11461例妇科门诊患者HPV亚型感染状况的研究

目的了解妇科门诊患者HPV感染率、亚型分布以及不同年龄HPV感染状况,为防治HPV感染提供科学依据。方法对2008年10月～2011年7月来该院妇科门诊就诊的11 461例患者进行登记,并采集其阴道、宫颈分泌物作为标本,用导流杂交基因芯片技术进行21种HPV基因型的分型检测。用EXCEl 2007和SPSS 17.0软件建立数据库及统计分析,HPV感染率比较采用统计学χ2检验。结果①HPV阳性总检出率为44.45%(5 094/11 461),高危型别感染率为40.54%(4 646/11 461),低危型别感染率为4.26%(488/11 461),单一型别感染率为30.89%(3 540/11 461),多重型别感染率为14.00%(1 604/11 461);②HPV感染率最高的亚型为HPV16型(15.55%),且以单一感染和双重感染为主;③不同年龄检查者的HPV感染率差异有统计学意义(χ2=77.03,P<0.01),随着年龄的增加,HPV的感染率逐渐增加(趋势性χ2=76.67,P<0.01),不同年龄的HPV感染者感染不同的高低亚型构成上有统计学意义(χ2=121.70,P<0.01),不同年龄的HPV感染者单一及多重感染构成上也具有统计学意义(χ2=121.70,P<0.01),各年龄HPV感染者均以单一及高危感染为主,但在30岁以下及60岁以上年龄HPV感染者中高低危合并多重感染高于其他年龄段。结论该院妇科门诊患者HPV感染率处于较高水平,HPV感染率最高的亚型为HPV16。不同年龄检查者HPV感染率不同,且随年龄增加有逐渐增加趋势,高低危亚型、单一及多重感染的构成在不同的年龄中有差别,30岁以下及60岁以上年龄女性中,高低危合并的多重感染高于30～60岁的女性。

瘤体注射表皮生长因子受体抗体治疗小鼠宫颈癌

目的 :观察阻断表皮生长因子受体是否治疗小鼠宫颈癌。方法 :将小鼠宫颈癌细胞U14(1× 10 7)移植入近交系 6 15系小鼠皮下 ,待成瘤后将 2 4只小鼠随机分为 4组 ,用表皮生长因子受体单克隆抗体 (EGFR -McAb)瘤体局部注射 (每天 1次 ,连续 2周 )治疗A和B组 ,用生理盐水对照治疗对照A和对照B组。观察治疗A及对照A组小鼠的生存期和肿瘤的抑瘤率。并取治疗后第 4,7,10 ,14,16 ,17d处死的治疗B组及对照B组小鼠瘤体组织作血管内皮标记物CD31免疫组化染色 ,计算肿瘤内平均微血管密度。结果 :用EGFR -McAb治疗A组平均生存期 42 .8d ,较对照组 2 8.3d明显延长 (P <0 .0 1)。治疗A组肿瘤抑瘤率第 4d为 13% ,第 7d为 42 % ,第 10～ 14d达高峰 ,维持在 83% 84%。第 7,10 ,14d治疗A组与对照A组瘤体体积差异显著 (P <0 .0 5 )。治疗组肿瘤内微血管密度明显低于对照组(P <0 .0 5 )。结论 :EGFR -McAb可有效治疗小鼠宫颈癌 ,提示其可作为宫颈癌导向治疗的候选靶分子。

OSCE在妇产科临床教学的应用

OSCE是一种客观评估临床技能的方法,本文总结了几年来该科应用OSCE方法于妇产科临床教学的经验和体会。

妇产科临床实习带教的体会

妇产科临床实习是医学生医学实践教学的重要部分,本文总结了我科多年妇产科临床实习带教的经验和体会,以不断提高临床实习教学质量和效果。

RNAi技术特异抑制HPV18E6基因表达的研究

目的探讨利用RNAi技术研究靶向抑制宫颈癌细胞株Hela中HPV18E6的可行性。方法根据哺乳动物SiRNA设计原则要求,利用T7RNA聚合酶体外合成针对HPV18E6、E7的SiRNA,用2%的琼脂糖电泳鉴定、脂质体转染Hela细胞,分4组,A组:HPV18E6的SiRNA干预组;B组:HPV18E7的SiRNA干预组;C:HPV18E6、E7的SiRNA干预组;D:基因组文库任意SiRNA为对照组。于转染48、72、96h后,用免疫组化法测定HPV18E6蛋白的表达。结果干预组A和C转染后48、72h,HPV18E6的阳性表达明显减少,以72h为明显,96h后表达无明显减少。而干预B组和对照D组的HPV18E6的阳性表达无明显改变。结论靶向HPV18E6的SiRNA能特异瞬时抑制靶基因E6的表达,该方法将为宫颈癌预防和治疗提供新的策略。

