不同交联透明质酸复合凝胶在体内的宿主反应及基质金属蛋白酶9表达

背景:利用羟丙基甲基纤维素分子内的羟基与透明质酸中的羟基、羧基发生相互作用,可降低透明质酸的酶解,提高其作为皮肤填充材料的可使用性。目的:观察不同交联方式透明质酸复合凝胶体内植入后的宿主反应及基质金属蛋白酶9表达变化。方法:取新西兰大耳白兔(购自北京隆安实验动物养殖中心)12只,在其脊柱两侧皮下共注射10个点,左侧4点注射化学交联透明质酸钠-羟丙基甲基纤维素凝胶(化学交联组),右侧4点注射物理混合透明质酸钠-羟丙基甲基纤维素凝胶(物理交联组),左右侧各一点注射已上市注射用修饰透明质酸钠凝胶(对照组)。注射后1,4,12周分别切取包括植入材料在内的皮下组织,苏木精-伊红染色观察炎症反应和纤维化程度,Masson染色观察胶原纤维形成状况,免疫组织化学染色观察基质金属蛋白酶9表达变化。实验经天津市医药科学研究所动物伦理委员会批准(批准号:IMPS-EAEP-H-2017030)。结果与结论:①苏木精-伊红染色:化学交联组注射后1,4周时的炎症反应较对照组明显,囊壁及微囊壁较对照组增厚,注射后12周时炎症反应及纤维化程度与对照组类似;物理交联组注射后1周时可见少量炎细胞浸润,纤维包裹及微囊壁形成较对照组稍明显,注射后4周时纤维包裹及微囊壁较对照组增厚,注射后12周时炎症反应及纤维化程度与对照组类似;②Masson染色:化学交联组与物理交联组注射后1,4周时的胶原纤维较对照组增多,12周时胶原纤维进一步增加,与对照组无差异;③免疫组织化学染色:化学交联组注射后1周的基质金属蛋白酶9阳性表达低于对照组,其余时间点与对照组无差异;物理交联组注射后1周的基质金属蛋白酶9阳性表达低于对照组,注射后4周的阳性表达高于对照组,注射后12周与对照组无差异;④结果表明:两种交联透明质酸钠复合凝胶皮下植入后12周内的生物相容性良好,胶原纤维生成和基质金属蛋白酶9表达逐步增加,有利于组织重塑的进行,并且物理交联的样品植入早期组织反应更小,中期基质金属蛋白酶9表达明显增多,更利于组织修复和重塑。

宫颈癌细胞DNA定量分析与组织学分级的相关性

目的:探讨宫颈癌细胞DNA含量与组织学分级的相关性。方法:应用显微分光光度计的定量检测技术,对73例宫颈癌病人Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级癌细胞进行DNA含量及形态学的定量分析。结果:组织细胞DNA含量及细胞核面积,随病理级别的增高而递增,组织学病变越严重,DNA含量越高,细胞核面积越大。结论:对宫颈癌细胞DNA含量及面积的测定对肿瘤的早期诊断、组织学分级及指导治疗方案的选择有参考价值。

不同类型外科植入物组织学生物相容性评价比较

目的 评价不同类型外科植入物的生物相容性。方法 将近几年检测外科植入物 ,依据GB/T16 886 6 - 1997标准 ,从炎症、纤维囊壁形成、周边组织反应及材料降解四个方面进行组织学观察评价比较。结果 镍 -钛合金类、胶原止血海绵材料组织反应较轻 ,有些植入点还优于对照材料 ;而羟基磷灰石类材料组织反应呈中度 ,甚至有的植入点呈重度。结论 依据GB/T16 886 .6 - 1997标准 ,评价得分被检材料生物相容性是良好的。通过本文综合分析比较 。

海参的药理作用及临床研究进展

海参是我国传统的补益药 ,含有多种生物活性物质 ,实验研究证实 ,海参的活性成分具有抗凝血、抗肿瘤、增加免疫力及抗病毒等作用。本文介绍了海参生物活性成分的药理作用及临床应用研究进展。

