黑曲霉葡萄糖氧化酶基因改造及其在毕赤酵母中的表达

为构建并筛选高效表达的葡萄糖氧化酶基因毕赤酵母工程菌株,采用PCR法从黑曲霉基因组中获得葡萄糖氧化酶全长基因(GOD),采用定点突变法和重叠PCR法获得GOD^(mut)基因,将其插入到pPICZαA中,获得重组质粒pPIC-GOD^(mut),经Pme I线性化后,用电击法转化毕赤酵母菌株X33,经大量筛选,获得1株高效分泌表达的工程菌株X33-pPIC-GOD^(mut),在此基础上,去除GOD基因的信号肽,用同样的试验方法构建并筛选高效分泌表达的工程菌株X33-pPIC-GODnew,结果表明:X33-pPIC-GOD^(mut)的产酶水平为460. 3 U/mL,X33-pPIC-GODnew的产酶水平为714. 9 U/mL,是前者的1. 52倍,该酶的最适作用温度和最适作用pH值分别为40℃和5. 0,成功获得1株高效稳定表达的葡萄糖氧化酶基因毕赤酵母工程菌株。

肿瘤细胞对TRAIL耐受机制以及克服耐受性的研究进展

TRAIL的全称是肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体,也称为APO-2L,因为TRAIL与TNF和CD95/FasL具有同源性序列,因此确定TRAIL为TNF超家族成员之一,它属于Ⅱ型跨膜蛋白。到目前为止,研究重点关注于TRAIL诱导凋亡的作用机制和产生TRAIL耐受性的过程。化学疗法或放射疗法联合应用可使对TRAIL耐受的肿瘤恢复TRAIL敏感性。本综述关注TRAIL受体诱导的凋亡信号通路、肿瘤耐受TRAIL的机制以及可能克服耐受的方法。

公共图书馆未成年人体验式阅读推广活动的实践探索——以潍坊市图书馆为例

未成年人体验式阅读推广活动为未成年人提供了分享阅读、交流心得的平台,是公共图书馆吸引未成年人参与阅读活动的重要手段。文章分析了公共图书馆开展未成年人体验式阅读推广活动的重要性,并以潍坊市图书馆为例,介绍了未成年人体验式阅读推广活动的创新实践,提出了公共图书馆只有创新未成年人阅读推广活动的内容和形式,才能有效地促进服务品质与服务效能的提升,扩大社会影响力。

枯草芽孢杆菌甘露聚糖酶基因优化及表达

研究旨在获得高效表达的枯草芽孢杆菌甘露聚糖酶基因毕赤酵母工程菌株。采用PCR方法,从枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis基因中克隆出甘露聚糖酶全长基因(WBMAN);并利用定点突变、重叠PCR的方法,获得突变型甘露聚糖酶基因;将其连接至载体pPICZαA中,获得重组质粒pPIC-WB-MANmut,用DpnI酶切重组质粒使其线性化,用电击的方法把线性化的重组质粒转入毕赤酵母(Pichiapastoris)X33中,经大量筛选,获得一株高效分泌表达甘露聚糖酶的毕赤酵母工程菌株。结果表明:在500 ml摇瓶中培养,甲醇诱导48 h发酵酶活力达到120 U/ml,最适作用温度和pH值分别是40℃和6.0。枯草芽孢杆菌甘露聚糖酶在毕赤酵母中获得了高效分泌表达,具有开发作为工业用酶的潜能。

图书馆读者活动品牌创新与可持续发展——潍坊市图书馆阅读推广案例分享

文章介绍了潍坊市图书馆读者活动品牌的创新实践,分析了潍坊市图书馆读者活动品牌的特点,提出了图书馆打造读者活动品牌的策略,以期推动读者活动的持续开展。

中西医护理维持性血液透析动-静脉内瘘110例临床观察

[目的]观察中西医护理维持性血液透析动-静脉内瘘疗效。[方法]将110例住院及门诊患者采用中西医结合术前护理、术后护理、内瘘使用期间的护理、内瘘常见并发症的观察以及治疗。连续护理15d为1疗程。观测护理疗效、不良反应。连续护理2疗程,判定疗效。[结果]痊愈71例,显效28例,有效6例,无效5例,总有效率95.45%。[结论]中西医护理维持性血液透析动-静脉内瘘效果显著,值得推广。