根治性子宫颈切除术

对于年轻妇女早期宫颈癌 ,保留生育功能的手术是子宫颈癌治疗史上一个新的里程碑。本文就根治性子宫颈切除术的方法、适应证。

肿瘤导向治疗“弹头”的研究进展

肿瘤的导向治疗是恶性肿瘤的生物治疗方法之一。近 2 0多年对导向治疗“弹头”的研究已取得很大进展 ,但传统的以化疗药物、生物毒素、放射性核素为“弹头”的导向治疗存在靶向性不强及疗效差等弱点 ,以信号传导及基因药物为“弹头“

IL-1β或TNF-α干预的子宫蜕膜细胞对母胎界面Th1/Th2及Th17/Treg平衡的影响

目的:探讨IL-1β或TNF-α干预的子宫蜕膜细胞对母胎界面Th1/Th2及Th17/Treg平衡的影响。方法:子宫蜕膜细胞经体外分离后,加入10–8 mol/L雌二醇(E2)+10–7 mol/L孕激素(P)培养7 d后,分别给予IL-1β或TNF-α干预24 h,收集上清液,制备条件培养液。应用条件培养液刺激子宫蜕膜T细胞72 h后,收集上清液,ELISA法检测上清液IFN-γ,IL-2,IL-17,IL-5,IL-10及TGF-1β的表达。收集子宫蜕膜T细胞,提取RNA,用实时定量PCR检测细胞因子m RNA的表达。通过T细胞分泌的细胞因子水平来评估子宫蜕膜细胞对Th1/Th2及Th17/Treg平衡的影响。结果:IL-1β或TNF-α干预子宫蜕膜细胞24 h后,其条件培养液能够促使子宫蜕膜T细胞Th1细胞因子IFN-γ分泌增加7~8倍,IL-2分泌增加6~7倍,Th17细胞因子IL-17分泌增加15~19倍,Th2细胞因子IL-10和IL-5的分泌无差异,Treg细胞因子TGF-1β的分泌无差异;其条件培养液促使IFN-γ和IL-17 m RNA表达增加,而IL-10及TGF-1βm RNA的表达无差异。结论:IL-1β或TNF-α刺激的子宫蜕膜细胞改变母胎界面Th1/Th2及Th17/Treg细胞的平衡,向Th1及Th17偏移。

宫腔镜电切术治疗难治性宫角妊娠35例

目的:总结应用宫腔镜电切术治疗难治性宫角妊娠的临床经验。方法:对中南大学湘雅二医院2007年1月—2011年1月应用宫腔镜电切术治疗的35例难治性宫角妊娠(经过2次以上清宫甚至超声或宫腔镜指导下清宫失败)患者的临床资料进行回顾性分析。结果:34例一次性宫腔镜电切手术切除干净,有1例因胚胎组织粘连致密且浅植入肌壁进行第2次宫腔镜电切手术将病灶切除干净。手术时间(23.0±8.3)min,出血量(30.5±6.2)mL,清出组织(12.0±6.5)g,手术膨宫需液体量(3 808.3±529.5)mL。结论:应用宫腔镜电切术治疗难治性宫角妊娠安全、可靠,有很好的临床应用价值,值得推广。

临床路径教学法在妇产科教学中的应用

目的:观察临床路径教学法在妇产科临床实习中应用的效果。方法:将80名实习学生随机分为两组,研究组采用临床路径教学法,对照组采用传统教学法,分别对两组进行考核。结果:临床路径教学组成绩优于传统教学法组。结论:临床路径教学法在临床实习中可提高教学质量。

妊娠合并绒毛膜癌3例

例1，患者，23岁，G3P0。因孕7^＋月，咳嗽、咳血半月余，发现盆腔包块7天，于2008年9月15日入住我院。末次月经2008年2月6日，孕早期无特殊不适，未定期产前检查，于2008年9月初出现咳嗽，咳血，胸痛，伴乏力，

RUNX3基因在宫颈癌中的表达及临床意义

目的:探讨RUNX3在宫颈癌发生、发展中的意义。方法:采用免疫组织化学方法检测25例正常宫颈、34例宫颈上皮内瘤变(intraepithelia neoplasia,CIN)、48例宫颈癌组织中RUNX3蛋白的表达,应用SYBR GreenⅠ嵌合荧光real-time PCR技术检测10例正常宫颈、24例CIN和30例宫颈癌组织中RUNX3mRNA的表达。结果:RUNX3蛋白、mRNA在正常宫颈、CINⅠ、CINⅡ～Ⅲ和宫颈癌中的表达呈递减趋势,4组间差异有统计学意义(P<0.05)。RUNX3蛋白、mRNA的表达与宫颈癌分化程度、临床分期以及是否淋巴结转移明显相关(P<0.05),与年龄、组织学类型和高危型人乳头状瘤病毒感染无显著相关(P>0.05)。结论:RUNX3可能作为抑癌基因参与了宫颈癌的发生、发展。