公共图书馆服务体系中文献资源建设思考

文献资源建设在公共图书馆的构建中发挥着基础性的作用。读者到图书馆接受图书馆的各项服务,图书馆服务主要是指向读者提供阅读信息,那么信息获取的途径就成为图书馆服务体系中需要完善的内容。特别是目前正处于信息技术时代,要实现图书馆的智能化管理,需要图书馆的工作人员提高信息设备的操作能力,并做好维护工作。

乌司他丁联合异甘草酸镁对肺纤维化大鼠肺组织TGF-β1和CTGF表达的影响

目的观察乌司他丁联合异甘草酸镁对博莱霉素(BLM)诱导的肺纤维化大鼠肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法 90只大鼠随机分为以下5组:BLM组、甲泼尼龙琥珀酸钠(MTH)组、乌司他丁(UTI)组、异甘草酸镁(Mg IG)组、乌司他丁联合异甘草酸镁(UTI+Mg IG)组,各18只。5组均以气管内注入BLM建立大鼠肺纤维化模型,造模成功24 h后,BLM组大鼠每日腹腔注射生理盐水,其余各组给予相应药物腹腔注射。每组分别于第7、14和28天处死6只,HE染色评价肺组织肺泡炎及纤维化程度,免疫组化测定肺组织TGF-β1和CTGF的表达水平。结果 (1)药物干预各组肺泡炎及肺纤维化程度均较BLM组有所减轻,其中UTI+Mg IG组第7、14天肺泡炎程度,第14、28天肺纤维化程度与BLM组差异有统计学意义(P<0.05)。(2)药物干预各组TGF-β1和CTGF的表达水平在各时间点均较同期BLM组有所降低;UTI+Mg IG组TGF-β1的表达水平在第7、14天时明显低于UTI组和Mg IG组,第28天时明显低于MTH组、UTI组和Mg IG组(P<0.05);UTI+Mg IG组CTGF的表达水平在第7天时明显低于UTI组和Mg IG组,第14、28天时明显低于MTH组、UTI组和Mg IG组(P<0.05)。结论UTI联合Mg IG能减轻BLM诱导的大鼠肺泡炎及纤维化程度,其机制可能与下调TGF-β1和CTGF的表达有关。

甘珀酸抑制eATP-P2X7R-NLRP3信号通路减轻慢性胰腺炎纤维化的实验研究

目的探讨细胞外ATP(eATP)-P2X7R-NLRP3信号通路在慢性胰腺炎(CP)胰腺纤维化中的作用以及ATP抑制剂甘珀酸(CBX)对CP的治疗作用。方法将6周龄雄性C57BL/6小鼠随机均分为5组:正常组,模型组,CBX低、中、高剂量组(分别为25、50、100 mg/kg)。造模结束后,CBX各剂量组小鼠分别腹腔注射相应剂量的药物。末次给药24 h后将小鼠脱颈处死。HE染色评估胰腺组织病理学改变;ATP化学发光法测定小鼠胰腺组织eATP水平;免疫荧光染色检测P2X7R、NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)蛋白表达;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qPCR)检测P2X7R、NLRP3、Caspase-1、缝隙连接蛋白(PAN-1)mRNA的表达。结果HE染色,光镜下可见正常组小鼠胰腺细胞分布紧密,排列规则,无纤维化及炎症细胞浸润。模型组细胞间隙增宽、腺泡萎缩、炎症细胞浸润且有大量胶原纤维生成,组织学评分较正常组显著升高(P<0.01);与模型组相比,CBX中、高剂量组炎症细胞浸润及胶原纤维生成均减少,组织学评分降低。模型组小鼠造模后eATP水平较正常组显著升高(P<0.01),CBX中、高剂量组给药2周后,胰腺组织eATP水平均低于模型组。免疫荧光染色法和qPCR检测均显示,与正常组相比,模型组P2X7R、NLRP3、Caspase-1蛋白和mRNA表达升高(P<0.01);与模型组相比,CBX中、高剂量组表达均下调(P<0.05)。此外,qPCR检测结果还显示,模型组小鼠PAN-1 mRNA表达较正常组显著上调;与模型组相比,CBX中、高剂量组表达均下调(P<0.01)。结论CP病程中eATP水平显著增加并激活P2X7R,促进NLRP3炎性体组装,加重胰腺纤维化,CBX可下调P2X7R、NLRP3、Caspase-1,减轻胰腺炎症损伤及纤维化,从而发挥治疗作用。

