐药机制的研究

背景与目的:白血病细胞对化疗药物的耐药是白血病治疗失败的主要原因,多药耐药细胞株为白血病多药耐药机制和逆转多药耐药性的研究提供了良好的模型。为探讨药物诱导产生多药耐药机制,我们对HL-60/VCR细胞的耐药机制进行了研究。方法:应用流式细胞术和一组抗体,对药物敏感细胞株HL-60和多药耐药细胞株HL-60/VCR细胞的耐药相关蛋白P-gp、MRP、LRP、BCRP、GST-π,以及凋亡调节蛋白bcl-2、bax、bcl-x、bad的表达进行分析。结果:在HL-60/VCR细胞株中,耐药相关蛋白P-gp、MRP、BCRP、GST-π分别是其在HL-60细胞株中的18.62、1.19、1.50、1.32倍,而LRP无变化。凋亡抑制蛋白bcl-2、bcl-x分别是其在HL-60细胞株中的2.48、1.25倍,凋亡调节蛋白bad是HL-60细胞株中的1.08倍;而凋亡诱导蛋白bax反而降低,是HL-60细胞株中的0.88倍。结论:多种机制参与HL-60/VCR的多药耐药,涉及耐药蛋白P-gp、MRP、BCRP和GST-π的表达增强,而且凋亡调节蛋白bcl-2、bax、bcl-x、bad均可能参与其耐药机制的形成。

多参数流式细胞术在多发性骨髓瘤微小残留病灶监测中的应用

目的探讨多参数流式细胞术(MFC)监测多发性骨髓瘤(MM)缓解期内微小残留病灶(MRD)的方法。方法采用MFC,利用CD45PE-cy5/SS设门,完成61例MM患者和8例正常人初次免疫分型。另有13例治疗后的MM患者,根据其初次免疫表型结果选择指标进行MRD动态监测。结果61例MM中骨髓瘤相关免疫表型(MAIP)的出现频率为:CD138+/CD38/CD56+(81.9%)、CD138+/CD38/CD19-(96.7%)、CD138+CD38/CD33+(21.3%)、CD138+/CD38/CD13+(11.4%)、CD138+/CD38/CD20+(19.7%)。另13例治疗后的MM根据其初次免疫表型结果,选择组合CD38/CD56+/CD45dim/-、CD138+/CD19-/CD45dim/-进行了MRD检测,12例(92.3%)检测到大于1.0×10-4水平的MRD。结论MFC免疫表型分析对于MM的治疗评估和预后判断可提供客观的依据。

成人急性杂合型白血病免疫学、细胞遗传学及临床特征

目的：探讨成人急性杂合型白血病（ＨＡＬ）的临床及生物学特征。方法：对１８例ＨＡＬ进行了免疫分型、核型分析及临床特征研究。结果：ＨＡＬ主要可以分成四组：（１）Ｂ、髓混合型，１０例；（２）Ｔ、髓混合型，１例；（３）Ｔ、Ｂ、髓三系混合型，３例；（４）Ｔ、Ｂ混合型，４例。１２例核型分析者中，８例（６７％）显示克隆性异常，其中４例Ｐｈ染色体阳性，３例高度复杂异常。ＨＡＬ患者高白细胞及脾肿大多见、ＣＤ３４及多药耐药Ｐ－糖蛋白高表达。２７．８％的患者获完全缓解，中位生存期３月。结论：成人ＨＡＬ具有多种不良预后因素，针对急性淋巴细胞白血病及急性髓细胞白血病的联合化疗方案可能改善ＨＡＬ患者的预后。

流式细胞术在急性淋巴细胞白血病免疫分型中的应用

采用流式细胞术对130例初治急性淋巴细胞白血病（ALL）免疫分型。T、B、T／B及NuLL－ALL分别占31．5％、55．4％、8．5％及4．6％。分别有20．8％及34．6％的患者表达髓系抗原（My）及CD34。T－ALL在儿童（41．3％）高于成人（22．4％）（P＜0．05），而B－ALL在成人（64．2％）高于儿童（6．0％）（P＜0．05）。儿童B－ALL中CD10、T－ALL中CD3表达均显著高于成人（P＜0．05）。My＋LL中CD34表达（70．4％）显著高于My-者（25．2％）（P＜0．01）。

