三七总皂苷注射液对脑出血大鼠脑水肿的影响

目的探讨活血化瘀中药三七总皂苷超早期治疗大鼠出血性中风的疗效。方法采用胶原酶法制备高血压脑出血模型。60只大鼠随机分为5组(假手术组、模型组及三七总皂苷高、中、低剂量组),每组12只;造模后4h开始每12h腹腔注射药物或生理盐水1次,共5次。于造模后24h、72h,各组大鼠测脑组织含水量,钠离子、钾离子含量,脑内血肿直径。结果三七总皂苷治疗各组大鼠的神经缺损症状加重(P<0.05),出血侧皮质及基底节脑水含量及钠离子含量较模型组均增加(P<0.05),钾离子含量较模型组减低(P<0.05);三七总皂苷各组治疗后血肿直径较脑出血模型组变小(P均<0.05)。结论三七总皂苷超早期治疗大量脑出血,可加剧早期脑水肿,引起大鼠神经功能缺损计分增加,但有利于加速治疗后血肿的吸收。大量脑出血超早期应用三七总皂苷治疗应慎重。

三七总皂苷分期治疗对脑出血大鼠微管相关蛋白-2及神经生长相关蛋白表达的影响

目的探讨三七总皂苷(tPNS)分期治疗对脑出血大鼠微管相关蛋白-2(MAP-2)及神经生长相关蛋白(GAP-43)表达的影响。方法大鼠随机分为5组:正常对照组、假手术组、脑出血模型组、脑出血后12h治疗A组、脑出血后72h治疗B组。治疗A组于脑出血后12h、治疗B组于脑出血后72h开始以三七总皂苷70mg/(kg.d)腹腔注射,连用4d。其余各组皆同时注射等量生理盐水。大鼠于造模后7d、14d、21d每个时间点分别处死,干湿重法测脑含水量,脑组织切片行MAP-2、GAP-43免疫组化。结果治疗组大鼠肢体功能较脑出血模型组好,且治疗A组神经功能评分在7d、14d、21d优于治疗B组(P<0.05);治疗组可明显改善脑水肿,7d时治疗A组脑含水量低于治疗B组(P<0.05)。治疗组血肿周边MAP-2及GAP-43表达皆高于脑出血模型组(P<0.05);且治疗A组在7d、14d、21d3个时间点表达高于治疗B组(P<0.05)。结论tPNS可以减轻大鼠脑出血后的脑水肿并积极上调MAP-2和GAP-43表达;早期给予tPNS治疗脑出血大鼠较晚期运用可能对大鼠康复更有利。

坎地沙坦预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的血管保护作用

目的探讨坎地沙坦预处理大鼠局灶性脑缺血后缺血区脑组织中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达,研究坎地沙坦的脑血管保护作用。方法 64只雄性SD大鼠,随机分为假手术组、缺血再灌注组、坎地沙坦低剂量组(0.1mg/kg.d)、坎地沙坦高剂量组(1mg/kg.d),每组16只,各组又随机分为缺血2h再灌注24h和72h两个亚组(每组8只)。灌胃4w后,采用大脑中动脉线栓法制备局灶性脑缺血模型,术前测量血压,术后24h监测缺血区大脑中动脉脑血流变化,再灌注24h、72h分别检查神经功能评分,断头取脑后TTC染色,免疫组化检测缺血区脑组织血管内皮eNOS、VEGF的蛋白表达。结果与缺血再灌注组比较,坎地沙坦低剂量组与高剂量组再灌注24h、72h神经功能评分均有好转(P<0.05),脑梗死面积明显减少(P<0.05),两组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。坎地沙坦高剂量组在服药后2w血压明显下降,维持在85mmHg,小剂量组无降压作用。缺血2h后,缺血再灌注组右侧大脑中动脉缺血区血流量下降为32%±3%,坎地沙坦低剂量组及高剂量组血流量分别为55%±5%、64%±7%。eNOS和VEGF阳性表达主要分布于梗死灶周围的血管内皮细胞。eNOS在坎地沙坦低剂量和高剂量组24h达到高峰(P<0.05),随后逐渐下降,VEGF随着时间延长表达进一步增加,再灌注72h达到最大。结论坎地沙坦通过改善缺血区脑血流量,上调缺血区eNOS及VEGF的表达,达到改善神经功能评分及减少脑梗死面积的目的。VEGF和eNOS可能成为缺血性脑卒中重要的保护靶点。