壳寡糖降血糖作用的实验研究

目的:探讨壳寡糖的降血糖作用。方法:以尾静脉注射四氧嘧啶建立糖尿病大鼠模型,随机分为模型对照组,壳寡糖高、中、低剂量组,二甲双胍组和正常对照组,每组6只。观察壳寡糖对糖尿病大鼠血糖、胰岛素的影响及病理改变,观察壳寡糖对正常小鼠血糖及糖耐量的影响。结果:壳寡糖中、高剂量组均有明显降低四氧嘧啶糖尿病大鼠血糖作用(P<0.05)。壳寡糖改善模型对照组大鼠胰腺功能,3个剂量组壳寡糖使血中胰岛素有升高趋势,但与模型对照组比较差异无统计学意义。壳寡糖低、中、高剂量组与空白对照组小鼠血糖比较差异无统计学意义(P>0.05),中、高剂量壳寡糖使小鼠灌胃葡萄糖后0.5 h血糖降低,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:壳寡糖具有明显降血糖作用,对正常小鼠血糖无影响,增加小鼠糖耐量作用。

复方景川片对大鼠缺血性脑损伤的保护作用及对小胶质细胞/巨噬细胞极化的影响

目的观察复方景川片对大鼠缺血性脑损伤的神经保护作用,并探讨其对小胶质细胞/巨噬细胞极化的影响。方法60只大鼠按照随机数字表法分为空白对照组,模型组,尼莫地平组(阳性对照)和复方景川片低、中、高剂量组。除空白对照组外,其他各组采用线栓法构建大脑中动脉闭塞模型,复方景川片低、中、高剂量组于建模前7 d按照复方景川片0.78、1.56、3.12 g/kg连续灌胃给药10 d。建模后48 h采用Longa神经功能评分和横木行走实验评价大鼠神经行为改变,苏木素-伊红染色观察脑组织病理变化,免疫组化染色及Western blot检测大脑组织中细胞分化簇86(CD86)、精氨酸酶1(Arg1)表达。结果与空白对照组比较,模型组大鼠神经功能评分、横木行走评分显著增高(P<0.05),缺血侧大脑皮质神经元明显坏死、缺失,小胶质细胞/巨噬细胞增生较明显,CD86、Arg1表达均明显增加(P<0.05)。与模型组比较,各给药组大鼠神经功能评分和横木行走实验评分明显降低(P<0.05),缺血侧大脑皮质病变减轻,神经元坏死数目减少,锥体细胞增多,仍可见小胶质细胞/巨噬细胞增生,大脑皮质及脑组织CD86表达降低,Arg1表达增加,尤以高剂量变化更为明显(P<0.05)。结论复方景川片能够减轻大鼠脑缺血后的神经损伤,且高剂量效果更为明显,其神经保护机制可能与其调控小胶质细胞/巨噬细胞极化状态有关。

