心房颤动与窦性心律的风湿性心脏瓣膜病病人左心耳长链非编码RNA表达差异研究

目的:探讨风湿性心脏瓣膜病合并慢性心房颤动或窦性心律病人左心耳长链非编码RNA(lncRNAs)的表达差异。方法:选取风湿性心脏瓣膜病心房颤动病人和风湿性心脏病窦性心律病人各3例,术中取少许左心耳组织,通过高通量二代测序、基因本体(GO)富集分析、京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路显著性富集分析对lncRNAs靶基因进行生物功能分析,反向推测lncRNAs功能。结果:心房颤动组和窦性心律组比较存在差异lncRNAs共38条(P<0.05),表达上调15条,表达下调23条,心房颤动组较窦性心律组有显著性差异的mRNAs有1475条(P<0.05),表达上调635条,表达下调840条。结论:风湿性心脏瓣膜病病人左心耳中与心房颤动相关的差异表达的lncRNAs可能与心房颤动电重构、钙处理异常机制有关,且可能与代谢途径、心肌收缩、心肌细胞肾上腺素能信号传导、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路、环磷酸鸟苷(cGMP)-蛋白激酶G(PKG)信号通路、钙信号通路相关。

动脉粥样硬化进程中血脂、血流动力学指标和血管内膜的动态变化

为了建立兔高脂血症及动脉粥样硬化 (AS)斑块模型 ,观察 AS斑块形成的动态变化 ,采用高胆固醇饲料喂养法与免疫反应损伤法结合制备兔高脂血症及 AS斑块模型。将 4 5只新西兰兔分成对照组和高脂血症模型组 ,按照建模时间 4、8、12周 ,又将对照组和模型组分别分为 3组。分别于 4、8、12周 ,处死对照组和高脂血症模型组 ,测定了血脂、血流动力学指标 ,观察了血管内膜的变化。结果表明 :(1)高脂饲养 4、8、12周后模型组兔血清中的TC含量显著升高 ,TG含量在高脂饲养 8周开始有明显升高 ,HDL- C的含量比对照组 HDL- C含量要高 ,但是随造模时间有下降的趋势 ,L DL- C的含量随造模时间显著升高 ;(2 )血液黏度在高脂模型 12周时 0 .5 12 S- 1和 5 .96 S- 1下 ,与对照组比较增高显著 ,颈总动脉血流量和收缩压 (BSP)在造模时间 8、12周时比对照组有显著增加 ,而血浆黏度和血管外径随造模时间变化不明显 ;(3)石蜡切片 HE染色 ,光学显微镜下观察 ,正常对照组血管内膜光滑 ,4周模型组内膜有轻微增厚 ,有少量含脂质的泡沫细胞 ,8、12周模型组内膜均有明显增厚 ,并有多层含脂质的泡沫细胞。透射电镜观察 ,内皮下有沉积形成的脂质空泡。(4)采用免疫组化的方法鉴定了 AS斑块处平滑肌细胞源性的泡沫细胞。结果显示 :血脂不?

IL-8在兔动脉粥样硬化模型中斑块处的蛋白和基因表达

白细胞介素- 8(Interleukin- 8,IL- 8)是趋化因子CXC亚家族的一员,对中性粒细胞有趋化作用,可以诱导平滑肌细胞的增殖和迁移,是一个促血管生成因子,在动脉粥样硬化慢性炎症过程中起着重要作用。本文通过建立兔高脂血症动脉粥样硬化斑块模型,动态监测了在动脉粥样硬化发展过程中IL- 8的蛋白和基因表达,以了解IL- 8在动脉粥样硬化中的作用。采用免疫组化的方法定位IL- 8在高脂血症兔动脉粥样硬化斑块模型主动脉升弓部血管壁的蛋白表达,8、12周模型组内膜显著增厚并有明显阳性染色,半定量分析AS模型组阳性染色的面积分别是对照组的4 .4 8、8.76倍,平均积分光密度(IOD)值分别是对照组的4 .16、4 .36倍。采用双抗夹心EL ISA法测定兔血管组织匀浆液中的IL- 8蛋白表达量,8、12周AS模型组IL- 8蛋白含量与总蛋白比值和对照组比较均有显著性差异,分别是对照组的1.84、2 .0 6倍。用原位杂交的方法定位IL- 8m RNA的表达,8周模型组血管内膜有强的阳性染色,IL- 8m RNA的表达增加。本研究通过建立动脉粥样硬化模型,动态监测了整个动脉粥样硬化过程中IL-8的蛋白和基因表达。IL-