颅内外血管狭窄增加短暂性脑缺血发作早期的危险

目的探讨颅内外血管狭窄对首次短暂性脑缺血发作(TIA)后早期预后的影响。方法对196例首次发作TIA的患者行脑数字减影血管造影术检查,根据是否有颅内外狭窄,将其分为颅内外血管狭窄组(狭窄组)142例和无颅内外血管狭窄组(正常组)54例,比较两组3个月内的缺血性脑卒中发生率、TIA再发率和病死率;用logistic回归分析危险因素,Kaplan-Meier生存曲线估计生存率。结果狭窄组发生TIA 22例、脑梗死21例、死亡6例、合计发病49例,正常组发生TIA 4例、脑梗死2例、死亡0例、合计发病6例。在脑梗死和合计发病率方面,两组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.001);TIA再发率、病死率差异无统计学意义(P>0.05);Kaplan-Meier生存曲线比较差异有统计学意义(P<0.005)。结论颅内外血管狭窄是TIA后早期预后的独立危险因素。

三七总皂苷注射液对脑出血大鼠颅内血肿及脑水肿的影响

目的探讨三七总皂苷注射液对脑出血大鼠颅内血肿及脑水肿的影响。方法采用胶原酶法制备高血压脑出血动物模型。将60只大鼠随机分为假手术组、模型组及三七总皂苷高、中、低剂量组共5组,每组12只;造模后4 h开始,每12 h在颅内血肿内注射三七总皂苷注射液或生理盐水1次,共5次。于造模后24、72 h测各组大鼠脑组织含水量,钠离子、钾离子含量,脑内血肿直径。结果三七总皂苷干预各组大鼠的神经缺损症状记分增加,差异具有统计学意义(P<0.05),出血侧皮质及基底节脑水含量及钠离子含量较模型组均增加,差异具有统计学意义(P<0.05),钾离子含量较模型组减低,差异具有统计学意义(P<0.05);三七总皂苷各组治疗后血肿直径较脑出血模型组变小,差异具有统计学意义(均P<0.05)。结论大量脑出血超早期给予三七总皂苷干预,有利于加速血肿的吸收,同时可加剧早期脑水肿,引起大鼠神经功能缺损计分增加。提示大量脑出血超早期应用三七总皂苷应慎重。

脑溢安对出血性中风大鼠脑内MAPK信号转导通路的影响

目的 :探讨脑溢安对出血性中风大鼠脑内丝裂原活化的蛋白激活酶 (mitorgenactivatedproteinkinase,MAPK)信号转导通路的影响。方法 :根据Rosenberg法复制大鼠脑出血模型 ,采用免疫共沉淀、激酶方法 ,Westernblot检测脑出血大鼠海马ERK、JNK激酶活性变化及脑溢安对ERK、JNK激酶活性的影响。结果 :脑溢安下调脑出血大鼠海马活化的JNK蛋白表达 ,上调活化的ERK蛋白表达。结论 :中药脑溢安对脑出血大鼠海马组织MAPK信号转导通路起双重调节作用 ,表现为促进ERK生存通路 ,抑制JNK凋亡通路。

脑溢安含药血清对谷氨酸致培养大鼠皮层神经元损伤的保护作用

目的 :研究中药复方脑溢安对培养大鼠皮层神经元谷氨酸兴奋毒损伤的保护作用 ,为脑溢安用于治疗中风提供实验依据。方法 :建立谷氨酸致离体培养的大鼠皮层神经元兴奋毒损伤模型 ,用中药脑溢安浸膏粉含药血清进行干预 ,检测各组细胞培养液中的乳酸脱氢酶 (LDH)活性。结果 :脑溢安浸膏粉含药血清能显著地对抗培养皮层神经元的谷氨酸兴奋毒损伤 ,培养液中LDH活性明显降低 (P <0 .0 1)。实验过程中 ,含药血清加入量 5 %至 2 0 %均可。致神经元损伤的谷氨酸浓度以 1mmol·L- 1 以下为宜。结论