书香战“疫” 公共图书馆在行动——面对新冠肺炎疫情的应急服务创新

面对突然爆发的新冠肺炎疫情,我国公共图书馆担负起传播知识、陶冶情操、鼓舞士气的重要责任。国家图书馆以及全国各省、市公共图书馆充分发挥社会影响力,打响书香战“疫”,坚持“闭馆不闭网服务不打烊”,针对疫情发展趋势,多措并举开展各类特色应急服务,为坚决打赢疫情防控战做出了应有的贡献。总结了我国公共图书馆在此次战“疫”中创新服务取得的成果,提出了今后继续努力的方向。

血透室护士潜在职业危害因素分析及预防措施

随着医学的发展和社会的进步，医务人员的职业安全问题越来越受到重视，护士在临床工作中时刻面临着职业伤害，特别是血透室是一个相对密闭的环境，比其他科室的护士有更多的潜在职业危险因素。

挑战与发展:基层图书馆面对新冠肺炎疫情的服务创新——以山东省潍坊市图书馆为例

面对新冠肺炎疫情这一重大突发公共事件,基层图书馆应发扬奉献精神、增强使命担当,做好应急服务保障工作,充分发挥图书馆人在疫情防控中的社会作用。潍坊市图书馆在突发公共事件背景下,充分运用“新技术 新理念”开展特色化应急服务创新,有效管理和开展图书馆的各项业务;提出面对新冠肺炎疫情基层图书馆应急服务创新的拓展方向,为各类基层图书馆开展应急服务创新提供参考。

雪白根霉脂肪酶基因在毕赤酵母中的高效表达及其酶学性质研究

采用同源克隆法获得了雪白根霉的脂肪酶基因(rnl),将其连接到pPICZαA载体上,得到重组表达载体pPICZαA-rnl。将表达载体pPICZαA-rnl用限制性内切酶SacI线性化后,电击转入毕赤酵母X-33中。雪白根霉脂肪酶基因在毕赤酵母X-33中成功表达,重组菌株摇瓶培养144 h后,酶活可达48 U/mL。重组酶最适pH值为8.5,最适反应温度为35℃。1 mmol/L的Mn2+,Ca2+和K+以及1%的表面活性剂吐温20,吐温80,曲通100对重组脂肪酶具有激活作用。重组酶的最适底物为三月桂酸甘油酯(C12)。

“图书馆式”抗‘疫’应急服务创新实践——以新型冠状病毒肺炎疫情为例

面对突然爆发的新冠肺炎疫情,全国各级公共图书馆积极行动,以“读者需求”为根本宗旨,充分发挥公共图书馆在特殊时期的重要作用,用“图书馆式”抗‘疫’服务方式探索应急服务创新实践。从社会作用,服务方式、资源保障、人员提升等方面,提出“图书馆式”抗‘疫’应急服务创新的拓展方向和服务路径,促进公共图书馆应急服务的可持续发展。

门多萨假单胞菌Pseudomonas mendocina P10脂肪酶基因的克隆及其在酵母中的表达

采用同源克隆法获得了门多萨假单胞菌Pseudomonas mendocina P10脂肪酶基因的全长序列,DNA测序结果表明,该基因的DNA全长序列为801bp,编码267个氨基酸,推测蛋白相对分子量为29.95ku。将该脂肪酶基因连接到pPICZαA载体上得到重组表达质粒,转化Pichia pastoris X-33。脂肪酶基因在Pichia pastoris X-33中实现了分泌性表达,摇瓶发酵液上清酶活最大可达8U/mL。

