喹诺酮类与β-内酰胺类/β-内酰胺酶抑制剂复方联合对嗜麦芽寡养单胞菌的抗菌活性

目的 了解嗜麦芽寡养单胞菌 (Strenotrophomonasmaltophilia)在延时培养时对喹诺酮类与 β 内酰胺 /酶抑制剂复方的MIC影响及联合应用抗菌活性。方法 微量肉汤稀释法测定MIC ,时间杀菌试验进行联合药敏试验并与棋盘法比较 ,并作耐药频率测定。结果 五种抗生素 48h测得MIC较 2 4h的MIC高 1～ 3倍 ;2 4h棋盘法测得头孢哌酮 /舒巴坦、替卡西林 /克拉维酸分别与左氧氟沙星、洛美沙星、环丙沙星联合用药对嗜麦芽寡养单胞菌的协同作用为 73 %～ 80 % ,48h则较 2 4h低 1 0 %～ 2 0 %。与时间杀菌试验测得的协同作用 50 %～ 66 %相近。联合用药的耐药频率明显低于单独用药。结论 48h判定MIC值可能更准确地反映嗜麦芽寡养单胞菌对抗生素的敏感性。时间杀菌试验较棋盘法更能真实反映出联合用药的效果。联合用药能减少细菌的耐药频率。

云南HIV阳性患者感染弓形虫基因型的初步分析

2011年9月至2012年12月收集云南省西部地区HIV阳性患者全血样品150份,利用巢氏PCR技术对血样进行弓形虫B1基因的扩增,扩增产物经限制性内切酶Pm1Ⅰ和XhoⅠ酶切,进行限制性内切酶片段长度多态性分析(RFLP)。自B1基因扩增阳性的血样中取5份扩增产物测序,结果与标准基因Ⅰ型株B1基因序列(登录号为AF179871)进行比对分析。在150份HIV阳性患者血样中,13份扩增出弓形虫B1基因,约530 bp。PCR产物酶切结果显示,13份血样均得到1个片段,约为500 bp,与标准基因Ⅰ型株的条带一致。测序结果显示,4份血样的扩增产物完全一致,与基因Ⅰ型株的B1基因序列仅有3个碱基的差异;余1份血样的扩增产物在第230对碱基处G→A。因此初步确定此次研究中的云南省西部地区HIV阳性患者感染弓形虫基因型为Ⅰ型。

左氧氟沙星、环丙沙星单用和联合其他抗菌药物对铜绿假单胞菌防突变浓度的研究

目的了解左氧氟沙星、环丙沙星单用及其与头孢他啶、美罗培南、阿米卡星联合使用，对铜绿假单胞菌防突变浓度（MPC）的变化。方法采用琼脂稀释法测定上述抗菌药物单用及联合使用对8株左氧氟沙星、环丙沙星敏感铜绿假单胞菌的MPC，并计算耐药频率。结果左氧氟沙星、环丙沙星单用对上述8株铜绿假单胞菌MPC／MIC分别为8～32、8～16；两药分别与头孢他啶、美罗培南和阿米卡星联合使用，MPC／MIC则降为2～8、2～4、1～2、1～2、4～8和1～8，联合用药较单独用药MPC／MIC下降2～16倍，且其耐药频率也大幅下降。结论联合用药能使耐药突变选择窗变窄，使MPC／MIC降低，减少耐药菌产生。

鲍曼不动杆菌生物膜形成抑制剂实验室初步研究

目的了解鲍曼不动杆菌(Ab)耐药性及乙二胺四乙酸(EDTA)、米诺环素和水杨酸对其生物膜形成的影响。方法采用纸片扩散法测定72株Ab对抗菌药物的敏感性;微量肉汤法测定EDTA、米诺环素和水杨酸对Ab的最低抑菌浓度(MIC);黏附半定量法测定不同耐药性Ab生物膜生成率及不同浓度EDTA、米诺环素和水杨酸对生物膜形成和成熟生物膜的影响。结果 EDTA、米诺环素和水杨酸对Ab的MIC_(90)分别为200 mg/L、4 mg/L和600 mg/L。Ab敏感株、多重耐药株和泛耐药株生物膜形成阳性率分别为22.22%、83.33%和76.67%。250 rng/L和500 mg/L EDTA、4 mg/L和8 mg/L米诺环素以及1 000 mg/L水杨酸可抑制成熟生物膜。结论生物膜在多重耐药和泛耐药的Ab中生成较高,EDTA、米诺环素和水杨酸均有抑制生物膜形成的作用。