阿折地平对西罗莫司洗脱支架致血管内皮损伤的干预作用及机制探讨

目的观察阿折地平对西罗莫司洗脱支架致血管内皮损伤的干预作用,并探讨其作用机制。方法培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),将HUVEC分为对照组、模型组和实验组。对照组不加药物,模型组给予西罗莫司500 nmol/L,实验组给予阿折地平10μmol/L+西罗莫司500 nmol/L。各组处理24 h后,HE染色观察细胞形态变化,测定培养液中的NO,Fluo-3/AM荧光探针标记细胞内Ca2+,JC-1荧光探针检测线粒体膜电位,Annexin V FITC/PI染色法测算细胞凋亡率。结果各组处理24 h后,对照组细胞呈多角形、单层铺路石样排列;模型组细胞肿胀,胞质出现空泡,部分细胞核固缩、碎裂;实验组细胞基本呈多角形、单层铺路石样排列,少见细胞肿胀及胞质空泡。与对照组相比,模型组与实验组细胞培养液中NO水平降低、胞质Ca2+浓度升高、细胞凋亡率升高、线粒体膜电位下降(P均<0.05);与模型组相比,实验组细胞培养液中NO水平升高、胞质Ca2+浓度及细胞凋亡率降低、线粒体膜电位升高(P均<0.05)。结论阿折地平可在一定程度上抑制西罗莫司洗脱支架导致的血管内皮损伤,其机制可能与提高细胞内NO水平、降低细胞内Ca2+浓度、抑制线粒体膜电位降低、减少细胞凋亡有关。

P2X7R拮抗剂对小鼠慢性胰腺炎的作用及机制研究

目的探讨嘌呤能P2X7受体(P2X7R)拮抗剂——氧化三磷酸腺苷(OxATP)和亮蓝G(BBG)在抑制下游靶蛋白——核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)炎性体活化和慢性胰腺炎(CP)胰腺纤维化进程中的作用及可能机制。方法 40只C57BL/6小鼠随机均分为正常对照组、CP模型组、Ox ATP组和BBG组。除正常对照组腹腔注射与处理组等体积的生理盐水外,其余组均通过腹腔注射雨蛙素法制作CP小鼠模型(6周)。造模结束后,CP模型组、Ox ATP组和BBG组分别予以腹腔注射生理盐水、Ox ATP(20μL,300μmol/L)和BBG(20μL,10μmol/L)处理,连续注射2周。然后处死各组小鼠并取胰腺组织,行病理学检查,以HE染色对胰腺病理组织学(炎性细胞浸润、腺泡萎缩及纤维化程度)进行评分,天狼星红染色和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫组化染色分别对胰腺纤维化程度进行评估;免疫组化法检测胰腺P2X7R、NLRP3和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)中的累积光密度(IOD)值。结果与正常对照组比,CP模型组炎症损伤组织学评分增加,胰腺纤维化程度显著增加,P2X7R、NLRP3和Caspase-1免疫组化IOD值显著升高(P<0.05);与CP模型组相比,Ox ATP和BBG组炎症损伤组织学评分降低,HE染色纤维化评分、天狼星红染色和α-SMA免疫组化染色均显著减轻(P<0.05),胰腺P2X7R、NLRP3和Caspase-1 IOD值均明显降低(P<0.05)。结论 P2X7R拮抗剂Ox ATP和BBG能够显著减轻CP小鼠模型的慢性炎症和纤维化程度,阻断P2X7R-NLRP3炎性体信号通路,这有望成为治疗CP及其纤维化进程的一种潜在新策略。

雷帕霉素洗脱支架损伤血管内皮的作用机制探讨

目的探讨雷帕霉素洗脱支架损伤血管内皮的作用机制。方法(1)对兔行局部肌肉注射雷帕霉素(雷帕霉素组),模拟雷帕霉素洗脱支架安全性评价中的肌肉植入,同时设正常对照组和丙酮对照组。观察各组形态变化及测定匀浆液钙含量。(2)采用雷帕霉素0.1、1、10及100μg/L处理人脐静脉内皮细胞(HUVEC)48 h及1μg/L雷帕霉素处理HUVEC 6、12、24及48 h,采用MTT法检测细胞存活率,分析细胞存活率与药物浓度及处理时间的关系。(3)HUVEC分设正常对照组、1μg/L雷帕霉素组。48 h后HE染色观察细胞形态变化,用NO检测试剂盒测定细胞培养液NO含量,采用Fluo-3/AM荧光探针标记细胞内Ca^(2+)。结果(1)雷帕霉素组出现支架植入类似的蓝染表现,雷帕霉素组较正常对照组和丙酮对照组钙含量升高(P<0.05)。(2)雷帕霉素处理HUVEC后,细胞存活率随浓度增加和时间延长均呈逐渐降低趋势(P<0.01)。(3)雷帕霉素组细胞胞浆出现空泡、核固缩及核碎裂,与正常对照组比较,细胞培养液NO含量降低,细胞内游离Ca^(2+)含量增高(P<0.05)。结论雷帕霉素洗脱支架中抗增殖药雷帕霉素对血管内皮有损伤作用,其机制可能与引起细胞内钙升高有关。

