高原低氧习服大鼠红细胞变形性的变化规律及其分子机制

目的:探讨高原低氧习服大鼠红细胞变形性的变化规律及其分子机制。方法:将健康雄性大鼠随机分为3组(n=10):常氧对照组、急性低氧组和低氧习服组。模拟高原低氧环境对大鼠分别进行急性低氧和间断低氧习服,麻醉后心脏采血,分别测定大鼠红细胞变形性、膜流动性、膜胆固醇和总磷脂含量、膜磷脂成分的含量、红细胞ATP酶活性、红细胞内Na+和Ca2+浓度及建立红细胞膜蛋白质双向电泳图谱,寻找差异蛋白质点,对其进行质谱鉴定。结果:①急性低氧大鼠红细胞变形性、膜流动性、膜胆固醇和总磷脂含量、红细胞ATP酶活性均降低;红细胞内Na+和Ca2+浓度均增高;红细胞膜磷脂酰丝氨酸(PS)、鞘磷脂(SM)含量增加,磷脂酰胆碱(PC)含量降低;建立了红细胞膜蛋白质双向电泳图谱,选取7个差异蛋白质点,其中4个在急性低氧后表达降低。②低氧习服大鼠红细胞变形性、膜流动性、膜胆固醇和总磷脂含量、红细胞ATP酶活性明显均增高;红细胞内Na+和Ca2+浓度均降低;红细胞膜PS、SM含量降低,PC含量增加;上述7个差异蛋白质点中4个在低氧习服后表达增高,3个表达降低,质谱技术鉴定结果为补体结合蛋白、水通道蛋白、膜攻击复合物抑制因子、葡萄糖运载体、脂质移行酶、氨基磷脂转移酶、依赖ATP的翻转酶,其中后三个酶与红细胞膜磷脂翻转有关。结论:急性低氧引起红细胞变形性、膜流动性、膜蛋白质表达、红细胞ATP酶活性及胞内Na+和Ca2+浓度方面相应的改变;经低氧习服后,上述指标有所改善,低氧习服对急性低氧引起红细胞的影响具有一定的保护作用;红细胞膜上的3种蛋白质,包括脂质移行酶、氨基磷脂转移酶和依赖ATP的翻转酶在低氧习服改善红细胞变形性的机制中可能发挥重要的作用。

新复方党参片对高原脑作业能力的影响

目的:探讨新复方党参片对高原士兵脑作业能力和睡眠质量的干预效果,为制定提高高原脑作业能力和睡眠质量方案提供依据。方法:海拔4 100 m高原士兵31人,采用自身配对设计进行试验,比较新复方党参片干预前后高原士兵的脑作业能力和睡眠质量状况。脑作业能力采用神经行为核心测试组合的数字广度、数字译码和目标追踪测试问卷进行评价;睡眠质量状况采用匹兹堡睡眠质量指数量表(PSQI)进行评价。结果:新复方党参片干预对高原士兵的数字广度测试结果无明显影响,干预前后无显著性差异(23.61±2.89 vs 23.23±3.84,P=0.539);新复方党参片干预可提高高原士兵的数字译码能力,干预前后差异有统计学意义(62.03±8.78 vs 72.90±8.08,P<0.01);新复方党参片干预可提高高原士兵的目标追踪的正确数,干预前后差异有统计学意义(119.87±17.65 vs 139.06±38.73,P<0.01);新复方党参片干预前后,高原士兵的睡眠质量状况无明显影响,差异无显著性(6.19±3.44 vs 6.61±4.05,P=0.417)。结论:新复方党参片干预可提高高原士兵脑作业能力而对睡眠质量无明显改善作用,尚需进一步扩大样本量进行深入研究。

两种不同溶解体系提取人骨髓蛋白质组双向电泳图谱的比较

目的比较两种不同溶解体系提取健康汉族成年男子骨髓蛋白质组双向电泳 (2 -di mensionalelectrophoresis ,2 -DE)图谱的差异。方法人骨髓分别用A、B两种不同的溶解体系提取蛋白质 ,以固相pH梯度 (IPG)等电聚焦为第一向 ,SDS -PAGE垂直电泳为第二向进行 2 -DE。采用ImageMaster 2DElite(Version 3.0 1)软件分析 2 -DE图谱。结果两种溶解体系提取的蛋白质样品分别获得 10 2 8± 4 2个蛋白质点和 130 0± 5 8个蛋白质点 ,其中 871个蛋白质点在两张图谱中可互相匹配 ,其余 15 7和 4 2 9个蛋白质点分别为两种溶解体系各自特有。用两种溶解体系可获得 14 5 7个蛋白质点。