宫颈病变子宫切除术后阴道上皮内瘤变的筛查及其临床意义

【目的】探讨因宫颈病变行子宫切除术后阴道上皮内瘤样变（VAIN）筛查方法及其临床意义。【方法】回顾性分析2009年1月1日至2012年12月31日在中南大学湘雅附二医院因宫颈病变行子宫切除术后在随诊中确诊为VAIN的28例患者的临床资料及随诊过程中液基细胞学（TCT）、人乳头状病毒（HPV）感染和症状学的相关资料。【结果】28例患者中在术后2年和5年内诊断为VAIN分别占78．57%（22/28）和96．43%（27/28）。液基细胞学检测（TCT）结果为：高度上皮内瘤变（SHIL）2例，低度上皮内瘤变（LSIL）2例，非典型鳞状上皮细胞（ASCUS）为14例，占50%；未见上皮内瘤变及恶变10例占35．75%。高危HPV感染阳性率为92．86%（26/28），以HPV16和HPV52为主，各4例。有阴道症状患者为12例（42．86%），无症状16例占57．14%。【结论】因宫颈病变行子宫切除术后患者的高危HPV感染阳性率比TCT筛查的VAIN阳性率更高，但特异性差。因此，对此类患者的术后VAIN筛查应结合TCT、高危HPV-DNA分型及临床症状综合分析，避免漏诊。

某妇幼保健院妇科患者HPV亚型感染的研究

目的探讨妇科门诊患者HPV感染率、亚型分布以及不同年龄HPV感染情况,为本地区妇女HPV防制提供基线资料。方法对2009年10月-2011年7月来湘潭市妇幼保健院妇科门诊就诊的9 266例患者进行登记,并采集其阴道、宫颈分泌物作为标本,用导流杂交基因芯片技术进行21种HPV基因型的分型检测。用EXCEl2007和SPSS17.0建立数据库及统计分析,HPV感染率比较采用χ2检验。结果①HPV阳性总检出率为21.07%（1 952/9 266）,高危型别感染率为18.55%（1 719/9 266）,低危型别感染率为2.51%（233/9 266）,单一型别感染率为15.55%（1 441/9 266）,多重型别感染率为5.51%（511/9 266）;②HPV感染数前三位的是HPV52、HPV16、HPV58,且以单一感染和双重感染为主,高危型和低危型感染者在HPV单一及多重感染分布上差异有统计学意义（χ2=68.37,P〈0.01）;③不同年龄检查者的HPV感染率差异有统计学意义（χ2=28.27,P〈0.01）,不同年龄的HPV感染者感染高低亚型的分布上差异有统计学意义（χ2=32.87,P〈0.01）,不同年龄的HPV感染者HPV感染类型的分布上差异有统计学意义（χ2=48.49,P〈0.01）,各年龄均以单一及高危感染为主,但在25岁以下及50岁以上年龄HPV感染者中高低危合并感染、多重感染多于其他年龄段。结论本院妇科门诊患者HPV感染率处于较高水平,HPV感染最常见的亚型为HPV52、16、58。不同年龄患者HPV感染率不同,高低危亚型、单一及多重感染分布在不同的年龄中有差别,在25岁以下及50岁以上年龄患者中高低危合并的多重感染高于25~50岁患者。

稳定转染短发夹状RNA后子宫颈癌细胞中人乳头状瘤病毒18型E6基因表达的变化

目的探讨宫颈癌细胞株HeLa细胞稳定转染表达短发夹状RNA(shRNA)的质粒后,HeLa细胞中人乳头状瘤病毒18型E6基因(HPV18E6)表达的变化。方法实验组将本实验室前期构建的可遗传性表达HPV18E6shRNA的pE6-1shRNA质粒和含E6基因突变点的pE6-2shRNA质粒分别转染HeLa细胞,对照组以空质粒pSUPER和不加质粒的脂质体分别转染HeLa细胞。稳定转染后,氨基糖苷抗生素(G418)筛选阳性细胞克隆,RT-PCR技术和免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接(SP)法分别检测HeLa细胞中HPV18E6mRNA和蛋白表达的变化。结果稳定转染后,G418筛选,实验组HeLa细胞有新的阳性细胞克隆形成,而对照组HeLa细胞最终全部死亡。实验组转染pE6-1shRNA质粒的HeLa细胞中HPV18E6mRNA表达水平为0·76±0·28,明显低于对照组转染脂质体者(1·14±0·45)和转染pSUPER质粒者(1·12±0·23,P<0·05);HeLa细胞中HPV18E6蛋白阳性表达强度较对照组转染脂质体者弱。实验组转染pE6-2shRNA质粒的HeLa细胞中HPV18E6mRNA和蛋白表达水平分别与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0·05)。结论稳定转染表达HPV18E6shRNA的质粒后,宫颈癌细胞中HPV18E6mRNA和蛋白表达明显受到抑制。