混合溶剂萃取-碱溶结晶法提取高纯辣椒素

以辣椒精为原料,用混合溶剂萃取,浓缩后得纯度约为60%的辣椒素粗品,将该粗品溶于碱液,调整溶液的pH使之结晶,可得高纯辣椒素。考察了碱的用量、溶液的pH以及结晶时间等因素,实验表明:m(辣椒精)∶V(1w%NaOH溶液)为1g∶2.5mL、溶液的pH为10～11、结晶时间为24h,所得辣椒素纯度高于96%,收率可达45%。

碳源对克氏菌合成PTT原料PDO的影响及对DhaB的表达调控

为提高1,3-丙二醇(PDO)产量,加快聚对苯二甲酸丙二醇酯(PTT)的产业化应用,考察了不同碳源对克雷伯氏菌合成PDO过程中碳流的影响和对关键酶DhaB的表达调控。结果表明:克雷伯氏菌不能直接利用葡萄糖合成PDO;以甘油为单一碳源时,PDO的产量仅为9 g/L,同时细胞生长受到一定抑制;而在甘油为底物的情况下,添加5 g/L的葡萄糖能够使菌体生物量提高66.7%,DhaB的转录上调20%,DhaB酶活提高64%,同时PDO产量提高1.5倍。可以认为混合碳源策略能够激活克雷伯氏菌PDO合成途径关键酶DhaB的表达,提高PDO的产量。

唐德链霉菌产尼可霉素Z的菌种生长特性及发酵液预处理条件优化

目的 以唐德链霉菌为生产菌株,进行微生物发酵生产尼可霉素Z,研究该菌种生长特性和发酵料液预处理条件。方法 通过微生物发酵培养,摸索菌种生长和发酵特性。对发酵料液进行不同pH调节,采用不同溶剂进行萃取,得到发酵液预处理条件,并通过高效液相色谱法进行含量检测。结果 唐德链霉菌单菌落平板以采用无微量元素的ISP2培养基,平板pH控制在7.0~7.5,种子培养控制在30 h为宜,前体尿嘧啶和乙酰胺能促进发酵产素。可用草酸或盐酸将发酵料液pH控制在2.0左右,用20%~50%甲醇溶液可完全萃取发酵液中的尼可霉素。结论 通过对唐德链霉菌的菌种生长特性研究,以及对其发酵产尼可霉素发酵液预处理条件的摸索为尼可霉素Z产业化大生产奠定了基础。。

克雷伯氏菌产1,3-丙二醇菌株选育及甘油脱水酶基因转录分析

通过对野生克雷伯氏菌(Klebsiella)进行紫外诱变,获得一株耐高浓度甘油及高浓度1,3-丙二醇的突变菌株A-39-3,该突变株产1,3-丙二醇的量较野生菌株提高了58%,副产物2,3-丁二醇和乙醇的量分别降低了27%和19%.为探讨突变株高产1,3-丙二醇的原因,通过对突变菌株发酵过程中关键酶的酶活跟踪分析,发现1,3-丙二醇氧化还原酶(PDOR)的酶活力与野生菌株相差不大,甘油脱氢酶(GDH)的酶活力略有下降,而突变菌株的甘油脱水酶(GDHt)的酶活力明显高于野生菌株.并采用半定量RT-PCR方法,从转录水平上比较甘油脱水酶基因的差异,结果发现突变菌株A-39-3甘油脱水酶基因的相对mRNA转录水平是野生菌株K的2.58倍,分析说明该突变株1,3-丙二醇产量的提高与关键酶基因dhaB的mRNA转录水平关系密切.