IL-4/IL-10诱导的树突状细胞对类风湿性关节炎的作用

目的:探讨经IL-4/IL-10诱导的树突状细胞(DC)对类风湿性关节炎的作用。方法:用Percoll分层离心法从脾脏细胞分离得到DC后,用IL-4或IL-10或IL-4+IL-10进行诱导。用未经诱导和诱导过的DC对类风湿性关节炎大鼠模型进行干扰。SD鼠设为CIA模型组,DC对照组与DC试验组。用ELISA法检测细胞因子与抗体水平,用MTT法检测细胞增殖情况,对鼠爪关节行病理学检测。结果:DC对照组的临床症状评分,病理改变评分,细胞增殖能力,血清中抗胶原抗体及细胞因子水平与CIA模型组的差异无统计学意义。试验组中,注射IL-10-DC能改善CIA鼠的滑膜炎症情况;在初次免疫后第5天注射IL-4-DC能减轻CIA鼠的滑膜炎程度;注射IL-4+IL-10-DC无明显的保护作用。结论:适时注射IL-4或IL-10诱导的DC,对实验性类风湿性关节炎具有保护作用。

系统性红斑狼疮患者血浆降低间充质干细胞对B淋巴细胞的抑制作用

目的研究系统性红斑狼疮(SLE)患者血浆对健康人骨髓来源的间充质干细胞(MSCs)免疫抑制作用的影响。方法采用SLE患者富集血浆替代胎牛血清,共培养MSCs与SLE患者的B淋巴细胞,检测MSCs对B淋巴细胞增殖能力与成熟的影响。设置胎牛血清作为对照组。数据采用SPSS12.0软件进行学生t检验统计学分析,P<0.05认为差异有统计学意义。结果正常MSCs能抑制脂多糖刺激的SLE患者来源B细胞增殖,降低B细胞表面表达的CD27与CD38。SLE患者富集血浆能抵制MSC对B淋巴细胞增殖与成熟的抑制作用。结论正常MSCs能抑制SLE患者B淋巴细胞增殖与成熟,改变B淋巴细胞亚群所占比例。SLE患者血清能抑制MSCs对B淋巴细胞的免疫抑制作用,或将负向影响间充质干细胞对SLE的疗效。联合应用双膜过滤血浆置换术,有望提高间充质干细胞移植对SLE的疗效。

纳米递送系统在肿瘤免疫治疗中的应用

免疫疗法已成为治疗癌症的有力临床策略。免疫治疗药物批准的数量一直在增加,在临床和临床前开发中出现了许多治疗方法。然而,广泛实施癌症免疫疗法的一个关键挑战仍然是免疫系统的受控调节,因为这些疗法具有严重的副作用,包括自身免疫和非特异性炎症。先进的生物材料和药物输送系统,例如纳米颗粒和使用T细胞进行治疗,可以有效地利用免疫疗法并提高其效力,同时减少毒副作用。在这里,我们讨论了这些研究进展,以及将纳米递送技术运用于肿瘤免疫治疗中机遇与挑战以及应用,以改善肿瘤免疫治疗的不足。

pIRES-骨形态发生蛋白2质粒转染大鼠骨髓间充质干细胞后的持续表达

背景:重组人骨形态发生蛋白2已被广泛应用于骨组织工程治疗骨缺损或骨不连,但是直接应用外源性骨形态发生蛋白2修复骨缺损效果不理想。目的:观察转染pIRES-骨形态发生蛋白2的大鼠骨髓间充质干细胞持续合成并分泌骨形态发生蛋白2的情况。方法:全骨髓贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,脂质体介导下将真核表达质粒pIRES-骨形态发生蛋白2导入大鼠骨髓间充质干细胞。结果与结论:ELISA结果显示,随着pIRES-骨形态发生蛋白2转染时间的延长,大鼠骨髓间充质干细胞分泌的骨形态发生蛋白2逐渐增多,至转染后10～12d达高峰,转染后15d,仍可见较多骨形态发生蛋白2的表达。说明转染pIRES-骨形态发生蛋白2的大鼠骨髓间充质干细胞可持续稳定分泌骨形态发生蛋白2。

贵州地区575例男性不育症患者染色体核型分析及Y染色体AZF微缺失情况观察

目的观察贵州地区男性不育症患者染色体核型异常、Y染色体精子生成基因(AZF)微缺失情况。方法贵州地区男性不育症患者575例,采用染色体G显带操作技术进行染色体核型分析,PCR与琼脂糖凝胶电泳、实时荧光定量PCR检测Y染色体AZF的相关序列标签位点。结果 575例不育症患者中,染色体核型异常率为10.6%(61/575),最常见类型为47,XXY、占80.33%(49/61)。Y染色体AZF微缺失发生率为7.13%(41/575),最常见类型为仅AZFc缺失、占43.34%(19/41)。结论贵州地区男性不育症患者染色体核型异常及Y染色体AZF微缺失发生率较高,染色体核型及Y染色体AZF微缺失联合检测有助于男性不育症原因的发现,也有助于本病的诊断及治疗。