用流式细胞仪分析抗生素后效应中细菌的生物学特征

目的 了解亚胺培南、环丙沙星、庆大霉素、头孢他啶四种抗生素对大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌抗生素后效应 (PAE)中细菌的大小及核酸含量的改变。方法 将处于亚胺培南、环丙沙星、庆大霉素、头孢他啶后效应中的大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌 ,用碘化丙啶 (PI)染色 ,流式细胞仪检测。结果 亚胺培南、环丙沙星PAE中 ,两种菌体积与核酸含量均增大 ;庆大霉素PAE中 ,两种菌体积与核酸含量不变 ;头孢他啶作用后的大肠埃希氏菌体积、核酸含量增大 ,铜绿假单胞菌没有变化。结论 这些变化与抗生素作用机制有关。用流式细胞仪能快速、直观分析细菌的生物学特征。

磷霉素对革兰阴性菌的体外抗菌活性研究

[目的]了解磷霉素对革兰阴性菌的体外抗菌活性。[方法]应用K-B纸片扩散法对革兰阴性菌进行体外敏感性实验。[结果]大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌和产气肠杆菌对磷霉素耐药率为10%-22%;其他肠杆菌、铜绿假单胞菌及鲍曼不动杆菌分别为35%-41%、71%和95%。产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对磷霉素的耐药率为16%和22%;肺炎克雷伯产酶菌耐药率（22%）明显高于非产酶菌（4%）。对磷霉素敏感株而言,磷霉素对大肠埃希菌抑菌环直径远大于肺炎克雷伯菌。[结论]对产ESBLs大肠埃希菌、肺炎雷伯菌、阴沟肠杆菌和产气肠杆菌引起的感染,可选用磷霉素,磷霉素对大肠埃希菌的抗菌活性高于肺炎克雷伯菌。对非发酵菌则不宜选用磷霉素进行临床治疗。

PCR衍生技术在刚地弓形虫基因鉴定和分型中的应用

不同基因型刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)的致病力及对药物的敏感性等均存在较大的差异。运用PCR衍生技术对不同弓形虫株进行基因鉴定和分型,可为弓形虫病的临床诊断和治疗提供重要依据。本文就PCR衍生技术在弓形虫基因鉴定及分型中的应用进展作一综述。

嗜麦芽窄食单胞菌耐药特性

为了解嗜麦芽窄食单胞菌 (Stenotrophomonasmaltophilia)的耐药特性 ,以指导临床用药 ,用微量肉汤稀释法进行药敏试验 ,用双纸片协同试验检测超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)。结果显示 ,S .maltophilia对包括亚胺培南在内的三代、四代头孢和氨基糖苷类抗生素高度耐药 ,对左旋氧氟沙星、头孢哌酮 /舒巴坦、替卡西林 /克拉维酸、环丙沙星和复方新诺明耐药较低。有 5 2 % (2 6 /5 0 )的菌株产ESBLs,产酶菌对头孢哌酮 /舒巴坦耐药明显高于非产酶菌。可见 ,治疗S .maltophilia感染可首选左旋氧氟沙星、头孢哌酮 /舒巴坦、替卡西林 /克拉维酸或联合用药。产ESBLs的S .maltophilia可能作为传播ESBLs的一个潜在的传染源。

大环内酯类药物与环丙沙星,头孢他啶联合用药对铜绿假单胞菌生物膜价值

目的观察大环内酯类药物与环丙沙星,头孢他啶对铜绿假单胞菌生物膜的影响。方法平板培养法制备细菌生物被膜,银染法初步鉴定生物膜、番红精染色测定生物膜的粘附性,分别在生物膜形成不同时间单独或联合加入不同浓度大环内酯类药物、环丙沙星、头孢他啶,菌落计数法计数加药后生物膜内细菌数量,并与不加药物所形成的生物膜做比较。结果1/16MIC的红霉素、阿齐霉素单独或与3MIC环丙沙星,头孢他啶联合作用后可减少细菌的粘附和被膜存活菌数(P<0·05、P<0·01)。48h生物膜较24h生物膜耐药性更强。结论红霉素、阿齐霉素减少细菌的粘附、预防或抑制细菌生物被膜的形成;与环丙沙星,头孢他啶联合用药能增强其杀菌作用。成熟的生物膜更具有耐药性。

