红树林沉积物聚乙烯降解菌的筛选和降解特性

【目的】探究湛江市麻章区红树林沉积物中微生物对聚乙烯(PE)塑料的降解特性,丰富红树林塑料降解菌种类。【方法】在湛江市麻章区红树林的高、中、低潮带随机选取9个样点,并采用五点采样法从红树林表层2~5 cm的沉积物中取样。将采集到的沉积物样本在以聚乙烯为唯一碳源的无机盐培养基中进行富集、分离、纯化,以筛选出能够降解PE的菌株,并通过显微形态分析、分子鉴定等方法确定其种属;通过测定生长曲线、失重率、以及分析官能团变化来验证菌株对PE塑料的降解性能。【结果与结论】从沉积物中共筛选出K1-1、K1-2和K1-3三株PE降解能力较强的菌,分别为威尼斯不动杆菌(Acinetobacter venetianus)、Pseudomonas juntendi和维德曼芽孢杆菌(Bacillus wiedmannii)。在120 d的培养周期中,这些菌株的生长曲线均呈抛物线形态。经三株菌作用后,PE表面生成羟基,并形成氨基和羟基化合物,羟基取代羰基,导致PE表观和内部结构明显改变。经120 d处理后,PE膜的失重率分别为6.42%、5.38%和5.73%,其中K1-1菌株处理后PE塑料的失重率相较于目前报道的红树林沉积物中最高降解效率菌株Bacillus gottheilii处理后塑料的失重率提升3.55%。威尼斯不动杆菌(A.venetianus)在PE塑料降解上具有一定潜力,这丰富了湛江红树林沉积物中PE降解菌的种类,为PE塑料的生物降解提供理论支持。

一株耐热珊瑚共附生真菌的鉴定及抗氧化活性的研究

珊瑚共附生真菌及其代谢产物研究活跃,产物种类多样,活性丰富,但珊瑚中的耐热真菌未见报道。对耐热珊瑚共附生真菌C21-5B进行鉴定,研究其生理学特性及代谢产物的抗氧化活性,为该菌的深入研究及利用提供依据。通过形态学观察、18S rRNA序列分析鉴定菌株;通过测量不同海精盐浓度、pH、温度条件下的菌落直径研究该菌生理特性;根据DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率测定该菌抗氧化活性;通过薄层层析和高效液相色谱分析代谢产物活性成分。珊瑚真菌C21-5B经鉴定为土曲霉(Aspergillus terreus)。生理特性研究表明,菌株C21-5B能够生长的条件:海精盐浓度0.0%~20.0%、pH值2.0~12.0、温度15~45℃;最适生长条件:海精盐浓度0.5%~3.5%、pH值6.0~8.0、温度35℃。该菌代谢产物的乙酸乙酯萃取物具有较高的抗氧化活性,DPPH和ABTS自由基的EC50分别为0.113、0.504 mg/mL。经薄层层析和高效液相色谱分析,发现该菌代谢产物的中性极性成分偏多,含有生物碱、类脂化合物、还原性物质、黄酮类物质、芳香胺类。菌株C21-5B为耐热、兼性海洋真菌,具有极强的耐酸碱能力,代谢产物种类丰富,并具有明显的抗氧化活性,具有开发利用潜力。

两种二噁英类化合物对斑马鱼肝脏MDA、SOD和GST的影响

将300条斑马鱼随机等分为10组和空白对照组。水浴染毒5 d后,采用分光光度法测定其肝组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST)的活力,研究TCDD和PCB77对斑马鱼肝脏MDA、SOD、GST的影响。结果发现,TCDD染毒5 d后,各剂量染毒组MDA含量均有所增加,其中0.2μg/L组差异显著(P<0.05),0.4μg/L和0.8μg/L剂量组差异极显著(P<0.01);各染毒组SOD活性均有所下降,其中0.2、0.4和0.8μg/L剂量组差异极显著(P<0.01);各染毒组GST活力均降低且差异极显著(P<0.01)。PCB77染毒5 d后,各剂量染毒组MDA含量均有所增加,其中0.2 mg/L组差异显著(P<0.05)、0.4 mg/L和0.8 mg/L组差异极显著(P<0.01);各剂量染毒组SOD活力均有所下降,其中0.2 mg/L组差异显著(P<0.05),0.4 mg/L和0.8 mg/L组差异极显著(P<0.01);各剂量染毒组GST活力也均有所下降,其中0.2、0.4和0.8 mg/L组差异极显著(P<0.01)。可见,一定剂量的TCDD和PCB77能分别引起MDA含量增加,使SOD和GST活力降低,对斑马鱼具有脂质过氧化作用。