蛋白质组学技术及其在高原医学中的应用

在后基因组时代 ,蛋白质组学的研究越来越受到关注。蛋白质组是指一种细胞、组织或有机体所表达的全部蛋白质 ;蛋白质组学研究技术方法主要包括双向电泳、质谱技术、蛋白质芯片技术、蛋白质复合物纯化技术、酵母双杂交系统、噬菌体显示技术、表面等离子体共振技术和生物信息学。本文对蛋白质组和蛋白质组学的概念及研究技术方法以及近年来蛋白质组学技术在高原医学领域的应用作了简要综述。

高原低氧免疫损伤及其干预措施的研究

目的:探讨高原低氧损伤免疫系统的特征及其可能机制,研究高原低氧免疫损伤的干预措施。方法:测定低氧暴露不同时间小鼠免疫器官指数、外周血和免疫器官T淋巴细胞亚群的变化;观察小鼠免疫器官淋巴细胞凋亡率及小鼠肺脏和肾脏病理学改变。采用预防给药方式,研究中药组方对低氧免疫损伤小鼠的干预作用。结果:①模拟海拔8000m低氧暴露8h后,小鼠胸腺CD4+CD8+细胞数显著下降,CD4+CD8-、CD4-CD8+细胞数显著增加(P<0.01);低氧暴露3d后,外周血CD4+细胞明显减少(P<0.05),CD4+/CD8+比值显著降低(P<0.05),胸腺CD4+CD8+细胞数进一步下降,CD4+CD8-、CD4-CD8+细胞数进一步增加,小鼠脾脏、胸腺淋巴细胞晚期凋亡和坏死率均显著增加(P<0.05);低氧暴露6d后,小鼠脾指数显著性增加(P<0.01);胸腺指数显著性降低(P<0.01),脾CD4+、CD8+细胞数显著降低(P<0.01),脾脏和胸腺淋巴细胞晚期凋亡率和坏死率进一步增加(P<0.01),活细胞率显著降低(P<0.01),脾脏淋巴细胞早期凋亡率显著增加(P<0.01)。整个低氧暴露过程中外周血CD8+无显著性变化。②新复方党参、香杞多糖、二者联合应用均能显著增加低氧免疫损伤小鼠外周血CD3+、CD4+、脾脏CD4+的细胞水平(P<0.01,P<0.05),对脾脏CD8+细胞水平没有显著影响。香杞多糖及其与新复方党参联合应用均能进一步降低胸腺CD4+CD8+,进一步增加CD4+CD8-的细胞水平(P<0.01),未见对CD4-CD8+细胞水平的影响;新复方党参对低氧免疫损伤小鼠胸腺没有显著性影响。结论:模拟海拔8000m低氧暴露后小鼠外周发挥免疫作用的淋巴细胞数减少可能与低氧暴露早期淋巴细胞凋亡率和坏死率增加和肺脏淋巴细胞分布增多有关。新复方党参和香杞多糖作为低氧免疫损伤干预措施,具有一定发展前景。

低氧对巨噬细胞分泌TNF-α和IL-6的影响及其机制

目的:观察低氧对巨噬细胞(M)前炎症因子TNF-α和IL-6分泌的影响及其机制。方法:收集分离小鼠腹腔M,建立M的低氧(1%O2,5%CO2)培养模型,并用非特异性酯酶染色法进行鉴定;ELISA法检测上清液中TNF-α和IL-6的含量;RT-PCR法检测TNF-α和IL-6的转录物水平;用Westernblot法检测M核内NF-κB的激活量;通过在培养液中加入氢化可的松(5mg/L),观察低氧时TNF-α和IL-6分泌量的变化。结果:TNF-α和IL-6分泌量在低氧12h时明显增加(P<0.01);低氧6h时,TNF-αmRNA和IL-6mRNA表达量明显高于对照组(P<0.01);M核内NF-κB的激活量在低氧2h时明显增高(P<0.05),低氧5h内持续存在;而当培养液中加入氢化可的松抑制NF-κB活性后,TNF-α和IL-6的分泌水平无明显变化。结论:低氧可通过核转录因子NF-κB途径促进细胞因子TNF-α和IL-6基因的表达和分泌。

