高原体外肝细胞分离方法的研究

目的:探索高原环境下动物肝细胞的体外分离方法。方法:采用胶原酶体外两步灌流法先进行肝叶灌流,再将所得肝组织悬液分别置37℃温育不同时间,对比观测肝细胞产量、存活率、纯度及细胞接种后生长情况的差异。结果:未经温育组及温育10min、30min、60min组肝组织悬液的肝细胞产量分别为0.85、2.67、3.84和4.29×105/g湿重肝组织;肝细胞存活率分别为97.6％、96.9％、88.3％及71.5％;肝细胞纯度分别为96.2％、95.4％、96.7％及 95.8％;前两组细胞贴壁生长和增殖情况较好,后两组则较差。结论:在高原环境下先采用肝叶体外两步灌流后冉行胶原酶短时间(10min左右)温育处理是一种既可获得较满意的细胞活性,同时又可显著提高细胞产量的分离肝细胞方法。

高原体外肝细胞分离方法

目的 :探索高原环境下动物肝细胞的体外分离方法 ;方法 :采用胶原酶体外两步灌流法先进行肝叶灌流 ,再将所得肝组织悬液分别置 3 7℃温育不同时间 ,对比观测肝细胞产量、存活率、纯度及细胞接种后生长情况的差异 ;结果 :未经温育组及温育 1 0min、3 0min、60min组肝组织悬液的肝细胞产量分别为 ( 0 .85、2 .67、3 .84、4.2 9)× 1 0 6/ g湿重肝组织 ;肝细胞存活率分别为 97.6%、96.9%、88.3 %及 71 .5% ;肝细胞纯度分别为 96.2 %、95.4%、96.7%及 95.8% ;前两组细胞贴壁生长和增殖情况均较好 ,后两组则较差 ;结论 :在高原环境下先采用肝叶体外两步灌流后再行胶原酶短时间 ( 1 0min左右 )温育处理是一种既可获得较满意的细胞活性 ,同时又可显著提高细胞产量的分离肝细胞方法。