脑溢安对脑缺血大鼠脑组织MMP-2,9表达的影响

目的观察脑溢安对脑缺血大鼠脑组织的基质金属蛋白酶(MMPs)表达的影响。方法采用大脑中动脉线栓法制备脑缺血再灌注模型,参考Longa5分制法在动物麻醉清醒后进行评分,免疫组化染色检测脑组织MMP-2,9蛋白的表达。结果脑缺血组大鼠伤侧脑组织基质金属蛋白酶(MMP-2,9)的表达水平明显高于假手术组(P<0.05)。治疗组基质金属蛋白酶(MMP-2,9)的表达水平明显低于脑缺血组(P<0.05)。结论脑溢安能抑制大鼠脑缺血再灌注后脑组织中MMP-2,9蛋白表达,减轻缺血再灌注损伤。

脑溢安对出血性中风大鼠脑内磷酸化蛋白激酶表达的影响

探讨脑溢安对出血性中风大鼠脑内磷酸化蛋白激酶 (P -C -Jun)表达的影响和治疗机理。根据Roserberg法复制大鼠脑出血模型 ,采用免疫组织化学方法观察脑出血后梨状皮质内P -C -Jun的表达变化 ,并用组织病理学方法分析脑皮质内神经元的损伤状况。结果 :脑溢安治疗组较模型组脑内P -C -Jun蛋白表达弱 ,神经元受损状况轻。结论 :脑溢安下调脑内P -C -Jun蛋白表达 ,从而干预了丝裂原活化的蛋白激酶 (MAPK)信号转导通路。

翻转课堂在临床医学本科生《神经病学》的应用探讨

在传统教学模式为主的《神经病学》教学实践过程中,存在学生学习的主动性及积极性不高,学生对《神经病学》中的难点、重点理解和把握不够,对神经系统与其他系统的联系阐明不到位及教师无法将所有相关知识传授给学生等问题。翻转课堂则可有效改变学生以往固有的学习模式,把“被动学习”变为“主动学习”,把“灌输式”教学法变为“启发式”教学法,真正将“教、学、做”融为一体,逐步提高教师的教学水平和学生的自主学习能力。并且也可锻炼学生的团队合作精神,加强同学间相互沟通的能力以及解决临床问题的能力。还可培养学生的创新能力,提升学生的学习效率并促进学生的个性化发展。因此,应用翻转课堂教学不仅可让学生学到新知识,其综合素质也得到极大的提高。

三七总皂苷对脑出血大鼠微管相关蛋白-2及神经生长相关蛋白表达的影响

多数临床医师对活血化瘀等中药治疗超早期脑出血持慎重怀疑态度，目前，缺乏确切的实验和临床证据证明脑出血超早期应用活血化瘀中药是否有益。本研究选择大鼠脑出血后12、72h2个不同时间点作为开始应用三七总皂苷治疗的时间，观察三七总皂苷超早期应用，对脑出血大鼠微管相关蛋白-2（MAP-2）及神经生长相关蛋白-43（GAP-43）表达及脑水肿的影响。

氯吡格雷对尼古丁诱导的血管内皮损伤的保护作用

目的探讨尼古丁对血管内皮细胞的影响及氯吡格雷的保护作用。方法将40只SD大鼠分为5组,对照组、模型组(尼古丁2 mg/kg)、尼古丁损伤+氯吡格雷低剂量组(低剂量组)、尼古丁损伤+氯吡格雷中剂量组(中剂量组)、尼古丁损伤+氯吡格雷高剂量组(高剂量组),每组8只。尼古丁造模4周后,测定大鼠血浆超氧化物歧化酶(SOD)、内皮素1、NO及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)浓度,免疫组织化学法及Western blot法测定血管eNOS阳性细胞的表达。结果与对照组比较,模型组大鼠血浆NO、eNOS及SOD浓度明显下降,而内皮素1浓度明显上调,eNOS阳性细胞表达明显减少(P<0.01);与模型组比较,低、中、高剂量组大鼠NO、eNOS及SOD浓度明显升高,eNOS阳性细胞表达明显增多,且中、高剂量组大鼠增多更显著(P<0.05,P<0.01)。结论氯吡格雷可能抑制氧化应激反应,调节内皮细胞中eNOS的正常表达,从而缓解尼古丁对血管内皮细胞的损害。

