二氧化碳激光致小鼠角膜损伤模型的构建及损伤修复观察

目的 构建二氧化碳(CO_(2))激光致小鼠角膜损伤模型,观察照射后小鼠角膜损伤修复过程。方法 将10只C57BL/6J小鼠的20眼分为4组,用波长10.6μm、光斑直径2 mm、功率0.94 W的CO_(2)激光照射角膜中央,各组照射剂量分别为3.0 J·cm^(-2)、4.5 J·cm^(-2)、7.5 J·cm^(-2)和10.5 J·cm^(-2),对应照射时间分别为0.10 s、0.15 s、0.25 s和0.35 s。于照射后1 d通过裂隙灯显微镜、OCT和组织病理学评估角膜损伤程度,以确定构建角膜损伤模型的最佳照射剂量。随后,构建小鼠角膜损伤模型,采用相同的方法分别于照射前及照射后0 h至6个月进行角膜损伤修复观察。结果 照射剂量为3.0 J·cm^(-2)时,角膜未观察到明显损伤。照射剂量为4.5 J·cm^(-2)时,角膜中央可见灰白色损伤区,受损区角膜上皮和内皮缺失。照射剂量为7.5 J·cm^(-2)或10.5 J·cm^(-2)时,角膜损伤区为瓷白色,角膜厚度增加,角膜边缘与虹膜粘连。故选用4.5 J·cm^(-2)照射剂量的CO_(2)激光构建角膜损伤模型。该照射剂量的激光损伤后角膜迅速肿胀增厚,损伤后1 d厚度达到峰值,之后逐渐恢复,14 d时基本恢复正常。损伤早期(0 h~3 d)角膜发生了受损上皮和内皮脱落、新生上皮和内皮迁移、炎症细胞浸润与消退等过程;损伤后期(7 d~6个月)角膜逐渐恢复并趋于正常,但部分小鼠角膜存在基质增生现象。结论 照射剂量为4.5 J·cm^(-2)的CO_(2)激光可用于构建小鼠角膜损伤模型。角膜损伤后的急性反应期主要发生在损伤后3 d内。损伤后期角膜的生理结构趋于正常,但透明度未能完全恢复。