产超广谱β-内酰胺酶细菌的检测及感染,耐药特性

目的 :了解医院内产超广谱 β -内酰胺酶 (ESBLs)细菌的种类、分布、耐药特性及产生原因。方法 ,以头孢噻肟、头孢三嗪、头孢他啶和氨曲南作指示底物 ,用双纸片协同试验检测ESBLs。结果 :716株G- 阴性菌检出 12种产ESBLs114株 ,主要由使用过三代头孢史的患者检出。以阴沟肠杆菌、肺炎克类伯菌和大肠埃希菌为主 ,检出率分别为 34 66% ( 2 6/ 75)、 19 37%( 2 5/ 12 9)和 14 75% ( 36/ 2 4 4 )。氨曲南和头孢噻肟是检测ESBLs的最佳指示物。产ESBLs菌对头孢菌素、氨曲南的耐药性高于非产酶株 ,所有产ESBLs菌对泰能敏感 (嗜麦芽窄食单胞菌除外 )。结论 :产ESBLs菌以阴沟肠杆菌、肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌为主 ,产生与使用三代头孢有关 ,并可通过质粒在细菌中相互传播。应根据药敏报告选择对ESBLs敏感的药物。

喹诺酮药物对环丙沙星敏感铜绿假单胞菌防变异浓度

目的了解4种喹诺酮药物对环丙沙星敏感铜绿假单胞菌防变异浓度(MPC)和MIC。方法采用琼脂稀释法检测环丙沙星、左氧氟沙星、氧氟沙星和加替沙星对20株环丙沙星敏感铜绿假单胞菌MPC和MIC。结果环丙沙星、左氧氟沙星、氧氟沙星和加替沙星MPC_(90)和MIC_(90)分别为6、18、18.4、21.2μg/ml;0.5、1.0、1.0和1.0μg/ml;MPC_(90)/MIC_(90)分别为12、18、18.4和21.2。4种喹诺酮MPC_(90)均高于C_(max)。MIC与MPC存在不一致性。结论环丙沙星较其它喹诺酮药物限制富集耐药突变能力更强。4种喹诺酮用药量均落在突变窗内,应提倡联合用药。不能从MIC推测MPC。

阿司匹林对白念珠菌生物膜的作用

目的了解阿司匹林对白念珠菌游离菌、芽管生成及生物膜的作用。方法微量平板法制备白念珠菌生物膜,加不同浓度阿司匹林,37℃培养,以活菌数判断其对白念珠菌游离菌和生物膜的作用。结果阿司匹林对白念珠菌游离菌MIC为0．78～1．56 mmol／L;1 mmol／L阿司匹林对不同时期白念珠菌生物膜均有抑制作用;0．4～0．8 mmol／L阿司匹林对24 h白念珠菌生物膜有抑制作用;1 mmol／L的阿司匹林对白念珠菌芽管生成无抑制作用。结论阿司匹林对白念珠菌游离菌和生物膜有抑制作用,对芽管无抑制作用。

肺炎克雷伯菌中qnr基因检测

目的了解质粒介导的喹诺酮类耐药基因qnr在肺炎克雷伯菌中流行及与ESBLs及对环丙沙星耐药的相关性。方法纸片扩散法检测药物敏感性,双纸片协同试验检测ESBLs。PCR方法检测qnr基因。结果 62株非重复的肺炎克雷伯菌中,ESBLs阳性率为75.8%(47/62),环丙沙星敏感率为45.2%(28/62),qnr总阳性率为53.2%(42/62)。单纯qnrA阳性5株(8%),qnrB9株(14.5%),qnrS10株(16.1%)。同时2种qnr基因阳性9株(14.5%),qnrA和qnrB基因阳性1株(1.6%),qnrA和qnrS基因3株(4.8%),qnrB和qnrS基因5株(8%)。在环丙沙星耐药株和敏感株中,qnr基因的阳性率分别为58.8%(20/34)和46.7%(13/28)。在ESBLs阳性菌株和阴性菌中,qnr的阳性率分别为68%(32/47)和6.6%(1/15)。结论 qnr基因主要分布在产ESBLs的肺炎克雷伯菌,与环丙沙星耐药与否无相关。

葡萄球菌生物膜的形成及影响因素

目的 了解临床标本中葡萄球菌形成生物膜的状况,及葡萄糖、乙醇、氯化钠对生物膜形成的影响。方法 采用刚果红、微量平板法检测生物膜形成及葡萄糖、乙醇、氯化钠对生物膜形成的影响。结果 刚果红法检测金黄色葡萄球菌(金葡菌)、凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)生物膜阳性率分别为26.2%和12.7%;生物膜半定量法,金葡菌:普通肉汤、0.25%葡萄糖、2%、4%乙醇、2%、4%氯化钠阳性率分别为14.7%、29.6%、32.7%、19.6%、13.1%和14.6%;CNS分别为13.9%、27.8%、26.5%、18.5%和21.5%。结论 临床标本葡萄球菌相当一部分能产生生物膜,葡萄糖、乙醇能促进生物膜形成。