食品动物兽药残留的研究进展

综述了食品动物兽药残留的现状、原因、危害和控制等最新进展。兽药残留在每个国家都存在,区别仅在于兽药残留的量不同,发达国家对食品中兽药残留的要求越来越严格。食品动物疫病防治用药、兽药添加剂的使用、动物性食品中的兽药残留及兽药或饲料添加剂中混有污染物等,成为食品动物兽药残留的主要原因。食品动物兽药残留的主要危害包括毒性作用、耐药性、激素样作用、致敏作用及生态环境毒性。应从完善动物性食品安全法律和标准体系、强化食品动物兽药残留技术体系、重视畜牧兽医工作者在食品动物生产中的主体地位、加强食品动物生产环境监管、严把饲料及添加剂关、合理使用兽药,加大兽药残留监控力度、严把屠宰检疫关,净化动物性食品市场等方面进行食品动物兽药残留的控制。

湛江东海岛文蛤模拟加工的细菌学分析

用行业标准分别对文蛤原料、清洗并热烫后和冷冻0.5h后等加工工序中文蛤细菌总数、大肠菌群数、粪大肠菌群数、副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌进行了检验。结果发现,湛江东海岛近海文蛤原料的细菌总数为(4.0±0.1)×105cfu/g,清洗并热烫和再冷冻0.5h后对细菌总数的影响不明显。文蛤原料大肠菌群数为(790.7±21.3)MPN/g,清洗并热烫后大肠菌群数明显降低至(19.4±1.3)MPN/g,再冷冻0.5h后大肠菌群数为(18.3±1.1)MPN/g。文蛤原料粪大肠菌群数为(817.5±19.8)MPN/g,清洗并热烫后粪大肠菌群数明显降低至(194.2±10.2)MPN/g,再冷冻0.5h后粪大肠菌群数为(180.6±11.3)MPN/g。文蛤原料、清洗并热烫后和再冷冻0.5h后副溶血性弧菌的检验结果均为<3MPN/g;均未检出凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌和沙门氏菌。可见湛江东海岛近海文蛤的细菌污染主要是大肠菌群和粪大肠菌群,经清洗并热烫和再冷冻0.5h处理,能明显降低大肠菌群和粪大肠菌群数量。

湛江水产品中大肠菌群的分离鉴定与分类研究

水产品中大肠菌群超标现象较为常见,为了更好地控制水产品中微生物安全,对湛江部分水产品中的大肠菌群进行分离、鉴定和分类研究。2012年11月2013年1月,从湛江地区采集及获得的55份大肠菌群阳性水产品样品中分离纯化得到65株菌,通过常规生化鉴定和VITEK2系统鉴定,最终确定63株分别属于8种大肠菌群,其中弗氏柠檬酸杆菌24株、大肠埃希氏菌14株、阴沟肠杆菌13株、肺炎克雷伯氏菌7株、其他大肠菌类型5株,分别占菌株鉴定总数的38.10%、22.22%、20.63%、11.11%、7.93%,另有2株细菌未鉴定出所属大肠菌类型。不同种类水产品均检出弗氏柠檬酸杆菌;冻罗非鱼片大肠菌群主要为弗氏柠檬酸杆菌和阴沟肠杆菌,占本样品检出菌株的77.27%;而鲜活对虾和贝类大肠菌群类型主要为弗氏柠檬酸杆菌和大肠埃希氏菌,占本类样品检出菌株的65.79%;对于冷冻水产品,均未检出大肠埃希氏菌,未经加工的水产品较加工水产品大肠菌群种类多。