p53 CD44V6及nm23/NDPK在非小细胞肺癌中表达的相关性分析

目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中p53、CD44V6及nm23/NDPK表达的相关性及预后意义。方法:采用免疫组织化学SP法对69例NSCLC组织中p53、CD44V6及nm23/NDPK进行检测。结果:p53、CD44V6及nm23/NDPK的表达与NSCLC患者的临床分期(P<0.05,P<0.01)、淋巴结转移(P<0.05,P<0.01)及生存率(P<0.05)密切相关。p53、CD44V6表达与nm23/NDPK在NSCLC中的表达呈明显负相关(P<0.01)。结论:联合检测NSCLC中p53、CD44V6及nm23/NDPK的表达对于判断预后和指导治疗可能具有实用价值。

慢性肾脏病血管钙化大鼠并发心肌炎性反应

目的观察慢性肾脏病血管钙化(CKD-VC)大鼠并发的心肌炎性损害及相关炎性因子TLR4、IL-6和TNF-α的表达。方法将大鼠分为对照组和CKD-VC组(腺嘌呤200 mg/kg灌胃+高磷0.5 g/d饮水)。5周末检测血常规及心、肾和主动脉组织学改变。10周末留取大鼠血清,检测肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、钙(Ca)和磷(P);取心脏、肾脏和主动脉,常规病理检查观察组织学改变;von Kossa染色鉴定血管钙化灶;Masson染色检测肾纤维化;免疫组织化学法检测心脏组织TLR4、IL-6、TNF-α的表达。结果随CKD肾脏病变进展,并发心脏炎性病变逐渐明显,5周时CKD-VC组血嗜酸性粒细胞和中性粒细胞均较对照组明显升高(P<0.01),1只动物心肌见少量淋巴细胞浸润;主动脉经von Kossa染色未观察到血管钙化发生。至10周时,心脏出现多发的心肌细胞坏死灶伴炎细胞浸润,炎性区域TLR4、IL-6和TNF-α均呈阳性表达;经von Kossa染色鉴定的血管钙化在CKD-VC组发生率为5/7。结论腺嘌呤灌胃联合高磷饮水诱导CKD肾损害和血管钙化的同时激活了TLR4、TNF-α和IL-6等炎性因子的表达,造成了心肌慢性炎性损害。

肺癌和癌前病变组织中FHIT、MSH2、p21蛋白表达及意义

目的探讨脆性组氨酸三联体(FHIT)、mutS同种组织蛋白2(MSH2)及p21蛋白表达在肺癌发生、发展中的意义。方法应用免疫组化SP法检测89份原发性肺癌组织(原发癌组)、12份淋巴结转移性肺癌组织(转移癌组)、12份肺癌癌前病变组织(癌前变组)及10份正常肺组织(对照组)中FHIT、MSH2及p21蛋白表达情况,分析各指标间相关性及其与肺癌临床病理参数的关系。结果与对照组比较,FHIT、MSH2及p21蛋白在其他三组中表达均下调(P(0.05);FHIT、MSH2蛋白表达与肺癌组织学类型、分化程度相关,p21蛋白表达与肺癌分化程度、临床分期及有无淋巴结转移有关(P均(0.05);FHIT和MSH2蛋白在原发癌组表达呈显著正相关(P<0.01),但均与p21蛋白表达无明显相关。结论 FHIT、MSH2及p21蛋白与肺癌发生、发展有关,联合检测三项指标可为临床预测疾病进展提供依据。