喹诺酮药物对环丙沙星敏感金黄色葡萄球菌防耐药突变浓度

目的测定4种喹诺酮药物对临床标本中对环丙沙星敏感金葡菌的MIC和防耐药突变浓度(mutant prevention con-centration,MPC)。方法采用琼脂稀释法检测加替沙星、左氧氟沙星、帕珠沙星和环丙沙星对20株环丙沙星敏感金葡菌MPC90、MPC90/MIC90、结果加替沙星、左氧氟沙星、帕珠沙星和环丙沙星MPC90、MPC90/MIC90分别为1.2、9.2;4.0、16;4.0、16和8、16mg/L。MIC与MPC存在不一致性。少数菌能在MPC浓度下存活,但没有MIC改变。结论加替沙星较其他喹诺酮药物限制选择富集耐药突变株能力更强,不能从MIC推测MPC。

用套式PCR检测b型流感嗜血杆菌

为快速、准确地诊断b型流感嗜血杆菌(Hib)感染,用Hib荚膜型特异DNA3条引物,套式PCR扩增Hib,并用Hia、c～f荚膜标准菌株及4种其它细菌作对照.只有Hib标准株出现特异条带,45例肺炎患儿鼻咽深部分泌物阳性率为22.2%,23例非呼吸道感染患儿阳性率为4.3%,8例化脓性脑膜炎患儿脑脊液2份阳性.认为用PCR检测Hib,比细菌培养更快速、敏感,特异性好,能及时准确诊断Hib感染.

柯萨基B_3病毒对外周血单个核白细胞介素－2受体表达的影响

本文研究了柯萨基Ｂ３病毒（ＣｏｘｓａｃｋｉｅｖｉｒｕｓＢ３）对正常人ＰＢＭＣ白细胞介素一２受体（ｍＩＬ一２Ｒ）表达的影响，结果实验组为８９．８３±７．０３％，对照组为５２．５±６．１３％，表明ＣｏｘｓａｃｋｉｅｖｉｒｕｓＢ３能作用于ＰＢＭＣ，使其ｍＩＬ一２Ｒ表达明显减少（Ｐ＜０．０１），由此影响ＩＬ－２发挥正常的生物学功能，如促使Ｔ细胞增殖，ＮＫ细胞活化等，本文认为ｍＩＬ－２表达减少可能是ＣｏｘｓａｃｋｉｅｖｉｒｕｓＢ组病毒所致心肌炎患者细胞免疫功能异常的原因之一。

云南西部两地区HIV阳性者弓形虫感染血清学调查

采集2010年6月～2011年8月云南西部两个地州(大理、德宏)的HIV阳性者(927份)血清和HIV阴性者(80份)血清,用ELISA法检测血清中弓形虫IgG抗体。结果显示,两地区HIV阳性者和HIV阴性者的弓形虫特异性抗体IgG阳性率分别为35.1%(325/927)和23.8%(19/80)。HIV阳性血清的检测结果显示,德宏州和大理州的阳性率分别为30.3%(178/588)和43.4%(147/339);各民族间的弓形虫IgG阳性率之间的差异有统计学意义(χ2=28.433,P<0.05);不同年龄组的阳性率差异无统计学意义(χ2=4.248,P>0.05),41～60岁阳性率最高(36.1%,103/285);但不同性别间[男性(35.6%,203/571)、女性(34.3%,122/356)]的差异无统计学差异(χ2=0.158,P>0.05)。

补骨脂与双氢青蒿素合剂治疗小鼠隐孢子虫病的实验研究

用补骨脂和双氢青蒿素合剂治疗经地塞米松诱导的隐孢子虫病小鼠,剂量为补骨脂3.4g/kg,双氢青蒿素60mg/(kg·d),灌胃,连用7d。结果粪检隐孢子虫卵囊数、全血CD4+、CD3+T细胞比例、血清γ干扰素(IFN-γ)浓度,以及小肠组织匀浆一氧化氮(NO)浓度均高于感染对照组(P值均<0.01)。小肠组织病变程度均轻于感染对照组。表明补骨脂和双氢青蒿素合剂可通过调节血清IFN-γ、全血CD4+、CD3+T细胞比例,以及提高肠组织NO浓度,参与宿主免疫应答和炎症反应过程,抑杀虫体、治疗小鼠隐孢子虫病。