巴西蕉诱导的香蕉枯萎病菌1号和4号小种致病相关基因表达分析

目前对于香蕉枯萎病菌的致病分子机制尚不十分清楚。为了阐明枯萎病菌的致病分子机制,从香蕉枯萎病菌1号(Foc1)和4号小种(Foc4)的比较蛋白质组学分析发现的表达量差异较大的蛋白中,选取了9个致病相关蛋白或潜在的致病基因,利用荧光定量PCR方法进行基因表达谱分析。结果显示:与对照相比,巴西蕉处理的Foc4中,上调表达的基因有:酰胺转移酶基因(amidotransferase)、线粒体过氧化物还原酶基因(mitochondrial peroxiredoxin)、几丁质酶基因(chitinnase 1)、羧肽酶基因(carboxypeptidase cpds),差异表达不明显的有腺苷激酶基因(adenosine kinase)、NADP-依赖型甘油脱氢酶基因(NADP-dependent glycerol dehydrogenase)、磷酸甘油酸激酶基因(phosphoglycerate kinase)、谷胱甘肽还原酶基因(glutathione reductase)、酰胺酶基因(amidase family protein)。Foc1中,与对照相比,上调表达的基因有:腺苷激酶基因、NADP-依赖型甘油脱氢酶基因,下调表达的基因有:酰胺转移酶基因、羧肽酶基因。综合分析显示,酰胺转移酶、过氧化物酶、几丁质酶、羧肽酶基因可能在Foc4的致病作用中起作用。

HBV“a”决定簇准种特征是预测母婴传播免疫阻断失败风险的潜在指标

【据《Gut》2019年8月报道】题:HBV"a"决定簇准种特征是预测母婴传播免疫阻断失败风险的潜在指标-前瞻性巢式病例对照队列研究(作者Xiao Y等)随着乙型肝炎疫苗联合乙型肝炎免疫球蛋白的应用,HBV母婴传播已大为减少。但迄今母婴传播仍然是HBV新发感染的主要来源,目前全球约1/3慢性HBV感染源于母婴传播。尤其在HBV中高流行地区,育龄期女性HBsAg携带率较高,HBV母婴传播的风险增加。如我国育龄期女性中HBsAg流行率仍较高(6.0%~8.0%),40%~50%的新发HBV感染仍来源于HBV母婴传播。

HBV相关肝细胞癌患者血清N-糖组图谱改变与肝组织糖基转移酶表达变化的关系

目的本研究通过对HBV相关肝细胞癌(HCC)患者血清N-聚糖检测及肝癌组织与癌旁组织中糖基转移酶基因表达水平比较分析,探索HCC患者血清N-聚糖变化的可能机制。方法收集解放军总医院2018年—2019年HBV相关HCC手术患者(34例)的肝癌和癌旁组织及正常肝组织标本,同时采集血清标本。从34例HCC患者中随机选择8例HCC患者血清标本作为HCC试验组,20例健康成年人血清标本作为对照组。应用DSA-FACE法分析HCC试验组与对照组血清N-聚糖图谱。采用荧光定量PCR法检测34例HBV相关HCC患者癌组织和癌旁组织中8种糖基转移酶基因(FUT3、FUT4、FUT6、FUT7、FUT8、Gn-TⅢ、Gn-TⅣa和Gn-TⅤ)mRNA表达水平,并应用蛋白印迹法检测相应蛋白表达水平。计量资料两组间比较采用独立样本t检验。结果与对照相比,8例HCC患者血清中N-聚糖峰9(peak9,NA3Fb)的丰度明显升高(t=-2.514,P<0.05)。糖基转移酶FUT8、Gn-TⅣa和Gn-TⅤ基因mRNA表达水平在癌组织和癌旁组织间有差异,其中癌组织中FUT8和Gn-TⅤ基因的mRNA与蛋白表达水平显著高于癌旁组织(mRNA:1.50±0.34 vs 0.65±0.11,t=-2.354,P=0.022;3.57±0.64 vs 1.33±0.16,t=-3.384,P=0.001)(蛋白:0.70±0.11 vs 0.083±0.017,t=9.555,P=0.001;1.33±0.19 vs 0.60±0.15,t=5.097,P=0.007);癌组织中Gn-TⅣa基因的mRNA表达水平显著高于癌旁组织(mRNA:2.90±0.47 vs 1.68±0.19,t=-2.403,P=0.019),蛋白表达水平与癌旁组织无显著差异(蛋白:0.52±0.24 vs 0.24±0.11,t=1.833,P=0.141)。癌组织中这些糖基转移酶表达改变与血清中N-聚糖丰度变化一致。结论HBV相关HCC患者血清中一些N-聚糖水平变化可能与肝癌组织中糖基转移酶基因GnT-V、GnT-IVa和FUT8表达上调密切相关。