兔动脉粥样硬化斑块处单核细胞趋化蛋白-1的表达

目的了解单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant prote in-1,MCP-1)在动脉粥样硬化中的作用。方法采用免疫组化、双抗夹心ELISA和原位杂交的方法,检测MCP-1蛋白在免动脉粥样硬化斑块处的表达及定位MCP-1mRNA的表达。结果8、12周模型组内膜显著增厚并有明显阳性染色,半定量分析动脉粥样硬化模型组阳性染色的面积分别是对照组的2.04、3.32倍,平均积分光密度(IOD)值分别是对照组的2.33、3.43倍。8、12周动脉粥样硬化模型组MCP-1蛋白含量与总蛋白比值和对照组比较均有显著性差异,分别是对照组的2.90、3.58倍。8周模型组血管内膜有强的阳性染色,MCP-1 mRNA的表达增加。结论MCP-1的蛋白和基因上调主要是在高脂血症兔动脉粥样硬化模型的脂纹期。MCP-1参与动脉粥样硬化斑块的形成,主要在动脉粥样硬化的早期。

动脉粥样硬化模型中颈动脉分叉流场的数值模拟

目的实现动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)模型中颈动脉分叉流场的模拟。方法本文通过建立的动脉粥样硬化模型,连续切片HE染色后采集图像,以OLYSIA软件测定了颈动脉分叉各处的管径以及斑块的面积、周长和高度,采用Gambit软件建立了兔颈动脉分叉的正常对照和动脉粥样硬化斑块的几何模型。结果1)得到兔颈动脉分叉几何模型;2)以128 S-1下测定的血液表观粘度作为血液粘度,其对照组和动脉粥样硬化模型组血管壁面最低剪切应力分别为1.140 Pa0、.283 Pa,对照组的颈动脉分叉处血管壁面最低剪切应力是动脉粥样硬化模型组的4.028倍。结论低血管壁面剪切应力,是动脉粥样硬化的危险性血流动力学因素。

新疆白绒山羊北疆型(不含野血)生理生化血液流变学常值研究

本研究系统测试了新疆乌苏地区北疆型 (不含野血 )白绒山羊公母共 70只的生理生化血液流变学常值 ,并作了计算处理。结果表明 :新疆白绒山羊北疆型 (不含野血 )的生理指标红细胞压积、血红蛋白较其它绒山羊高 ;生化指标血清总脂、血清胆固醇、钙值较其它绒山羊高 ;新疆白绒山羊北疆型 (不含野血 )的红细胞变形性较差 ;生产性能指标产绒量与血液生理生化血液流变学指标的相关性分析表明 :HCT、RBC、血沉方程K值、P、A/G均可作为标记性状用于新疆白绒山羊北疆型 (不含野血 )的产绒量的间接选择 。

比较法在生理学教学中的应用

在生理学教学中适当地运用比较法,可以使学生清晰地分辨事物的区别和特征,培养其归纳、分析、判断、推理等能力,有助于其理解、巩固和深化所学知识,可以较好地提高教学质量。

论形成性评价与医学生自主学习能力的培养

形成性评价是对学生日常学习过程中的表现、取得的成绩以及所反映出的情感、态度、策略等方面的问题做出的发展性评价。随着医学教育改革,形成性评价因其评价体系的内容和方式与传统的终结性评价不同,其教学效果及优势日渐突显。通过对形成性评价在高等医学院校授课过程中应用现状进行讨论,探讨如何将形成性评价更加有效地应用于医学教学实践过程。对医学生来讲,大学阶段是其系统接受医学教育、全身心构建医学知识体系、着力掌握临床实践技能、集中塑造医德品质的理想阶段。在此期间,努力培养医学生自主学习的能力,使其学会学习,对于医学生适应未来意义重大。形成性评价能够提高学生的学习兴趣和自主学习能力,探讨如何在医学教学中应用形成性评价培养医学生自主学习能力。