高原致适应剂新复方党参片预防急性高原反应的效果

目的:观察高原致适应剂新复方党参片对急性高原反应(AMS)的预防效果。方法:世居平原者驻守海拔1400m3个月的45名青年男性官兵,随机分为新复方党参片组(30人)和对照组(15人),采用单盲试验方法,于行军前5d开始分别口服新复方党参片和安慰剂片,乘车行军3d,于3700m习服4d,直至进驻高原(海拔5200m)第3天后停药,共服药15d。进驻高原后第1、3、5天,依国家军用标准GJB1098-91急性高原反应的诊断和处理原则,随访记录受试者的AMS症状,然后分度评分,检测受试者的心率(HR)、血氧饱和度(SaO2)。进驻高原后第6天,检测用力肺活量(FVC)、1秒用力呼气量(FEV1.0)、FEV1.0/FVC,一秒率(FEV1%)、最大呼气中期流速(FEF25%～75%)、呼气峰流速(PEF)、最大通气量(MVV)、左右手交叉敲击动作频率总次数(Ttis)、错误次数(Etis)、正确次数(Ctis)、平均时间(Atime)和数字记忆能力试验错误记忆次数总和(Sum)。结果:与对照组比较,进驻高原后第1、3、5d,新复方党参片组AMS症状显著减轻(P<0.01);新复方党参片组与对照组的AMS程度分度分布不同(P<0.01),新复方党参片组中症状较轻的(基本无反应、轻度反应)占比重较大,而对照组中症状较重的(中度反应、重度反应)占比重较大;新复方党参片组AMS发生率明显降低;与对照组比较,新复方党参片组的FVC、FEV1.0、FEF25%～75%、PEF、MVV升高有统计学意义(P<0.05,P<0.01),FEV1%差异无统计学意义;与对照组比较,新复方党参片组的Ttis、Ctis增加(P<0.05,P<0.01),Atime减少(P<0.05),Etis和Sum差异无统计学意义。结论:新复方党参片能减轻AMS的程度,减轻AMS的症状,降低AMS发生率;并能显著改善受试者的肺通气功能和手指运动能力。

高原移居者与世居者心肺功能的比较研究

目的 :观察高原移居者与世居者心肺功能的异同 ,以探讨心肺功能在高原低氧习服-适应中的作用。方法 :在海拔 4 30 0m高原 ,以移居汉族和世居藏族青年各 2 5人为受试对象 ,用电子肺功能仪测定肺功能 (FVC、FEV1、MVV等 6项参数 ) ,用血氧饱和度仪测定血氧饱和度和心率。结果 :( 1)高原移居 1年与 2年者的用力肺活量 (FVC)分别为 ( 4 .2 8± 1.2 0 )L与 ( 4 .92±1.18)L ,1秒钟用力呼出量 (FEV1)分别为 ( 3.89± 1.0 4 )L与 ( 4 .16± 1.17)L ,最大通气量 (MVV)分别为 ( 2 88.90± 4 9.4 8)L与 ( 2 80 .36± 50 .84 )L ,都明显的低于高原世居者的 ( 17.33± 0 .90 )L、( 6.32± 1.16)L与 ( 319.76± 4 5.2 9)L。 ( 2 )高原移居者的心率明显高于高原世居者 ;移居高原 1年者的心率 ( 89.1± 7.9)b·min 1明显高于移居 2年者的心率 ( 80 .9± 11.0 )b·min 1,而后者又高于高原世居者 ( 71.2 +10 .2 )b·min 1。 ( 3)高原移居者与世居者的动脉血氧饱和度十分接近。结论 :在海拔4 30 0m停留 2年的移居者其心肺功能仍然没有达到高原世居者的水平。