109例慢性B淋巴系白血病免疫表型特征分析

本研究目的在于了解慢性B淋巴系白血病(B-CLL)的免疫表型特征,为临床的诊断、治疗、微小残留病灶检测及预后判断提供依据。应用流式细胞术及一组单克隆抗体,通过双色/三色流式细胞术,采用细胞表面与胞浆联合标记的方法,对109例序贯而来的B-CLL病例进行免疫表型分析。结果表明,109例B-CLL均表达CD19,其他B系抗原CD20、CD22、CD23阳性率分别为95.40%、94.50%、86.20%,无1例表达CD10。在105例B-CLL中有28.60%表达FMC-7,36.20%表达CD38。在所有B-CLL中CD5+B-CLL占86.23%,CD5-B-CLL占13.76%。对50例B-CLL进行ZAP-70的检测,其中12例ZAP-70阳性。在73例B-CLL中,膜表面球蛋白κ轻链阳性多于λ轻链。结论:了解B-CLL的免疫表型特点对此类疾病的诊断及治疗后微小残留病灶的检测具有重要意义,而免疫表型与预后的关系则需作进一步研究。

纯红细胞再生障碍性贫血患者外周血淋巴细胞表型及活化指标分析

目的探讨免疫紊乱在纯红细胞再生障碍性贫血(PRCA)发病中的作用。方法采用流式细胞术检测28例PRCA患者外周血淋巴细胞免疫表型及其活化指标,并与正常对照组比较。结果PRCA组外周血CD3+细胞、CD8+细胞显著高于对照组,CD4+细胞显著低于正常对照组,CD4+/CD8+比值较正常对照组显著降低,T细胞活化标志抗原HLA-DR、CD25、CD69表达率均显著高于正常对照组,差异均有高度统计学意义(均P<0.01),其中96%的PRCA患者CD69表达率都高于正常均数。结论PRCA患者外周血中总的T细胞及CD8+细胞均有显著增高,且T细胞活化程度也显著高于正常对照组,早期激活抗原CD69显著增高。

18例慢性淋巴细胞白血病免疫表型分析

１８例慢性淋巴细胞白血病免疫表型分析华东①李建勇夏学鸣（苏州医学院附属第一医院血液科，苏州２１５００６）王爱青耿美菊（苏州医学院重点实验室，苏州２１５００７）关键词慢性淋巴细胞白血病免疫表型慢性淋巴细胞白血病（慢淋，ＣＬＬ）在我国较少见，仅占全部白血...

CD55、CD59检测阵发性睡眠性血红蛋白尿症标准方法建立

目的建立流式细胞术(FCM)检测阵发性睡眠性血红蛋白尿症(Paroxysmal nocturnal hemoglobinuriaP,NH)的标准方法。方法应用FCM对49例PNH病人,18例自身免疫性溶血性贫血(AIHA),10例缺铁性贫血(IDA),正常对照40例;采用活细胞直接免疫荧光标记法检测红细胞和粒细胞膜表面的CD55和CD59的表达。结果49例PNH病人除2例红细胞CD55-、CD59-的百分率小于5%,其余病例红细胞和粒细胞CD55-、CD59-的百分率均大于5%(5.9%￣79.1%)。18例AIHA病人红细胞和粒细胞CD55-、CD59-的百分率均小于5%。10例IDA病人有8例红细胞CD55-、CD59-的百分率均大于5%(5.0%￣9.1%),而粒细胞CD55-、CD59-的百分率均小于5%。40例正常对照红细胞和粒细胞CD55-、CD59-的百分率均小于5%。49例PNH病人蛇毒因子试验5例阴性;糖水试验4例阴性、酸溶血试验5例阴性。而这其中仅2例病人蛇毒因子试验、糖水试验、溶血试验同时阴性。其余病人蛇毒因子试验、糖水试验、酸溶血试验均阳性。结论同时检测红细胞和粒细胞膜的CD55和CD59诊断PNH,该方法的灵敏度与特异性均高达100%。因此,针对国内其他单位在开展此项目时仅检测CD55或CD59,或者只检测红细胞或白细胞的CD55、CD59的情况,作者认为同时检测红细胞和粒细胞膜的CD55和CD59诊断PNH是值得在临床推广的标准方法。

c-kit在急性白血病中的表达及其临床意义

目的 :研究c kit受体 (c kitR ,CD1 1 7)在急性白血病 (AL)中的表达。重点了解c kitR表达对急性非淋巴细胞白血病 (ANLL)的诊断价值及其与ANLL的临床和生物学特征的关系。方法 :采用流式细胞术 (FCM)分别检测并比较 2 4例急性淋巴细胞白血病 (ALL)和 47例ANLL初诊患者骨髓单个核细胞 (MNC)跨膜c kitR表达的阳性率及阳性水平 ,并设立 1 0例正常人骨髓标本作为阴性对照组。结果 :ALL患者的c kitR表达的阳性率及阳性水平与正常人相比无显著性差异 (P >0 .0 5)。ANLL患者的c kitR表达率及阳性水平则均显著高于正常人和ALL患者(P均 <0 .0 1 )。c kitR阳性率以M1 、M2 最高 ,M4最低。ANLL患者c kitR表达与外周血白细胞计数、肝脾肿大无关(P >0 .0 5) ,但与染色体核型异常及LDH水平增高有关 (P均 <0 .0 5)。结论 :ANLL患者的c kitR阳性表达率及阳性水平均显著高于正常人和ALL患者 ,提示c kitR可作为AL患者MIC分型诊断的髓系免疫表型依据 。