七年制临床医学生生理学双语教学探索

鉴于英语已成为科学领域的世界通用语言,在七年制临床医学生生理学教学中尝试中英文双语教学,阐述了开展双语教学的必要性,根据实际情况探讨了双语教学中存在的问题以及体会和思考。

生理学实验教学改革的思考和探索

生理学实验教学是生理学教学过程的一个重要环节,其教学质量的提高,有助于学生对生理学理论知识的理解,有助于培养学生观察能力、分析能力、独立思考和解决问题的能力。本文就我校在生理学实验教学中所实施的一些改革的探索以及在今后的实验教学工作的一些思考做了介绍。

新疆南疆绒山羊皮肤毛囊结构研究

对新疆南疆绒山羊及其祖代父本辽宁绒山羊和母本新疆南疆土种山羊皮肤、毛囊进行观测 ,研究表明三种山羊表皮层、真皮毛囊层和真皮网状层结构基本一致 ,真皮网状层占整个皮肤厚度 75 % ,构成了皮层的主体 ;新疆南疆绒山羊毛囊密度、次级毛囊直径和S/P值大于祖代母本新疆南疆土种山羊而低于父本辽宁绒山羊 ,其值接近父本趋势大于母本 ,表明辽宁绒山羊能将毛囊密度大和S/P值高的性状稳定遗传给杂交后代。

流体切应力作用强度对内皮细胞IL-8生成的影响

血管内皮细胞衬于血管腔的表面 ,是血流机械应力的主要感受者。切应力可以直接调节内皮细胞生物活性物质的合成和分泌 ,其中包括诱导内皮细胞生成 IL- 8,而且 IL- 8的生成量与切应力作用时间有关。为阐明内皮细胞 IL- 8的生成除了与切应力的作用时间有关外还与切应力的强度有关 ,我们用不同强度的流体切应力 (2 .0 9、4 .6 1、6 .19、8.5 1、10 .5 0、12 .5 9、14 .4 1、17.2 2、18.32 dyne/ cm2 )处理培养的人脐静脉内皮细胞 ,然后采用双抗体夹心 ABC- EL ISA技术检测内皮细胞 IL - 8蛋白质的生成。结果显示 :未用切应力处理的内皮细胞只有极少量的 IL - 8蛋白质生成 ;切应力处理内皮细胞后 ,低切应力 (2 .0 9dyne/ cm2 )时 IL - 8蛋白质生成量明显增加 ,约为高切应力(18.32 dyne/ cm2 )时 IL - 8蛋白质生成量的 6 (作用 5 h)或 7倍 (作用 6 h)。 IL - 8蛋白质生成量与内皮细胞所施加的切应力强度呈反变关系 ;直线回归方程 :5 h时为 y=76 0 .12 - 36 .0 6 x,相关系数 γ=- 0 .978;6 h时为 y=781.87-36 .6 6 x,相关系数 γ=- 0 .980。式中 :y为切应力作用下内皮细胞 IL- 8的生成量 ;x为施加于内皮细胞的切应力强度 (dyne/ cm2 )。不同的切应力作用时间 (5 h、6 h)均表现出相同的 IL- 8蛋白质生成量随切?