低氧致脑水肿的磁共振扩散加权成像和病理观察

目的通过对模拟高原低氧致脑水肿的磁共振扩散加权成像和病理改变的研究,探讨高原脑水肿的病理基础.方法选320～380 g的雄性Wistar大鼠32只,按体重随机分为常氧组、4 000 m组、6 000 m组和8 000 m组各8只.后3组动物置于低压舱中模拟海拔4 000 m、6 000 m、8 000 m高原低氧环境持续8 h后,对所有大鼠进行扩散加权成像检查及脑组织的光镜和电镜观察.结果低氧处理的各组扩散加权成像均出现低强度信号,表观扩散常数值升高.与常氧组比较,4 000 m组表观扩散常数值的升高无明显差异,6 000 m组和8 000 m组表观扩散常数值升高有显著性差异.病理检查显示,4 000 m组脑组织呈现混合性脑水肿,血脑屏障轻度损伤;6 000 m组以血管源性脑水肿为主,血脑屏障损伤加重;8 000 m组重度血管源性脑水肿,血脑屏障破坏解体.结论低氧所致的脑水肿主要是血管源性脑水肿,其病理基础是低氧导致的血脑屏障损害.

肝癌患者单个核细胞线粒体DNA拷贝数与抗氧化能力的变化

目的:探讨肝癌患者单个核细胞(PBMC)线粒体DNA(mt DNA)拷贝数的变化及其与机体抗氧化能力的关系。方法:用Ficoll Hypaque离心法分离外周血单个核细胞(PBMC),采用实时荧光定量PCR反应,检测线粒体NADH脱氢酶亚基1(ND1)基因的拷贝数,并以核基因组的β-actin作为内参基因,比较25例肝癌患者与30例健康人外周血单个核细胞中mt DNA拷贝数的差异。流式细胞术检测单个核细胞活性氧(ROS)含量的变化。生化检测法检测血浆中总抗氧化能力(T-AOC)的变化。结果:肝癌组外周血单个核细胞ND1基因拷贝数是健康对照组的73%,表明肝癌患者外周血单个核细胞mt DNA拷贝数明显下降。肝癌组单个核细胞活性氧含量的平均荧光强度为(417.82±110.62),健康对照组为(301.82±75.54),肝癌组单个核细胞活性氧含量显著高于健康对照组(P<0.01)。肝癌组血浆总抗氧化能力(单位/毫升血浆)吸光度为(1.30±0.85),健康对照组为(3.20±1.62),肝癌组血浆总抗氧化能力显著低于健康对照组(P<0.01)。结论:肝癌患者的外周血单个核细胞线粒体DNA拷贝数减少可能与机体抗氧化水平下降有关。

低氧脑水肿大鼠脑组织VEGF和AQPs基因及蛋白表达的变化

目的:探讨低氧脑水肿时血管内皮细胞生长因子(VEGF)、水通道蛋白(AQP1和AQP4)基因和蛋白表达变化,为阐明急性低氧对脑组织的损伤及低氧脑水肿的发病机制提供实验依据。方法:Wistar大鼠随机分为4个组:常氧对照组(Control)、低氧暴露4 000 m组(4 000 m)、低氧暴露6 000 m组(6 000 m)和低氧暴露8 000 m组(8 000 m),低氧组于低压舱中模拟相应海拔高度持续暴露8 h建立低氧脑水肿模型。用干-湿重法测定脑组织水含量,常规光镜观察脑组织形态学的改变;用RT-PCR法和免疫组化法检测低氧脑水肿时大鼠脑组织VEGF、AQP1和AQP4mRNA和蛋白表达的变化。结果:①干-湿重法测定表明,低氧(≥6 000 m)暴露后,大鼠脑组织水含量明显增加(P<0.01)。②常规光镜检测结果表明,低氧暴露4 000 m时大鼠脑神经细胞、血管内皮细胞和星形胶质细胞足突轻度肿胀,组织中出现漏出液;低氧暴露6 000 m时脑血管内皮细胞和星形胶质细胞足突肿胀加重,血管与组织间隙扩大,组织中漏出液增多;低氧暴露8 000m时脑血管内皮细胞和星形胶质细胞足突重度肿胀,血管与组织间隙进一步扩大,组织中漏出液明显增多。③低氧脑水肿时,VEGF、AQP1、AQP4mRNA表达水平增高,AQP1在内皮细胞异常表达,内皮细胞VEGF和AQP1、星形胶质细胞足突AQP4蛋白质表达水平增高。结论:低氧脑水肿时,VEGF、AQP1和AQP4表达和分布的变化可能是引起血脑屏障损伤、导致低氧脑水肿的发病机制之一。