西罗莫司经利阿诺定受体2途径诱导血管内皮细胞钙超载

目的观察西罗莫司造成血管内皮钙超载引起细胞损伤并探讨其相关机制。方法在西罗莫司处理和利阿诺定稳定利阿诺定受体通道的情况下,采用MTT法检测人脐静脉内皮细胞(HUVEC)细胞存活率,HE染色观察细胞形态,一氧化氮(NO)检测试剂盒测定培养液NO含量,Ca2+敏感的荧光染料Fluo-3 AM标记胞质Ca2+,分别采用流式细胞仪分析和激光共聚焦显微镜观察细胞内Ca2+水平,JC-1荧光探针检测线粒体膜电位,Annexin VFITC/PI染色法检测细胞凋亡率。结果西罗莫司能降低细胞存活率(P<0.01)。西罗莫司500 nmol/L刺激24 h后,HE染色发现细胞肿胀,核固缩、核碎裂及胞浆空泡;NO含量降低,细胞内Ca2+含量增高,线粒体膜电位降低,细胞凋亡率增加(P均<0.01)。与西罗莫司500 nmol/L组相比,利阿诺定50μmol/L干预组细胞存活率明显增加(P<0.01),细胞内Ca2+含量降低(P<0.05),细胞培养液NO含量由28.33±4.18μmol/L增至47.03±3.87μmol/L(P<0.01),线粒体膜电位水平由0.24±0.03增至0.45±0.04(P<0.01),细胞凋亡率由43.3%±2.0%降至30.7%±0.9%(P<0.01)。结论西罗莫司可能通过内质网利阿诺定受体途径增加细胞内Ca2+水平,造成钙超载和线粒体损害,继而引起细胞凋亡。

肺癌P53表达与临床病理特征及预后关系的研究

目的探讨大、小细胞肺癌中P53的表达及其在肺癌发生、转移以及预后中的意义。方法采用S-P免疫组化染色技术及显微分光光度术,检测86例肺癌P53的表达情况。结果肺癌P53的表达与肺癌淋巴结转移及临床分期有关,P53的表达与患者的生存率有关,但与组织学分级及分化程度无关。P53阳性率及强度,在肺癌伴淋巴结转移阳性组高于淋巴结转移阴性组(P<0.01)。随着临床分期的增高,阳性率逐渐增高(P<0.05)。P53阳性患者术后3年生存率明显低于阴性者(P<0.05)。结论对肺癌进行P53的检测,有助于预测肺癌进展程度和淋巴结转移的诊断,以及评估肺癌患者的预后。

NM23/NDPK在肺癌中的表达及其与预后关系的研究

目的 :探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中NM23/NDPK的表达及其在NSCLC发生、转移及预后中的意义。方法:采用S P免疫组化染色技术,检测69例NSCLCNM23/NDPK的表达情况。结果:肺癌原发灶NM23/NDPK阳性表达率与NSCLC淋巴结转移及临床分期有关,NM23/NDPK的表达与患者的生存率有关,但与组织学分级及分化程度无关。NM23/NDPK阳性率在NSCLC伴淋巴结阳性组低于淋巴结阴性组(P<0.01)。随着临床分期的增高,阳性率逐渐降低(P<0.05)。NM23/NDPK阳性患者术后1,3年生存率明显高于阴性者(P<0.05)。结论:对NSCLC进行NM23/NDPK的检测,有助于预测NSCLC进展程度和淋巴结转移的诊断,以及评估NSCLC患者的预后。

宫颈上皮癌变过程中细胞DNA含量及形态的定量分析

应用MPVⅢ型显微分光光度计的检测及图像分析技术,对宫颈轻、中、重度非典型性增生细胞及正常细胞和癌细胞进行DNA含量及形态的定量分析.结果表明:轻、中、重三个增生级别组的DNA含量及细胞核面积与细胞异型程度成正比,且均高于正常组,低于宫颈癌组.我们认为,对宫颈非典型性增生细胞的DNA含量及面积的测定,为宫颈非典型性增生的早期诊断,以及指导治疗方案的选择,开辟了一个新途径.