动静脉内瘘术围手术期应用中药泡手护理体会

目的:探讨应用中药泡手对动静脉内瘘术围手术期的干预作用。方法:取自2008年1月—2009年10月期间本院42例血管条件差的终末期肾病患者进行内瘘术围手术期中药泡手。结果:术毕内瘘通畅率97.6%。有1例患者由于管腔极细,致手术失败,改采用人造血管建立动静脉内瘘。结论:中药泡手治疗有益于动静脉内瘘的吻合,提高动静脉内瘘的血流量,促进内瘘的成熟。

血液透析中症状性低血压的原因分析及护理

目的通过对血液透析中症状性低血压原因的分析,从而制定出相应的护理措施。方法对广东省中医院54例患者在血液透析中发生低血压的原因进行分析和总结并积极采取相应的护理措施。结果 54例低血压患者经及时抢救处理,无1例死亡。结论血液透析中症状性低血压是多因素综合作用的结果 ,针对具体病情采取相应措施,关注高发人群,可预防低血压的发生,达到预定的透析目的 ,从而延长患者的生命,提高患者的生活质量。

基层图书馆地方文献阅读推广工作探讨——以潍坊市图书馆为例

以开展地方文献阅读推广工作的重要意义为切入点,介绍潍坊市图书馆地方文献阅读推广工作实践:即通过合理布局地方文献展示区域,举办线上、线下专题展览,创建地方文献品牌,开展区域地方文献协作,多途径宣传等举措。提出了融合当前新技术、新理念的地方文献阅读推广工作新模式。

试论图书馆的特色建设

文章通过对当前图书馆形势的分析,并结合潍坊市图书馆的实际,从"建设特色馆藏、开展特色信息服务、实施特色数据库管理"三个方面,提出了图书馆要搞好特色建设、走特色建设道路的建议。

护理安全管理对血液透析室护理质量的影响分析

目的:探讨护理安全管理对血液透析室护理质量的影响分析。方法:将2014年11月-2017年11月在我院血液透析室行血透治疗的50例患者随机分为两组,对照组采用常规护理,观察组实施护理安全管理,比较两组患者的护理不良事件发生率、护理质量、医护人员满意评分。结果:观察组脱针、透析中出血、导管感染、跌倒、设备故障等不良事件发生率明显低于对照组(P <0.05);观察组护理质量评分、医生满意评分、护士满意评分均明显高于对照组(P <0.05)。结论:护理安全管理对血液透析室护理质量有重要影响,能有效规避护理不安全因素,降低护理不良事件发生率,提升整体护理质量和医护人员满意度,确保患者的血透疗效及安全,具有积极的临床意义。

营销组合策略在成人高校招生管理中的应用

随着成人高校招生形势的日益严峻,我国成人高校的招生管理部门越来越重视将教育营销的理念引入招生工作中,在招生管理中充分运用市场营销组合策略,结合成人高校职业教育市场的鲜明特点,通过研究成人高校的产品策略、学校的有形展示策略、培养学生的过程策略、学生就业及其指导策略、提高知名度的宣传策略等几方面,客观分析成人高校的营销组合并有针对性的实施营销组合策略。

坛紫菜防晒剂MAAs提取、鉴定及在化妆品体系的稳定性研究

以坛紫菜(Porphyra haitanensis)为原料,提取抗紫外辐射物质类菌胞素氨基酸(Mycosporine-like amino acids,MAAs),通过紫外可见光谱、液质联用对其进行表征,研究了化妆品体系中的各因素(pH、光照、温度、防腐剂、抗氧化剂、功能性添加剂)对MAAs化合物稳定性的影响。结果表明,坛紫菜中MAAs类化合物的种类为Shionrine和Porphyra-334;MAAs在pH 6的微酸环境中稳定性最高;紫外照射10 h能使溶液的吸光度下降94.4%;48℃高温放置56 d后吸光度下降了28.3%;48℃下添加小分子肽溶液的吸光度提高了82%,添加透明质酸溶液的吸光度提高了18.6%,能显著增强MAAs化合物的稳定性;其他常用防腐剂、抗氧化剂和功能性添加剂对MAAs的稳定性无明显影响。