好氧发酵生产琥珀酸工程菌株的构建

通过分析大肠杆菌的碳源代谢途径,利用基因敲除手段,以Escherichia coli MG1655为出发菌株,成功构建了琥珀酸好氧发酵生产工程菌E.coliQZ1111(MG1655ΔptsGΔpoxBΔptaΔiclRΔsdhA)。检测结果表明该菌株能以葡萄糖为碳源,在好氧发酵且不表达任何异源基因的条件下大量积累琥珀酸。摇瓶试验证明,琥珀酸发酵产量达到26.4g/L,乙酸盐作为唯一检测到的副产物产量为2.3g/L。二者浓度比达到11.5:1。

三波长法测定超临界萃取九州虫草总黄酮含量

以九州虫草为试材,采用三波长-紫外分光光度法,测定了九州虫草超临界流体萃取物中的总黄酮含量。结果表明:以芦丁为标准品,选定244、272、302nm为测定波长,标准曲线回归方程为y=0.025 3x-0.090 4(r2=0.999 7);在浓度16~56μg·mL^(-1)内,△A与浓度之间呈良好的线性关系,表明该方法稳定性好,回收率为94.80%~97.75%,精密度RSD<0.67%(n=6),超临界提取获得的虫草黄酮含量为1.89mg·g^(-1)。

大肠杆菌突变株QQS101发酵生产琥珀酸初步研究

琥珀酸是一种具有重要应用价值的生物基平台化合物。对大肠杆菌focA-pflBldhA突变株QQS101在严格厌氧条件下生长和葡萄糖代谢能力进行了考察,比较分析了葡萄糖与大肠杆菌混合酸发酵产物的单位碳的还原程度,认为非严格厌氧条件有利于QQS101发酵葡萄糖积累琥珀酸,进一步对有氧生长碳源进行了对比试验的结果表明,以木糖支持有氧生长,QQS101摇瓶发酵39h消耗葡萄糖37.6g/L,琥珀酸的产量达到31.01g/L,摩尔产率为1.258molSuccinate/molGlucose。发酵过程中,丙氨酸的添加能够提高琥珀酸的摩尔产率。