MAPK信号转导通路和Caspase-3,Akt与脑缺血损伤

丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK)是信号从细胞表面转导到细胞内部的重要传递者。MAPK信号转导通路与神经元的存活和凋亡密切相关。多种胞外刺激包括缺血、兴奋性氨基酸中毒、电刺激等均可激活MAPK信号转导通路 。

易卒中型肾血管性高血压大鼠血浆高敏C反应蛋白的水平

目的观察易卒中型肾血管性高血压大鼠(RHRSP)卒中前血浆中高敏C反应蛋白(hs-CRP)的变化,初步探讨RHRSP脑卒中的可能机制。方法双肾双夹法复制RHRSP模型,并设假手术组。分别在造模后4、8、12周末舌下静脉取血,用胶乳增强免疫比浊法检测血浆高敏C反应蛋白的动态变化。在第12周末所有大鼠经历人工寒潮刺激,再行灌注固定、病理检查,根据镜检结果将高血压组分为卒中组和非卒中组,比较3组卒中前hs-CRP的水平。结果卒中组第12周末血浆hs-CRP水平明显高于非卒中组(P<0.01),卒中组第4、8、12周末血浆hs-CRP水平明显高于假手术组(P<0.01)。卒中组第12周末血浆hs-CRP水平较第4周和第8周末显著升高(P<0.01)。结论血浆中hs-CRP的骤升是RHRSP经历人工寒潮发生卒中的机制之一。

姜黄素对H_2O_2损伤PC12细胞的保护作用

目的 探讨姜黄素 (curcumin ,Cur)对氧化应激损伤PC12细胞的保护作用。方法 以H2 O2 损伤PC12细胞为氧化应激损伤的模型 ,采用甲氮甲唑蓝 (3 [4 ,5 dimethylthia zol 2 yl] 2 ,5diphenyltetrazoliumbromide ,MTT)法检测细胞增殖状况 ,碘化丙啶 (Propidiumiodide,PI)染色流式细胞术(flowcytometry ,FCM )检测细胞凋亡 ,罗丹明 12 3(Rho damine12 3,Rh12 3)染色FCM检测细胞线粒体膜电位 (mito chondrialpotentialmembrane ,△Ψm) ,双氢罗丹明 12 3(Dihy drohodamine12 3,DHR)染色FCM检测细胞内活性氧 (reac tiveoxygenspecies,ROS)的含量。 结果 2 0和 4 0 μmol·L-1Cur均可使 2 5～ 4 0 0 μmol·L-1H2 O2 作用 2 4h后对PC12细胞生长的抑制率下降 ,可明显抑制 10 0和 2 0 0 μmo·L-1H2 O2 作用 2 4h后对PC12细胞凋亡的诱导作用和对PC12细胞△Ψm的降低作用 ,可明显降低 10 0和 2 0 0 μmol·L-1H2 O2 作用 12h后细胞内ROS的含量。结论 Cur对氧化应激损伤PC12细胞具有保护作用 ,其机制可能与降低细胞内ROS的含量 ,进而抑制△Ψm的降低有关。

脑溢安对谷氨酸致神经元损伤的保护作用

目的探讨中医平肝熄风 ,凉血泻火治法的抗神经损伤机理。方法建立谷氨酸致体外培养的大鼠海马神经元兴奋毒性损伤模型 ,并用脑溢安含药血清、细胞外调节蛋白激酶 (ERK)阻滞剂PD 980 59进行干预 ,分别检测各组神经元活化的ERK、c jun氨基末端激酶 (JNK)水平及上清液LDH活性。结果脑溢安含药血清能上调谷氨酸损伤后的大鼠海马神经元ERK水平 ,下调JNK水平 ,PD980 59能阻断脑溢安对受损经元的保护作用。结论以平肝熄风、凉血泻火为主要治法的脑溢安含药血清对谷氨酸致培养大鼠海马神经元损伤后的保护作用与MAPK信号转导途径有关 ,脑溢安上调ERK表达 ,下调JNK表达 。