单兵供氧器对高原移居青年心率和SaO_2影响的评价

目的:探讨单兵供氧器在高原低氧环境下对高原移居青年动脉血氧饱和度(Sa O2)、心率(HR)的影响及其应用效果。方法:10名高原移居青年受试者采用单兵供氧器,鼻吸式吸氧10 min,检测吸氧前、吸氧后安静时的心率和血氧饱和度,同时观察单兵供氧器的高原现场应用情况。结果:受试者使用单兵供氧器吸氧后的心率分别为(81.80±4.47)b/min低于吸氧前的(88.80±6.55)b/min(P<0.01)。给予单兵供氧器吸氧后受试者的血氧饱和度为(93.80±1.23)%低于吸氧前的(87.40±3.69)%(P<0.01),单兵供氧器的供氧时间平均为(29.6±2.7)min,供氧连续且使用正常。结论:单兵供氧器在高原移居青年受试者中的应用效果良好,可明显降低心率和提高血氧饱和度,促进高原习服。

低氧暴露对大鼠外周血T淋巴细胞活化的影响

目的:探讨低氧暴露后大鼠外周血T淋巴细胞亚群及活化共刺激分子的变化,为干预措施的研究提供科学依据。方法:采用三色免疫荧光标记流式细胞仪分析法,观察在低氧暴露前和模拟海拔8 000 m低氧暴露8 h、3d6、d和10 d后,大鼠外周血T淋巴细胞亚群和T淋巴细胞活化共刺激分子的变化。结果:模拟海拔8 000 m低氧暴露8 h后,大鼠CD3+、CD8+、CD8+CD28-细胞数较低氧前均显著降低(P均<0.01);低氧暴露3 d后,除上述变化外,CD4+CD28+细胞数也显著降低(P<0.01),CD4+CD28-细胞数显著增加(P<0.01);低氧暴露6 d和10 d后,CD3+、CD4+呈现进一步降低趋势,CD8+CD28+细胞数显著增加(P<0.01)。结论:说明模拟海拔8 000 m低氧暴露8 h和3 d后,大鼠外周血CD8+、CD4+T淋巴细胞活化水平均显著下降,随着低氧暴露时间的延长,CD8+T淋巴细胞活化水平由降低变为增加。

新复方党参片防治高原脱习服的临床疗效

目的：研究新复方党参片对高原脱习服的防治作用。方法：驻守海拔5200 m一年的男性青年官兵43人随机分为新复方党参片组（28人）和对照组（15人）,采用单盲试验法。自返回驻地（海拔1400 m）前5 d开始分别口服新复方党参片和安慰剂片,直至返回驻地的第7天停药,共服药12 d。返回驻地的第2、4、6天,按高原脱习服症状调查表随访受试者的脱习服症状并进行症状分度评分。返回驻地的第7天,检测受试者的用力肺活量（FVC）、1秒钟用力呼气量（FEV1.0）、一秒率（FEV1.0/FVC,FEV1%）、最大呼气中期流速（FEF25%-75%）、呼气峰流速（PEF）、最大通气量（MVV）、左右手交叉敲击动作频率总次数（Ttis）和数字记忆广度顺背数测验得分（Sum）。结果：与对照组比较,返回驻地的第2、4、6天,新复方党参片组高原脱习服症状显著减轻（P〈0.01）;新复方党参片组与对照组的高原脱习服症状程度分度分布不同（P〈0.01）,新复方党参片组症状较轻的（基本无反应、轻度反应）占比重较大,而对照组中症状较重的（中度反应、重度反应）占比重较大;新复方党参片组高原脱习服发生率明显降低;新复方党参片组的FVC、FEV1.0、PEF、MVV均显著升高（P〈0.05,P〈0.01）,FEV1%和FEF25%-75%无统计学差异;新复方党参片组Ttis、Ctis显著增加（P〈0.05,P〈0.01）,平均时间（Atime）显著减少（P〈0.05）,错误次数（Etis）和Sum差异不显著。结论：新复方党参片能减轻高原脱习服的程度,减轻高原脱习服的症状,降低高原脱习服发生率;并能显著改善受试者的肺通气功能和手指运动能力,具有较好的防治高原脱习服的作用。