间充质干细胞对系统性红斑狼疮T淋巴细胞的免疫调节作用

目的研究正常健康捐献者骨髓来源的间充质干细胞(MSC)对系统性红斑狼疮(SLE)患者来源的T淋巴细胞的免疫调节作用。方法共培养MSC与正常对照或SLE患者来源的T淋巴细胞,检测MSC对T细胞的作用,包含T细胞增殖能力,细胞表型及其产生的细胞因子等。实验分为健康对照组(C组)与SLE组(S组)。每一大组又分为T细胞组(C1组、S1组)、T细胞+植物血凝素组(C2组、S2组)、T细胞+植物血凝素+MSC组(C3组、S3组)。结果 MSC能抑制SLE患者来源的T淋巴细胞增殖[S2:(2 615.7±582.3)cpm;S3:(784.7±417.5)cpm;P<0.05],促使SLE T细胞向调节性CD4+CD25+Foxp3+T细胞转化增加(S2:11.85%±1.99%;S3:24.17%±5.82%,P<0.05)。MSC还能促使SLE T细胞分泌IFN-γ[S2:(14.13±11.16)pg/ml;S3:(39.68±26.73)pg/ml,P<0.05]与IL-10[S2:(5.09±2.96)pg/ml;S3:(17.15±3.61)pg/ml,P<0.05]。结论 MSC能抑制SLE患者来源的T细胞增殖,促进T细胞向调节性T细胞转化,诱导免疫耐受,有望成为治疗SLE的细胞疗法。

Snail1/IGF-1信号通路介导高糖诱导的肾小管上皮细胞EMT

目的:观察高糖诱导大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E中锌指转录因子Snail1和胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)的表达变化,并初步探讨Snail1与IGF-1在糖尿病肾脏病(diabetic kidney disease,DKD)上皮-间充质转化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)过程中的关系。方法:高糖培养大鼠近端肾小管上皮细胞系NRK-52E 72 h后,给予Snail1 siRNA和IGF-1 siRNA处理,分为高糖组、non-targeting(NT)siRNA组、Snail1 RNAi组和IGF-1 RNAi组,并设置对照组。于转染后48和72 h两个时点收获细胞。分别用实时荧光定量PCR检测细胞Snail1、IGF-1、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的mRNA表达,用免疫荧光方法检测各蛋白的表达。结果:高糖诱导NRK-52E细胞E-cadherin的mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.01),FN的mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.01);同时,Snail1和IGF-1的mRNA和蛋白表达也明显升高(P<0.01)。Snail1 RNAi组与高糖组比较,细胞中E-cadherin的mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.01),FN、Snail1和IGF-1的mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.01),Snail1的mRNA表达减少62.8%。与高糖组比较,IGF-1 RNAi组细胞IGF-1的mRNA表达减少61.1%,E-cadherin的mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.01),FN的mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.01)。NT组E-cadherin、FN、Snail1及IGF-1的mRNA和蛋白表达与高糖组比较差异无统计学显著性。Pearson相关性分析显示,NRK-52E细胞中Snail1与IGF-1蛋白的表达呈显著正相关(r=0.852,P<0.01)。结论:Snail1及IGF-1的mRNA和蛋白在高糖诱导的肾小管上皮细胞EMT过程中表达升高,且沉默Snail1基因,IGF-1表达随之减少,提示Snail1/IGF-1可能促进DKD时肾小管上皮细胞EMT。