狗舌草提取物的长期和蓄积毒性及特殊毒性研究

【目的】对狗舌草体积分数60%乙醇提取物的毒理学安全性进行评价。【方法】利用C57L-L小鼠,以生理盐水为阴性对照,环磷酰胺为阳性对照,进行狗舌草体积分数60%乙醇提取物的90 d长期毒性试验、30 d蓄积试验。并采用小鼠骨髓微核试验、小鼠生殖机能试验和小鼠胎儿外观畸形检查,对狗舌草体积分数60%乙醇提取物的长期毒性、蓄积毒性和特殊毒性进行评价。【结果】90 d长期毒性试验未见供试小鼠临床表现、体重和病理变化异常,30 d蓄积试验未见供试小鼠死亡,给药组与阴性对照组小鼠骨髓微核率无显著差异(P>0.05);与阴性对照组相比,用药后受孕鼠的受孕率、每窝活胎数、平均胎儿重、吸收胎儿数和死胎数均无明显变化(P>0.05),供试小鼠胎儿未见明显的外观畸形(P>0.05)。【结论】狗舌草体积分数60%乙醇提取物无长期毒性,无蓄积毒性,无致突变性和致畸胎性。

多溴联苯醚对大鼠肝细胞CYP1A2依赖性MROD活性的影响

采用未成熟SD大鼠肝细胞微粒体为试验材料,以2,3,7,8-四氯-二苯基-并-二哑噁英(2,3,7,8- tetrachlorobenzo-p-dioxin,TCDD)作为参照,利用甲氧基-异酚噁脱甲基酶(methoxyresorufin-O- demethylase,MROD)竞争性抑制动力学和荧光光谱法分析法,测定了5种多溴联苯(polybrominated diphenyl ethers,PBDEs)对7-甲氧基-异酚噁唑脱甲基反应的影响,间接研究了这些PBDEs对CYP1A2 的竞争性抑制作用。结果表明,和TCDD相比,PBDEs对MROD活性的抑制作用较弱,亦即对CYP1A2的 竞争性抑制作用较弱。

近海沉积物DlPCBs对斑马鱼胚胎EROD和cyp1a mRNA的影响

为探究湛江近海域海洋沉积物中类二噁英多氯联苯（dioxin-like polychlorinated biphenyls,Dl PCBs）的生物学毒性效应,选取湛江近海域2个地点（近工业区TS和近生活区JSW）采集沉积物样品,制备近海域沉积物Dl PCBs提取物,将斑马鱼胚胎暴露于不同浓度的Dl PCBs提取物,测定斑马鱼胚胎7-乙氧基异吩恶唑脱乙基酶（ethoxyresorufin-O-deethylase,EROD）活性和cyp1a m RNA相对表达量。结果发现,JSW采样点Dl PCBs提取物染毒组EROD酶活性变化与TS采样点Dl PCBs提取物一致,在各染毒浓度下,斑马鱼仔鱼EROD酶活性为对照组的1.1～1.8倍。TS和JSW采样点不同浓度Dl PCBs提取物暴露斑马鱼胚胎96 h后,使斑马鱼仔鱼cyp1a m RNA相对表达量是对照组的3.36～19.45倍。说明一定浓度的近海沉积物Dl PCBs能诱导斑马鱼仔鱼EROD酶活性和cyp1a m RNA表达量升高,且呈现浓度-效应关系。

食品毒理学实验教学改革探讨

着眼于食品毒理学实践性强、实验教学要求高的特点,针对食品毒理学实验教学存在的问题,从优化与丰富实验教学内容和类型、融合多种教学方式、激发学生实验学习兴趣、吸收学生参与预实验、突出学生实际操作能力考核和实现实验教学的有效延伸等方面,进行了有益的探索。实践证明,教学改革提高了学生实验学习主动性,增强了学生实验动手能力,改善了食品毒理学实验教学的效果。

毒理学实验绿色化刍议

简述了毒理学的内涵及当前毒理学实验的污染问题。提出毒理学实验绿色化的一般概念及其对人类健康和环境保护的重要性,探讨了实现毒理学实验绿色化的主要途径。毒理学实验绿色化是指在毒理学实验与研究中,树立绿色化理念,采用先进实验方法,减少或消除毒理学实验对人类和动物健康及环境造成危害。