S100A9蛋白在胃癌中的表达及其临床病理意义

目的:探讨胃癌(GC)中S100A9的表达及临床病理意义。方法:蛋白质组织学定量鉴定GC和癌旁胃黏膜(GM)组织的差异表达蛋白质;Western-blot验证蛋白S100A9的表达;免疫组织化学检测S100A9蛋白在GC、GM和原发性胃癌转移的淋巴结(LN)的表达;分析S100A9表达与GC临床病理参数的关系。结果:蛋白质组织学筛选的78个差异蛋白中,S100A9表达在GC中较正常GM中明显上调(1∶0.09),Western-blot验证S100A9蛋白在GC表达上调(P<0.01);免疫组织化学显示:70例正常GM中S100A9阳性表达23例(32.86%);118例GC中S100A9阳性表达72例(61.02%);35例LN中S100A9阳性表达29例(82.86%),与正常GM相比,GC和LN中S100A9的表达明显升高(P<0.01);S100A9在LN的GC中上调(P<0.05);S100A9表达与GC的淋巴结转移、分化程度、浸润深度和TNM分期相关(P<0.01或P<0.05),而与患者的年龄和性别无关(P>0.05)。结论:S100A9高表达与GC发生发展、侵袭转移有关,可能是GC的一个促癌因子。

流体切应力作用时间对内皮细胞IL-8生成的影响

内皮细胞对力学刺激反应敏感 ,流体切应力可以直接调节内皮细胞生物活性物质的产生。为阐明内皮细胞白细胞介素 - 8(IL- 8)蛋白质的生成受力学因素的影响 ,本文用流体切应力 (2 .0 9、4 .6 1、6 .19dyne/cm2 )处理培养的人脐静脉内皮细胞 ,然后采用双抗体夹心 ABC- EL ISA技术检测内皮细胞 IL- 8蛋白质的生成。结果显示 :未用切应力处理的内皮细胞只有极少量的 IL- 8蛋白质生成 ;切应力处理内皮细胞 1h,IL- 8蛋白质生成增加 ,处理 5 hIL- 8蛋白质生成量至最高值 ,处理 8h IL- 8蛋白质生成量下降 ,10 h后 IL- 8蛋白质维持在一个较高的水平 ;各实验组 (2 .0 9、4 .6 1、6 .19dyne/cm2 )均表现出相同的 IL- 8蛋白质随力学刺激时间的变化规律。提示流体切应力确实可以诱导内皮细胞生成 IL- 8,并且 IL- 8的生成量与切应力的作用时间有关 ,呈双相性变化。流体切应力诱导内皮细胞生成 IL- 8,可能在急性炎症或动脉粥样硬化的发生。

EA.HY926人脐静脉内皮细胞株与原代细胞生物特性的比较研究

目的比较培养EA.HY926人脐静脉内皮细胞株与原代脐静脉内皮细胞(HUVECs)的优缺点及生物学特性。方法通过倒置显微镜、透射电镜形态学鉴定、Ⅷ因子相关抗原免疫组织化学检查及生长曲线测定,比较2种脐静脉内皮细胞的形态、生长曲线等差异。结果透射电镜观察到原代HUVECs中发现较多WebelPalade小体,而EA.HY926细胞株较少见。免疫组织化学染色Image-Pro Plus 6.0软件进行分析EA.HY926人脐静脉内皮细胞株与原代HUVECs平均光密度值分别为(2 234.02±78.78)、(4 138.80±594.01)。原代HUVECs的染色程度明显较EA.HY926细胞株高,差异有统计学意义(P<0.01)。EA.HY926人脐静脉内皮细胞株生长曲线较原代HUVECs稳定。结论培养原代HUVECs耗时长,生长期较短,易出现杂细胞的污染,细胞的增殖能力有限,花费昂贵。EA.HY926细胞株虽生物特性较差,但其操作简便,具有一定程度的原代HUVECs所具有的生物特性,细胞均一以及增长旺盛,可用于较复杂、细胞创伤较大的体外内皮细胞的研究。

新疆南疆绒山羊生理生化血液流变学常值研究

新疆南疆绒山羊是经过 2 0多年培育而成的绒山羊新品种 ,其育成环境恶劣 ,而生产性能较为优良。1999年 6 - 7月在阿克苏地区山羊研究中心的支持下 ,我们在新疆南疆绒山羊育种中心———白虎台 ,对新疆南疆绒山羊进行了生理生化血液流变学常值测定 ,并对这些数据进行了处理 ,可供畜牧。