白杨素抑制核因子κB受体活化因子配体诱导的小鼠破骨细胞生成

背景:白杨素存在于多种天然植物提取物的黄酮醇类化合物,具有广泛的治疗作用并且参与机体内的炎症反应,而炎症反应可增强破骨细胞生成从而导致骨侵蚀。目的:探究白杨素在炎症环境和非炎症环境下对破骨细胞分化的影响以及对骨侵蚀的保护作用。方法:选择RAW264.7细胞为种子细胞,首先,通过核因子κB受体活化因子配体(50μg/L)、巨噬细胞集落刺激因子(25μg/L)将细胞诱导分化为破骨细胞后,以0,20,40,60μg/L白杨素干预。其次,通过脂多糖模拟炎症环境,并将RAW264.7细胞在脂多糖诱导的炎症环境下诱导分化为破骨细胞,观察0,20,40,60μg/L白杨素在炎症环境下对破骨细胞分化的影响。结果与结论:(1)白杨素有效抑制破骨细胞分化,在60μg/L时抑制效果达到最大;(2)白杨素显著抑制了破骨细胞的骨吸收功能,提示白杨素对破骨细胞造成的骨侵蚀具有保护作用;(3)白杨素通过核因子κB信号通路,抑制多种破骨细胞分化关键蛋白和基因表达;(4)白杨素对炎症有明显的抑制作用,并对炎症环境导致的破骨细胞分化有强烈的抑制作用。

二甲双胍改善自发性2型糖尿病KKAy小鼠胰岛β细胞功能机制初探

目的:探讨二甲双胍改善自发性2型糖尿病KKAy小鼠胰岛β细胞功能的机制。方法:自发性2型糖尿病KKAy小鼠随机分为模型组与二甲双胍组,以ICR小鼠作为正常对照组,二甲双胍组连续灌胃给药46 d,模型组和正常对照组小鼠给予相同剂量蒸馏水灌胃;给药期间用口服糖耐量实验(OGTT)检测葡萄糖耐量,给药后处死小鼠,检测血清胰岛素水平及血浆脂质水平,计算胰岛素敏感指数(ISI)及胰岛素抵抗指数(HOMAIR),检测胰腺中脂质代谢及内质网应激相关因子的mRNA及蛋白水平变化。结果:与模型组相比,二甲双胍可显著降低给予糖负荷后30,60 min时的血糖(P<0.001),减少血糖时间曲线下面积(P<0.001);同时,二甲双胍组血清胰岛素水平显著降低(P<0.001),ISI显著增加(P<0.01),HOMA-IR显著降低(P<0.001);血中甘油三酯与游离脂肪酸水平显著降低(P<0.05,P<0.01);二甲双胍组胰腺中SREBP2、AMPK及PPARγmRNA表达水平较模型组显著增加(P<0.05,P<0.01,P<0.001);内质网应激相关蛋白ATF4与CHOP表达较模型组显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论:二甲双胍可能通过影响2型糖尿病KKAy小鼠的能量代谢与脂质代谢过程、缓解了胰腺细胞的内质网应激状态,改善胰岛β细胞功能。

基于生物信息学方法筛选结肠癌进展相关的枢纽基因

目的利用生物信息学方法筛选结肠癌进展相关的差异表达基因(DEGs)。方法从GEO数据库下载GSE127069、GSE145626数据集,运用GEO在线分析工具GEO2R提取这两个数据集的原始数据,利用韦恩图在线分析工具筛选DEGs。利用基因功能注释在线工具DAVID对DEGs进行GO功能注释和KEGG通路富集分析;将获得的DEGs数据导入STRING数据库构建PPI网络,并通过CytoHubba插件筛选枢纽基因;利用GEPIA数据库验证枢纽基因在结肠癌组织与癌旁组织中的表达差异。结果经GEO2R筛选,共从GSE127069、GSE145626数据集中获得DEGs 142个,其中表达上调基因35个、表达下调基因107个。GO功能注释发现,这些DEGs的生物学过程主要涉及细胞外基质降解、氧化还原过程、细胞黏附,分子功能主要涉及钙离子结合、碳酸盐脱水酶活性,细胞组分主要涉及胞外区域、膜的组成;KEGG通路富集分析显示,筛选获得的DEGs主要涉及PI3K-Akt通路和代谢途径通路。通过CytoHubba插件筛选PPI网络中相互作用排名前10位的DEGs作为枢纽基因,分别为IL-6、GCG、SLC26A3、TIMP1、SPP1、TMIGD1、MYC、MMP3、MMP1、SLC9A2。结肠癌组织GCG、TMIGD1表达低于癌旁组织,TIMP1、SPP1、MYC、MMP3、MMP1表达高于癌旁组织(P均<0.05);而结肠癌组织与癌旁组织IL-6、SLC26A3、SLC9A2表达比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论本研究共筛选出10个与结肠癌进展相关的枢纽基因,分别为IL-6、GCG、SLC26A3、TIMP1、SPP1、TMIGD1、MYC、MMP3、MMP1、SLC9A2。