千里光提取物的镇痛作用及致突变性分析

将千里光全草粉用体积分数70%乙醇浸泡,经超声波-微波处理,用乙醚萃取脱色,冷冻真空干燥,制备千里光提取物冻干粉(SCE)。以对乙酰氨基酚为对照,采用醋酸扭体法和热板法研究不同剂量SCE的镇痛作用;采用骨髓微核试验研究不同剂量SCE的致突变作用。结果发现,122.72 m g/kg SCE具有显著的镇痛作用,而130.90 m g/kg SCE对雌雄小白鼠均不具有致突变作用。说明122.72-130.90 m g/kg SCE能同时满足无致突变作用和显著镇痛作用的双重条件。

一种新型抗菌肽APNT-6的溶血性和急性毒性评价

研究了一种以抗菌脂肽类物质surfactin、iturin和fengycin为主要成分的新型抗菌肽APNT-6的体外溶血和小鼠口服急性毒性,为食品应用安全性提供初步评估。将抗菌肽作100倍稀释置于兔血琼脂平板上的牛津杯中观察溶血情况;结果显示,经100倍稀释的抗菌肽在体外对血细胞有较强的溶血毒性。将60只小鼠按雌雄各半随机分成6组,分别以8、40、200、1000、5000mg每千克体重剂量的抗菌肽对小鼠进行一次性灌胃,7d内观察小鼠毒性体征并测定相关指标。结果表明,当小鼠被给予该抗菌肽5000mg/kg剂量时,观察7d无任何毒性反应,说明高剂量的抗菌肽经口服在小鼠体内不能达到有效溶血浓度,其口服半数致死剂量(LD50)大于5000mg/kg小鼠体质量,急性毒性评级属实际无毒级。根据以上结果可知,新型抗菌肽APNT-6在体外有溶血毒性但经口服对小鼠没有急性毒性作用。

对虾T-2毒素微胶囊毒饵料的制备和效果评价

T-2毒素微胶囊是制备虾毒饵料研究该毒素在对虾食品链中传递规律的前提技术,从T-2毒素微胶囊毒饵料的性状、包埋率及对虾利用率3个方面对其进行评价。采用微胶囊技术,以复合蛋白制剂为壁材,20 ng T-2毒素和对虾饲料为混合芯材,采用均质和物理加热法使复合蛋白制剂包裹混合心材,再用恒温干燥法使其硬化,形成颗粒状对虾T-2毒素微胶囊毒饵料,建立了T-2毒素微胶囊毒饵料的制备工艺。采用LC-MS/MS技术检测T-2毒素,普通毒饵料、微胶囊毒饵料抽提水样中T-2的毒素含量分别为2.661、0.654 ng/mL,微胶囊毒饵料的包埋率达96.73%,其利用率是普通毒饵料的1.7倍。研究表明T-2毒素微胶囊毒饵料可以解决对虾口服难溶于水的T-2毒素的问题,并提高了T-2毒素的利用率,为研究T-2毒素对对虾的作用提供技术支撑。

2,3,7,8-四氯二苯并二噁英和β-萘黄酮暴露对斑马鱼肝和鳃MROD酶活性的影响

为了研究2,3,7,8-四氯二苯并二噁英(TCDD)和β-萘黄酮(β-NF)对斑马鱼(Danio rerio)肝脏和鳃CYP1A依赖性7-甲氧基-3-异酚噁唑酮-脱甲基酶(MROD)活性的影响,分别利用不同浓度的TCDD(0、0.05、0.1、0.2、0.4μg·L-1)和β-NF(0、25、50、100、200μg·L-1)对斑马鱼进行水浴暴露,48h后取样测定肝脏和腮MROD活性.结果表明,与对照组比较,TCDD暴露组和β-NF暴露组斑马鱼肝脏和鳃MROD活性均显著增强(p<0.01),且MROD活性的增加与TCDD或β-NF暴露浓度呈现明显的剂量-效应关系.初步推断斑马鱼肝脏和鳃CYP1A依赖性MROD酶活性可能能够作为TCDD或β-NF污染的生物标志物.