肺耐药蛋白在初发急性白血病患者细胞的表达及意义

目的:探讨肺耐药蛋白(lungresistanceprotein,LRP)在急性白血病(AL)患者细胞的表达与临床耐药的关系。方法:应用LRP/VMP(Ab-2)单克隆抗体和流式细胞术对47例初发AL患者细胞进行检测并观察临床疗效。结果:LRP在急性髓细胞白血病(AML)和急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞的表达无差异。在AML的各亚型中,以M1、M5、M4表达较高,而M2、M3表达相对较低。临床耐药组的LRP明显高于临床缓解组(P<0.05)。高危组缓解率为35.5%,低危组的缓解率为76.6%,两者有显著性差异(P<0.05)。结论:LRP的过度表达可导致临床耐药,是初发AL患者预后的不良因素。

186例儿童急性淋巴细胞白血病免疫表型特征

目的回顾分析186例儿童急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)免疫表型结果,以期了解儿童ALL免疫表型的特征,为临床诊断、微小残留病(minimal residual disease,MRD)的监测提供依据。方法采用多参数流式细胞术(multiparameter flow cytometry,MFC),利用CD45PE-cy5/SS设门,完成186例儿童ALL病人的免疫分型。结果在186例ALL中,B系ALL78．5％(146/186),T系ALLl9．3％(36/186),T/M混合型ALL1．1％(2/186),B/M混合型ALL1．1％(2/186)。白血病相关免疫表型(characterization of leukemia-associated immunotyping,LAIP)的出现频率为:B-ALL CD19+/CD10+/CD117+1．4％; CD19+/CD10+/CD13+25．3％;CD19+/CD10+/CD33+21．3％;CD19+/CD10+/CD2+5．5％;CD10+/CD34+/CD45±86．9％;CD19+/ CD34+/CD20+24．7％;CD19+/CD10++/CD45±67．1％;CD19+/CD10-/CD20-4．1％。T-ALL CD7+/CD13+/CD45±5．6％;CD7+/ CD33+/CD45±2．8％;TdT+/CD3+/CD45±100％;CDT++/CD2±/CD45±77．8％;CD7+/CD4+/CD3-16．7％;CD7+/CD8+/CD3- 16．7％。结论儿童B-ALL比率高于T-ALL,约为T-ALL的4倍,混合细胞白血病在儿童很少见。而且儿童ALL均具有独特的LAIP特征,因此免疫表型分析对于白血病的诊断和MR监测可提供非常客观的依据。

86例成人急性髓性白血病免疫表型分析

常规使用10种单抗，用流式细胞仪（FACS）或荧光显微镜（FM）间接免疫荧光标记法检测了86树成人急性髓性白血病（AML）患者骨髓细胞的免疫标志。结果显示，髓系标志中CD33、CD13诊断价值较高，而CD15、CD14阳性率低。31．4％AML有淋系抗原表达，无单抗标记AML占16．3％，47．6％的患者表达CD34.FACS检测较FM更敏感、特异。

儿童与成人急性淋巴细胞白血病免疫表型的比较

目的 了解儿童及成人急性淋巴细胞白血病 (ALL)免疫表型的异同。方法 应用流式细胞仪直接免疫荧光法检测2 97例初治ALL ,其中儿童 10 9例 ,成人 188例。结果 在成人T系ALL中 ,男性多于女性 ,在成人B ALL中 ,女性多于男性 ,在成人伴髓系抗原表达ALL(My+ ALL)及CD3 4 + ALL中均为女性多于男性 ,而在儿童中均未见显著差异。无论是成人还是儿童 ,CD3 4 + 在B系ALL中的表达均高于T系ALL ;CD3 4 + ALL伴髓系抗原 (CD13 或CD3 3 )在成人中的表达明显高于儿童 ,两者有显著差异 ;在成人ALL中伴My+ 明显高于儿童 ,两者有显著差异 ;在成人及儿童My+ ALL中CD34的表达显著高于My-者 ,且有显著差异 ;CD2 + B系ALL均高表达CD3 4 ,且儿童比成人多见。结论 B ALL在儿童及成人中的比率均高于T ALL ;在成人及儿童ALL中 ,CD3 4 表达与B系ALL及CD2 + B系ALL相关 ;在成人My+ ALL明显高于儿童 ;在成人My+ ALL及CD3 4 + ALL中 ,以女性多见。