低氧大鼠肺动脉内皮细胞VEGF变化与PKC活性关系的探讨

目的 :探讨低氧培养大鼠肺动脉血管内皮细胞VEGF的表达变化与PKC活性的关系。方法 :培养大鼠肺动脉血管内皮细胞 ,观察低氧 (1%O2 )培养不同时间大鼠肺动脉血管内皮细胞浆、膜PKC活性和培养液中VEGF水平变化 ;加入PKC抑制剂 (staurosporine)后 ,测定低氧、常氧培养不同时间二者的变化。结果 :低氧时膜PKC活性和培养液中VEGF水平明显升高 (P <0 .0 1)。而加入PKC抑制剂后 ,常氧和低氧培养的内皮细胞浆、膜PKC活性都明显下降 (P <0 .0 1) ,相应的培养液中VEGF水平与常氧对照组比较无明显变化 (P >0 .0 5 )。结论 :低氧时PKC活性升高与VEGF表达升高有密切关系 ,PKC对低氧时VEGF的表达起正调控作用。

ATP敏感性钾通道开放剂埃他卡林对高原脱习服的影响

目的:观察长期口服埃他卡林对高原脱习服的影响。方法:该临床研究采用随机双盲安慰剂平行对照试验方法,随机分为埃他卡林试验组和安慰剂对照组,两组受试者分别为39例和17例。其中,受试者分别口服埃他卡林片(5 mg/片,1次/日)或安慰剂(1片/日),连续服用药物7个月,下山到3700 m停留2 d并停止服药,再返回到海拔1400 m的平原地区,自返回平原的第2、4、6天,进行高原脱习服症状调查,随访受试者的高原脱习服症状并进行症状评分。结果:长期驻扎在5200～5380 m高海拔地区的受试者,返回平原后第2、4、6天,分别有82.4%、52.9%、23.5%的人员产生显著的高原脱习服症状,长期口服埃他卡林,高原脱习服发生率分别为43.6%、30.8%、38.5%;安慰剂对照组返回平原后脱习服反应程度的评分,在第2、4、6天分别为(6.0±1.9)、(4.6±1.0)、(3.8±1.5)分,埃他卡林治疗组分别为(4.4±2.4)、(3.3±1.8)、(4.0±1.5)分,两组比较,在返回低海拔第2、4天,高原脱习服反应的发病率及发病程度均显著减少,第6天的数据两组之间差别无统计学意义。结论:高原地区长期口服埃他卡林可显著减轻高原脱习服的发病程度,降低高原脱习服的发生率,预防高原脱习服。

青稞发酵液化学成分鉴别及其抗缺氧效果

目的鉴别青稞发酵液的化学组成并评价其抗缺氧效果。方法按药典方法测定青稞发酵液的理化指标,分别用纸层析法和试管法定性鉴别其化学成分。将青稞发酵液干燥后用无水乙醇于室温重复提取4次,其乙醇提取物和不溶物干燥后作为试样。将小白鼠随机分为蒸馏水对照组、青稞发酵液组、乙醇提取物组和乙醇不溶物组。腹腔注射0.2 mL药液40 min后,将小鼠单个置于密闭的125 mL广口瓶中进行密闭抗缺氧实验。结果青稞发酵液中的蛋白质、糖类、有机酸、酚性物和油脂等成分均呈阳性,其中含蛋白质29.8 g.L-1,总糖133.0 g.L-1,还原糖117.0 g.L-1,总氨基酸6.4 g.L-1;乙醇提取物组存活时间延长62.5%,青稞发酵液组19.2%,乙醇不溶物组16.7%(P<0.01,P<0.05)。结论青稞发酵液含蛋白质、肽类、氨基酸、糖类、有机酸、酚性物和油脂等成分,其乙醇提取物具有较显著的抗缺氧效果。

