三种IBV检测方法比较研究

IBV属于冠状病毒γ群,可引起鸡呼吸道疾病,对IBV诊断方法研究广泛,建立多种方法,而噬菌体展示技术广泛用于蛋白质研究中。使用分子生物学技术和噬菌体展示技术筛选到能与IBV S1蛋白特异性结合噬菌体建立三种IBV检测方法,Real-Time PCR、RT-PCR和噬菌体ELISA。结果表明,三种方法都可有效检测出传染性支气管炎病毒(IBV),证明三种方法可靠性,对这三种方法的灵敏性进行比较,敏感性上实时Real-Time PCR法最敏感,依次为RT-PCR和噬菌体ELISA技术,检测极限分别为7.64×101、7.64×103、1.21×105copies·μL-1,证明筛选的IBV S1蛋白特异性亲和噬菌体可用于IBV病毒诊断,具有较高特异性和敏感性,为IBV诊断提供新方法。Real-Time PCR、RT-PCR和噬菌体ELISA三种方法各具特点,可满足不同检测需要。

鸡堆型艾美耳球虫Hsp90克隆表达及其核酸疫苗的免疫保护作用

利用RT-PCR方法从鸡堆型艾美耳球虫(E.acervulina)子孢子中成功克隆热休克蛋白90(Hsp90)基因,并构建其原核和真核表达质粒pET30a-Hsp90和pVAX-Hsp90。重组表达的89 kD可溶蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,间接ELISA和Western-Blot表明,其反应性和特异性良好。真核表达质粒pVAX-Hsp90体外瞬时转染间接免疫荧光检测可见成功表达。雏鸡真核表达质粒免疫后进行攻虫保护试验,结果表明,pVAX-Hsp90组较空载体组及PBS组增重极明显(P<0.01),且肠道病变减轻,OPG减少,抗球虫指数为166.17。综上初步评价了Hsp90核酸疫苗的免疫保护作用,表明Hsp90是一种潜在的鸡球虫保护性抗原。

家禽养殖现状及禽用疫苗企业发展探讨

近年来在我国养殖业飞速变更的形势下,禽产品消费逐渐上升,人们生活中对于食品质量的要求也在不断提升。作为家禽健康的第一道防线,禽用疫苗企业肩负着保证禽产品质量安全的重任。本文分析了家禽养殖现状及禽用疫苗企业如何应对当前形势,提出发展建议,以期为禽用疫苗企业提供一定的参考。

一例肉鸡渗出性皮炎的诊治

2015年7月份某肉鸡场肉鸡出现以翅下皮肤有渗出性炎症和急性死亡为主要临床表现的病例,通过临床诊断及病原学诊断确诊为葡萄球菌感染引起的渗出性皮炎,经药敏试验确定分离菌对头孢氨苄、环丙沙星、甲磺酸培氟沙星、卡那霉素、庆大霉素等高度敏感,因此选用环丙沙星和甲磺酸培氟沙星连续治疗4 d,有效地控制了病情。

A型产气荚膜梭菌重组α毒素对小鼠的致病性研究

为了研究A型产气荚膜梭菌α毒素(PLC)的致病性,采用PCR扩增编码产气荚膜梭菌α毒素去除信号肽的plc基因片段,构建重组质粒pGEX-plc,经IPTG诱导表达获得重组蛋白PLC。对纯化鉴定后的PLC蛋白进行细胞毒性试验,结果显示,感染后第4小时Hela细胞开始出现病变,并随时间延长而逐渐严重,说明α毒素对Hela细胞有毒性作用。进一步建立小鼠病理模型,重组PLC蛋白接种组与阳性细菌感染组的病理变化显示,小鼠发病迅速,腹部膨大,肠道臌气明显;组织学观察结果显示,被感染小鼠内脏器官出现不同程度的病理变化,以小肠各段尤为明显,表现为肠黏膜损伤、绒毛脱落等。上述结果为A型产气荚膜梭菌致病机制的研究奠定了基础。