ERK1/2信号转导途径在低切应力上调人脐静脉内皮细胞IL-8基因表达中的作用

血管内皮细胞位于血流和血管壁之间,除受化学因素的调节外还受力学因素的影响。切应力可通过刺激相应的力学感受系统来调节内皮细胞某些基因的表达,其中包括诱导内皮细胞表达IL- 8。为了阐明MAPK信号途径中的ERK1/ 2信号通路是否参与调控低切应力上调人脐静脉内皮细胞IL- 8基因表达,采用Western blot分析了低切应力(4.2 0 dyne/ cm2 )处理不同时间内皮细胞ERK1/ 2的磷酸化水平及TPK抑制剂Genistein,MEK抑制剂PD980 5 9对其磷酸化的影响;采用定量RT- PCR检测内皮细胞经低切应力刺激或给予阻断剂后再行切应力刺激等处理后IL- 8基因的表达。结果显示:(1)低切应力处理可引起内皮细胞ERK1/ 2蛋白磷酸化水平上调,其磷酸化水平与切应力作用时间有关,具有快速、双向性的特点(在刺激10 min时达到高峰,2 h左右降至未刺激水平) ,阻断剂Genistein和PD980 5 9处理后,ERK1/ 2磷酸化水平与低切应力刺激10 min比较明显降低;(2 )阻断剂Genistein,PD980 5 9可显著抑制低切应力所致的内皮细胞IL- 8m RNA上调。结果表明低切应力可通过ERK1/ 2信号途径上调人脐静脉内皮细胞IL- 8基因的表达。

ANXA2和ANXA4在胃腺癌中的表达及临床意义

目的:研究膜联蛋白A2(AnnexinA2,ANXA2)、膜联蛋白A4(AnnexinA4,ANXA4)在人体胃腺癌(gastric adenocarcinoma cells,GAC)的表达,探讨其表达与GAC生物学行为的关系及两种蛋白的相关性.方法:免疫组织化学SP法检测组织芯片中75对配对的GAC和其相应癌旁组织ANXA2和ANXA4的表达.结果:在GAC和癌旁组织中ANXA2、ANXA4的表达分别为:33.1%(25)vs1.3%(1)、68.0%(51)vs25.5%(13),二者在GAC的表达显著高于癌旁组织(x2=24.448,P=0.000;x2=39.353,P=0.000);ANXA2和ANXA4在GAC表达呈正相关(r=0.335,P=0.003);两种蛋白的表达与GAC的浸润深度、淋巴结转移、TNM分期和分化程度有关(P<0.05),与年龄、性别和远处转移无关(P>0.05);肿瘤大小与ANXA2表达有关(P<0.01),与ANXA4表达无关(P>0.05).结论:ANXA2和ANXA4的表达上调可能共同参与了GAC的发生、发展、浸润和转移,可作为临床预测GAC预后的标志物和治疗靶点.

miR-542-5p对1-磷酸鞘氨醇诱导的IEC-6细胞增殖的抑制作用

目的:观察miR-542-5p对1-磷酸鞘氨醇(S1P)诱导的大鼠小肠隐窝上皮IEC-6细胞增殖的影响。方法:建立稳定表达鞘氨醇激酶1(SphK1)的IEC-6细胞系(SphK1-IEC-C1和SphK1-IEC-C2),Western blot检测SphK1蛋白表达,放射性同位素示踪法测定SphK1酶活性和S1P分泌,细胞计数绘制生长曲线观察细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期变化,实时荧光定量PCR检测miR-542-5p表达。结果:与对照细胞相比,细胞系SphK1-IECC1和SphK1-IEC-C2中SphK1蛋白表达显著升高,SphK1酶活性升高,细胞内外S1P浓度升高,细胞生长速度加快,细胞周期中S期细胞所占比例升高,miR-542-5p的表达量降低;在IEC-6细胞的培养液中加入S1P(0.5~10μmol/L),能显著抑制miR-542-5p表达;采用siRNA干扰降低IEC-6细胞的SphK1,可明显升高miR-542-5p表达。升高SphK1-IEC-C1和SphK1-IEC-C2细胞中miR-542-5p水平,则可降低S期细胞比例,抑制细胞增殖。结论:S1P通过降低IEC-6细胞中miR-542-5p水平,引起细胞周期由G1期向S期转换,促进IEC-6细胞增殖。