类二噁英多氯联苯生殖毒性的研究进展

类二噁英多氯联苯(DlPCBs)作为典型的环境内分泌干扰物,会干扰接触个体或其后代的内分泌功能,破坏机体的神经系统、免疫系统,尤其对生殖系统的影响最为明显,比如对生殖器官的形态与功能、生殖内分泌、原始生殖细胞及其受精和早期胚胎发育等产生严重影响,最终导致各种生殖系统疾病的发生。DlPCBs的蓄积性及半挥发性使其在环境中分布广泛,半衰期长的特点使其将对动物及人类的生存和健康造成难以想象的影响。本文综述了DlPCBs的分类与构成、一般性质、生殖毒性以及其可能的致病机理,并对DlPCBs生殖毒性机理研究的重点方向进行了展望。

温度对季鏻盐离子液体微乳液相行为的影响

【目的】分析温度对季鏻盐离液体微乳液相行为的影响规律。【方法】以季鏻盐离子液体为非极性相,水为极性相,TX-100/正丁醇为表面活性剂,构建5种微乳液体系,绘制拟三元相图、测定流变特性。【结果】高温有利于四丁基三氟乙酸膦([P_(4444)]CF_3COO)、三丁基辛基溴化膦([P_(4448)]Br)形成微乳液,低温利于四丁基四氟硼酸膦([P_(4444)]BF_4)、三丁基辛基三氟乙酸膦([P_(4448)]CF_3COO)、三丁基辛基四氟硼酸膦([P_(4448)]BF_4)形成微乳液。其中[P_(4444)]CF_3COO和[P_(4448)]Br具有低临界溶解温度(LCST)的相转变行为,[P_(4444)]BF_4、[P_(4448)]CF_3COO和[P_(4448)]BF_4具有高临界溶解温度(UCST)的相转变行为。5种季鏻盐离子液体微乳液的黏度均随温度升高而显著下降,流体类型由假塑性流体趋向于牛顿流体。【结论】温度是影响季鏻盐离子液体微乳液相平衡的重要因素。

苦地胆内酯对嗜水气单胞菌感染斑马鱼保护效果的研究

在饲料中添加不同比例的苦地胆内酯,饲喂斑马鱼成鱼14 d后,采用创伤感染法构建斑马鱼嗜水气单胞菌感染模型,研究苦地胆内酯对嗜水气单胞菌感染斑马鱼的保护效果。结果显示:饲喂含苦地胆内酯0.4%、0.8%、1.6%饲料的斑马鱼,其存活率显著高于阳性对照组(p值<0.05);0.8%和1.6%的苦地胆内酯对斑马鱼的保护率分别为(73.91±6.52)%和(73.91±11.30)%,与0.1%恩诺沙星保护率(76.08±7.53)%相比无显著差异(p值>0.05)。一定剂量的苦地胆内酯对嗜水气单胞菌感染斑马鱼具有保护效果。

TCDD对斑马鱼脂质过氧化作用的初步研究

将150条斑马鱼随机等分为5组:2,3,7,8-四氯代二苯并二噁英(TCDD)4个染毒组(染毒剂量分别为0.1μg/L、0.2μg/L、0.4μg/L和0.8μg/L)和空白对照组,水质接触染毒5d后,采用分光光度法测定其肝组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST)的活力,研究TCDD对斑马鱼的脂质过氧化作用。结果发现,TCDD各剂量染毒组MDA含量均有所增加,其中0.2μg/L组差异显著(P<0.05),0.4μg/L和0.8μg/L剂量组差异极显著(P<0.01);各染毒组SOD活性均有所下降,其中0.2μg/L、0.4μg/L和0.8μg/L剂量组差异极显著(P<0.01);各染毒组GST活力均降低且差异极显著(P<0.01)。一定剂量的TCDD能引起MDA含量增加,使SOD和GST活力降低,对斑马鱼具有脂质过氧化作用。