三种新兴的免疫检查点分子在肿瘤免疫治疗中的研究进展

免疫检查点作为体内的“刹车分子”,与肿瘤的增殖、侵袭、转移及患者预后评估紧密相关,是良好的肿瘤治疗靶点。现有的免疫检查点阻断剂在非小细胞肺癌、黑色素瘤等恶性肿瘤上表现出较好疗效,但随之而来的免疫治疗相关不良反应也很突出。因此,寻找新的免疫检查点分子成为近年的研究热点。B7族同源体3(B7 Homolog 3,B7-H3)、T细胞免疫球蛋白和ITIM域(T cell immunoglobulin and ITIM domain,TIGIT)、肿瘤坏死因子受体2(tumor necrosis factor receptor 2,TNFR2)作为新兴的免疫检查点分子在肿瘤免疫治疗领域备受瞩目,本文将对其分子特性及相关研究进展进行综述。

政策执行理论视角下贵州远程医疗服务运行机制研究

目的:基于政策执行理论,探讨贵州远程医疗服务运行机制存在的问题,并给出优化建议,以期为贵州远程医疗政策制定提供一定参考借鉴。方法:运用史密斯政策执行过程模型,对贵州远程医疗服务运行机制进行分析。结果:贵州远程医疗运行机制在政策理想程度、执行机构、目标群体和执行环境因素等方面均存在一定不足。结论:探索机制优化的对策措施,包括进一步优化政策设计、增强执行机构间联动协调、加强宣传促进目标群体行为转变及完善政策执行环境保障。

基于SWOT分析的综合医院科研信息化管理研究

本研究通过文献分析、调查分析了解掌握目前综合性医院科研管理信息化建设现状后建立SWOT理论模型,运用SWOT分析法探讨医院科研信息化管理的内部优势、劣势以及外部机遇与威胁,从而有针对性地为完善医院科研信息化管理提供可行性策略。

胃癌术后康复期胃肠不适症状的调查及护理对策

目的:调查胃癌术后康复期胃肠不适症状的发生情况,并提出护理对策。方法:选取2018年1月—2020年3月在北京大学肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所胃肠肿瘤中心一病区接受胃癌手术的86例患者为调查对象。通过一般人口学资料、胃癌患者生命质量测定量表(QLQ-STO22)评估患者术前、术后1个月及3个月的生活质量,对结果进行分析,评价不适症状。结果:胃癌患者在术后均出现不同程度的不适症状,术后1个月与术前对比,体重减轻、吞咽困难、进食受限、味觉改变症状加重;术后3个月与术前对比,进食受限、味觉改变、躯体形象改变加重;术后3个月与术后1个月对比,不适症状基本相同,口干及躯体形象改变较前加重,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:胃癌术后3个月患者口干、躯体形象症状较前加重,有必要采取有针对性的措施进行护理。

高迁移率族核小体结合蛋白及其应用潜能

高迁移率族核小体结合蛋白(High-mobility group nucleosome-binding proteins,HMGN)几乎存在于所有哺乳动物和多数脊椎动物的细胞核中,属于HMG蛋白家族。HMGN是现在唯一已知的特异性结合在核小体上的非组蛋白,能够改变染色质的结构、增强染色质模板的转录/复制,参与DNA复制/表达、细胞分化、器官发育及基因表达调控等细胞的生命活动。目前,HMGN包括HMGN1、HMGN2、HMGN3、HMGN4和HMGN5。研究显示,HMGN1据其所在位置的不同,有着截然不同的功能。在细胞核内,HMGN1作为一种特殊定位的生物蛋白,与核小体直接结合而调节基因的转录和影响染色质的结构;在细胞外环境,HMGN1通过toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)促进抗原提呈细胞(Antigen-presenting cells,APCs)的活化和补充,从而促进特定抗原免疫应答。警报素(Alarmins)是一种内源性介质,当机体受到危险信号刺激时,它能快速的释放到细胞外,招募并激活APCs增强特异性免疫和非特异性免疫反应。认识HMGN及其作用对其在多方面的应用有重要意义。

浅论科学研究对医院发展的贡献

采用文献研究法、定性分析法和定量分析法,对目前国内外部分医院科研现状进行分析,总结医院的科研现状和发展规律,分析医院科研对医院的贡献,为提高医院科研水平提供参考依据。结果表明:医院科研给医院带来的贡献包括科研产出和科研声誉;医院开展科研,在SCI发文量和专利获得量上,给医院带来了巨大的贡献;同时,良好的科研会提高医院在医院排行榜上的位置,提高医院声誉。