基于社区人群的慢性乙型肝炎病毒感染孕妇产前血清学及病毒学特征

目的了解中国部分地区基于社区人群的未经抗病毒治疗的乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)表面抗原(HBsAg)阳性孕妇产前HBV血清学和病毒学特点。方法该研究从广西、江苏、河南地区入组1741例HBsAg阳性孕妇。所有孕妇的临产前血清样本采用Abbott Architect i2000和Abbott Architect m2000分别检测HBV血清学标志物及HBV DNA水平;采用型特异性引物巢式聚合酶链反应(n PCR)法进行HBV基因型分型。结果 1741例HBsAg阳性孕妇中,HBeAg阳性占37.0%(645/1741),HBeAg阴性孕妇占63.0%(1096/1741)。HBeAg阳性孕妇产前HBsAg滴度、HBV DNA水平以及B基因型孕妇所占比例均高于HBeAg阴性孕妇,但年龄低于HBeAg阴性孕妇。HBeAg阳性孕妇的HBsAg滴度和HBV DNA水平呈正相关(r=0.790,P<0.001),HBeAg滴度和HBV DNA水平也呈正相关性(r=0.564,P<0.001)。而HBeAg阴性孕妇的HBsAg滴度和HBV DNA水平无相关性(r=0.020,P=0.517)。结论未经抗病毒治疗的HBsAg阳性孕妇在不同HBeAg状态下,血清HBV DNA水平及HBsAg滴度分布各不相同。对于HBeAg阳性孕妇人群,HBeAg滴度、HBsAg滴度可能成为HBV DNA水平的替代指标。

HBeAg阳性慢性HBV感染孕妇血清HBVDNA水平与HBsAg滴度的相关性及HBVPreS／S区基因变异对二者相关性的影响

目的分析e抗原（HBeAg）阳性的慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染且未经抗病毒治疗的孕妇血清HBVDNA水平与HBV表面抗原（HBsAg）滴度的相关性，并探讨PreS／S区基因突变对二者相关性的影响。方法将882例HBsAg、HBeAg和HBVDNA均阳性且未经抗病毒治疗的慢性HBV感染孕妇临产前血清样本纳入分析。分别采用雅培i2000和m2000系统定性或定量检测HBsAg、HBeAg和HBVDNA水平。采用型特异性引物巢氏聚合酶链反应（nPCR）法进行HBV基因分型。另外，匹配HBVDNA水平与HBsAg滴度具有相关性和HBVDNA水平较HBsAg滴度偏高的孕妇血清样本，用nPCR方法进行PreS／S区扩增，对PCR产物直接测序后采用MEGA6．0软件分析突变位点。计量资料采用Maim—WhitneyU检验，计数资料采用x^2检验，相关性分析采用Spearman等级相关性分析。结果HBeAg阳性慢性HBV感染孕妇血清HBsAg滴度与HBVDNA水平呈正相关（r=0．754，P〈0．01）；与对照组相比，HBVPreS区A60V（100％与15．38％，x^2=7．61，P〈0．01）、V90A（100％与30．77％，x^2=4．43，P〈0．05）和1161T位点（80．00％与0，x^2=9．14，P〈0．01）突变时HBsAg滴度明显降低。结论HBeAg阳性慢性HBV感染孕妇，血清HBVDNA水平与HBsAg滴度呈正相关，HBsAg滴度可作为HBVDNA水平的替代指标。PreS／S区A60V、V90A和1161T氨基酸位点单独或联合突变可能是导致HBsAg滴度显著下降进而影响其与HBVDNA水平相关性的原因之一。