中西医结合治疗特发性气胸的疗效观察

目的:观察理气活血止痛法配合西医治疗特发性气胸的临床疗效。方法:首次发生的单侧肺压缩的特发性气胸患者分为3组,西医治疗组采用胸穿抽气、抗炎预防感染、止咳等常规治疗;理气活血止痛组在西医治疗组基础上同时口服理气活血止痛方药;止咳化痰平喘组在西医治疗组基础上服止咳化痰平喘方药,比较上述3组的疗效。结果:单侧肺压缩度>50％患者,理气活血止痛组的平均住院时间[(20.33±5.47)天]、胸穿抽气次数[(1.42±0.65)次]及抽气量[(1365.83±803.78)ml]少于止咳化痰平喘组[分别为(24.28±5.76)天、(1.88±0.83)次、(1840.00±1213.55)ml](均P<0.05)和西医治疗组[分别为(24.33±5.32)天、(1.89±0.83)次、(1808.33±1070.22)ml](均P<0.05)。止咳化痰平喘组和西医治疗组在住院时间、胸穿抽气次数、胸穿抽气量方面比较,差异无显著性意义(均P>0.05)。结论:理气活血止痛方药结合西医抽气等治疗特发性气胸能减少患者住院时间和胸穿抽气量,优于止咳化痰平喘方药及西医治疗。

进展性脑卒中与颅内外血管病变的相关性

目的探讨症状相关侧颅内外血管狭窄程度、斑块性质与进展性脑卒中的相关性。方法将496例急性缺血性脑卒中患者分为进展性脑卒中组(进展组,120例)和非进展性脑卒中组(非进展组,376例)。采用彩色多普勒超声仪和经颅彩色多普勒超声进行检查,比较2组患者症状相关侧血管狭窄程度、斑块性质的差异。结果24.2%的患者为进展性脑卒中。症状相关侧颅内外血管中、重度狭窄,进展组为79.2%,非进展组为55.1%,2组比较差异有统计学意义(x^2=24.97,P<0.01)。症状相关侧颈动脉斑块性质与脑卒中进展无相关性(x^2=2.97,P>0.05)。结论进展性脑卒中的发生与症状相关侧颅内外血管狭窄程度(≥50%)密切相关,其发病机制可能与狭窄所致的低灌注有关。

急性脑梗死患者外周血microRNA表达及其与炎症细胞因子的相关性

目的探讨急性脑梗死患者外周血microRNA(miRNA)的表达及其与炎症细胞因子的相关性和临床意义。方法选取南华大学附属南华医院神经内科和重症监护室急性脑梗死(ACI)患者60例(根据临床神经功能缺损程度评分分为轻度ACI 28例、中度ACI 18例、重度ACI 14例)及20例正常对照组。分别采集各组的外周静脉血予以实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-210、miR-145、miR-21、miR-223、miR-497、miR-15a mRNA的表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测白细胞介素10(IL-10)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平。结果 ACI组患者外周血miRNA的表达以及TNF-α、TNF-α/IL-10、IL-10水平均高于正常对照组(P<0.01);miRNA水平随ACI病情加重呈逐渐升高趋势,重度ACI患者血浆miR-21和miR-223表达水平均高于轻度ACI组和中度ACI组(P均<0.01);并且随着ACI病情加重,TNF-α、TNF-α/IL-10、IL-10水平呈增加趋势,差异均有统计学意义(P均<0.01),而且ACI患者死亡组TNF-α、TNF-α/IL-10、IL-10水平均显著高于生存组(P均<0.05);血浆TNF-α与miR-223水平呈正相关,与miR-21水平无相关性;血浆IL-10和TNF-α/IL-10分别与miR-21、miR-223水平呈正相关。结论 ACI患者miR-21、miR-223表达上调,与IL-10、TNF-α/IL-10水平正相关,有望作为ACI早期诊断和判断病情严重程度的标志物。