碳酸酐酶靶向性抑制剂甲苯磺烷唑胺对机体缺氧耐力的影响

目的:探讨甲苯磺烷唑胺对提高小鼠缺氧耐力的影响及其机制。方法:将健康昆明小鼠放入缺氧装置瓶中,测定密闭缺氧存活时间;将雄性昆明小鼠放入梯形笼中,置于小动物低压舱进行减压低氧,测定小鼠减压低氧存活时间;观察小鼠组织碳酸酐酶Ⅱ(CAⅡ)活性改变。采用预防给药方式,研究碳酸酐酶靶向性抑制剂甲苯磺烷唑胺对提高低氧耐力的作用。结果:①在提高小鼠密闭缺氧耐力方面,甲苯磺烷唑胺6.25 mg/(kg·d)、12.5 mg/(kg·d)、25 mg/(kg·d)、50 mg/(kg·d)、100 mg/(kg.d)、200 mg/(kg.d)和400 mg/(kg.d)剂量组的存活时间分别为(27.38±4.63、29.53±4.43、29.67±7.28、31.55±6.34、32.45±6.65、36.81±7.24和35.41±4.20)min,与空白对照组(22.90±3.19)min比较,显著延长(P<0.05,P<0.01);与同等剂量醋氮酰胺组(24.54±3.17、22.70±3.04、22.67±2.99、23.93±0.96、27.87±5.06、30.79±5.12和35.14±6.46)min比较,存活时间明显延长;甲苯磺烷唑胺和醋氮酰胺最小有效剂量分别是6.25及100 mg/(kg·d),甲苯磺烷唑胺是醋氮酰胺效价的16倍。②在提高小鼠减压低氧耐力方面,甲苯磺烷唑胺中、高剂量组小鼠的存活时间为(24.82±3.92、28.27±5.89)min,明显长于空白对照组[(21.96±2.51)min,P<0.05];高剂量甲苯磺烷唑胺组的存活时间与醋氮酰胺组(23.11±3.71)min比较,明显延长(P<0.05)。③与正常对照组相比,甲苯磺烷唑胺25 mg/(kg·d)、50 mg/(kg·d)、100 mg/(kg.d)和200 mg/(kg·d)剂量组能显著抑制肾碳酸酐酶Ⅱ(CAⅡ)活性(P<0.05,P<0.01);甲苯磺烷唑胺100mg及200mg剂量组能显著抑制脑碳酸酐酶Ⅱ(CAⅡ)活性(P<0.05)。结论:甲苯磺烷唑胺具有提高低氧耐力作用,其效价和效能均优于醋氮酰胺,其机制可能与抑制组织碳酸酐酶活性有关。

高原世居藏族α、β珠蛋白编码基因的克隆与测序

目的:通过对高原世居藏族α、β珠蛋白编码基因的分析,探讨藏族Hb高氧亲合力的分子机制。方法:高原现场采集健康成年男性藏族人骨髓样品,提取总RNA,通过逆转录聚合酶链反应(RT PCR)获得人α和β珠蛋白的cDNA,与PGEM-TEasy质粒连接后,将α和β珠蛋白的cDNA转化JM109大肠杆菌中扩增培养,经酶切鉴定后测序,结果与NCBI数据库进行同源性比较。结果:藏族人α珠蛋白的cDNA与NCBI数据库登录的人cDNA序列相同,没有突变位点。一例藏族人β珠蛋白143位密码子发生了氧亲和力增高的碱基突变(CAC>CGC),其对应的氨基酸由His变为Arg(即HbAbruzzo)。结论:藏族人高氧亲和力变种的发现,为今后高原低氧适应相关基因的研究提供了线索。

复方党参对高原低氧大鼠脑细胞凋亡相关基因表达谱影响的分析

目的 研究复方党参对模拟高原低氧条件下大鼠脑神经细胞凋亡基因表达谱的作用 ,从中药与生物体基因网络相互作用的角度 ,探讨复方党参的作用机制。方法 将Wistar大鼠置于模拟海拔 70 0 0m的低压氧舱建立高原低氧大鼠脑细胞凋亡模型 ,于上舱前 7d开始以复方党参液灌胃给药。提取空白对照组、低氧 8d对照组、常氧复方党参组及低氧 8d复方党参组大鼠脑组织总RNA ,经逆转录合成cDNA探针 ,用 [α 3 2 P]标记探针 ,各自与AtlascDNAArray膜杂交 ,经严格的冲洗后用磷屏检cDNA表达水平。获得的基因表达谱数据集采用自组图 (SOMs)法分析。结果 结果表明在模拟高原低氧条件下 ,导致神经细胞凋亡的基因 (p5 3、bax、bad、bok、Hsp6 0 )聚为一类 (即表达行为相似 )。而具有抗凋亡功能的基因 (bcl 2、bcl xl、Hsp70、Hsp2 7、Hsp90、Hsc70、Rad)聚为一类。 结论 低氧可以启动细胞凋亡的线粒体途径 ,导致细胞死亡 ;而复方党参以凋亡相关基因网络中的多种成分为靶点 。