国内临床实验室质量管理研究现状分析

目的整理临床实验室质量管理相关文献,分析目前我国临床实验室质量管理现状,为进一步开展临床实验室质量管理研究提供借鉴和参考。方法运用文献计量分析法,以中国知网(CNKI)和万方数据库为检索对象,以临床实验室管理并含质量管理为检索主题,检索得到2000-2020年间的有效文献73篇,再结合描述性分析法对文献进行计量分析。结果自2000年以来,我国发表临床实验室质量管理方面的文献总体偏少;全国20余个省、市开展了临床实验室质量管理的研究,总体来看,发表文章区域多集中于发达地区;文献研究内容主要以理论内容为研究方向;我国临床实验室质量管理还存在不足。结论文献研究内容反映出政府对实验室质量管理的重视程度;地区经济状况是实验室质量管理水平的重要影响因素;临床实验室质量管理研究内容反映了我国实验室质量管理现状。

综合医院心理科室环境设计的优化研究

当前医院发展建设主要聚焦于技术提升、设备完善等宏观层面,医疗环境的建设等微观层面未得到足够的重视。目前仅有的医疗环境设计研究,主要聚焦于儿童类科室及医院,而当前心理疾病患者人数不断增长,导致心理科室的就医需求高速增长,心理科室医疗环境优化设计的重要性也日益凸显。基于此,本文在环境设计相关理论的指导下,将美学、生态学等知识融入其中,坚持科学安全、以人为本的原则,从标识标语、景观区域规划以及色彩设计等方面,探讨综合医院心理科诊疗环境的优化设计,旨在为心理疾病患者提供更好的就诊体验以及效果更佳的治疗。

间充质干细胞对系统性红斑狼疮B细胞的作用

目的研究健康人骨髓来源的间充质干细胞（MSCS）对系统性红斑狼疮（SLE）患者B细胞的免疫调节作用。方法共培养MSCS与健康对照或SLE患者的B细胞，检测MSCS对B细胞的作用，包含增殖能力、细胞表型、B细胞产生的抗体等。按照B细胞来源分为健康对照组（c组）与SLE组（S组），每一组又分为B细胞组（C1组、S1组）、B细胞＋脂多糖组（c2组、S2组）、B细胞＋脂多糖＋MSCS组（C3组、S3组），采用单因素方差分析或t检验进行统计分析。结果MSCS能抑制脂多糖刺激的SLE患者来源B细胞增殖[S2组：（800±417）cpm；S3组：（248±128）cpm，P〈0．05]；降低B细胞表面CD27的表达[S2组（73±12）％；S3组（37±8）％，P〈0．05]，降低B细胞表面CD38的表达[S2组（73±11）％；S3组（44±4）％，P〈0．01]；降低IgG水平[S2组（613±252）ng／ml，S3组（294±56）ng／ml，P〈0．05]及IgM水平[S2组（601±80）n∥ml，S3组（531±59）ng／ml，P〈0．05]。结论MSCS能抑制SLE患者B细胞增殖、成熟与抗体分泌，有望成为治疗该疾病的细胞疗法。

二甲双胍对高脂饮食诱导的2型糖尿病小鼠胰岛β细胞功能的改善及机制探讨

明确二甲双胍对胰岛β细胞的作用并初步考察其作用机制。高脂饮食诱导的2型糖尿病C57BL/6J小鼠,按照空腹血糖、胰岛素耐量实验中40 min时的血糖下降百分数、甘油三酯、胆固醇及体重5个指标分为模型组(model)与二甲双胍组(model+metformin,200 mg·kg^(-1)),连续灌胃给药58天。采用糖耐量实验与高葡萄糖钳夹技术检测胰岛功能,并分析胰腺中与增殖、脂质代谢及内质网应激相关因子的m RNA及蛋白含量变化。与model组相比,二甲双胍可显著降低C57小鼠体重(P<0.01)、血中甘油三酯与胆固醇水平(P<0.05);减少糖耐量实验中时间-血糖曲线下面积(P<0.05);增加C57小鼠高糖钳夹实验中稳态期葡萄糖输注速率(P<0.05);降低空腹血清胰岛素(P<0.05)。二甲双胍显著上调C57小鼠胰腺中与胰腺增殖相关的胰十二指肠同源框因子-1(Pdx-1,P<0.01)及脂质代谢相关的基因肝X受体β(Lxr-β,P<0.01)的表达。Western blot结果显示,与model组相比,二甲双胍组小鼠胰腺中PDX-1的蛋白表达显著增加(P<0.01);内质网应激相关的PERK通路中的激活转录因子4(ATF4,P<0.001)和C/EBP同源蛋白(CHOP,P<0.05)蛋白表达量也较model组显著减少。以上结果提示,二甲双胍可改善2型糖尿病C57BL/6J小鼠胰岛素分泌功能。其作用机制可能与促进胰腺增殖、改善脂质代谢并缓解胰腺内质网应激状态相关。