柱前衍生/高效液相色谱-串联质谱法测定氨基酸工业品中26种游离手性氨基酸含量

采用柱前衍生/高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定氨基酸工业品中26种游离手性氨基酸含量。样品经0.1 mol/L HCl溶液溶解提取后,在碱性条件下与Marfey试剂进行衍生化反应,使用Phe⁃nomenex Kinetex F5(250 mm×5 mm,4.6μm)色谱柱,以10 mmol/L乙酸铵溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,质谱分析采用电喷雾离子源负离子(ESI-)模式和多反应监测(MRM)模式。结果表明,各氨基酸衍生物之间的分离度良好,26种手性氨基酸的质量浓度在一定范围内与对应的峰面积呈线性关系,相关系数(r^(2))不小于0.9940,定量下限为0.5~12.5 ng/mL,加标回收率为80.3%~118%,相对标准偏差为0.47%~9.8%。应用该方法对180个工业样品进行检测,在L-型氨基酸纯品试剂、L-型稳定同位素标记氨基酸内标试剂、单品L-型氨基酸原料及复合氨基酸原料粉中均检出D-氨基酸。该研究首次评估了国内相关工业产品中手性氨基酸的质量状况,发现复合氨基酸原料需加强手性构型的监测管理,并深入分析了利用相关氨基酸纯品试剂作为标准物质或同位素内标时,对食品、环境、化工、医药等领域样品检测结果准确性可能造成的影响。该方法可为科研试剂、生物制药、化工食品和营养健康等领域提供质量管理和健康评测的有效技术手段。

酶解-柱前衍生UPLC法检测特医食品中天冬酰胺及谷氨酰胺

建立酶水解-丹磺酰氯柱前衍生高效液相色谱法检测特殊医学用途配方食品(FSMP)中天冬酰胺(Asn)和谷氨酰胺(Gln)的方法。样品经灰色链霉菌蛋白酶(Pronase E)酶解后,取上清液与Dns-Cl进行柱前衍生,衍生化产物经Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离,以10 mmol/L磷酸氢二钠溶液(pH 6.5)和甲醇作为流动相进行梯度洗脱,外标法定量。结果表明,两种氨基酸在0.500~50.0μg/mL浓度范围内线性良好(R≥0.999),回收率为95.3%~105%,RSD为0.95%~3.22%。方法用2种蛋白标准品进行酶切效率与实测含量验证,准确度良好(δ<10%),可用于FSMP中Asn和Gln含量检测,并正在用于制定食品安全国家标准。

阴离子交换高效液相色谱法测定婴幼儿食品与乳品中的核苷酸

建立了阴离子交换高效液相色谱测定婴幼儿食品和乳品中5种游离核苷酸———胞嘧啶核苷酸(CMP)、腺嘌呤核苷酸(AMP)、尿嘧啶核苷酸(UMP)、鸟嘌呤核苷酸(GMP)、次黄嘌呤核苷酸(IMP)的分析方法。样品经水提取和沉淀剂沉淀蛋白质后,采用强阴离子交换(SAX)色谱柱分离,以甲醇和磷酸二氢钾水溶液(10 mmol/L,p H 4.5)为流动相进行梯度洗脱,紫外检测波长254 nm,外标法定量。结果表明,该方法在0.200~200 mg/L范围内线性关系良好,5种核苷酸的相关系数(r)为0.999 8~1.000 0,加标回收率为95.5%~108%,相对标准偏差(RSD)为1.0%~3.2%。该方法的分离效果好,线性范围宽,稳定性和准确性好,解决了依据GB 5413.40-2016进行样品检测时的基质干扰问题。

龙虾壳中红色素提取工艺的研究

用乙醇回流溶解龙虾壳中的红色素,通过加入1mo1/L盐酸使浓缩液中的红色素沉淀,经静置、分层,得到虾红素沉淀,低温干燥,得到产物。实验结果表明,该提取工艺简单,用时较短,产率高,色泽鲜艳。

酿造食醋中碳、氧同位素比值的测定及应用研究

以酿造食醋为研究对象,建立元素分析/连续流-稳定同位素比质谱法(EA/Gas BenchⅡ-IRMS)测定食醋总碳、水中氧同位素比值(δ^(13)C和δ^(18)O)的方法。通过优化稀释倍数与进样体积,得到δ^(13)C值测定最佳条件为食醋稀释2倍,进样体积1.0μL;通过优化平衡时间和样品体积,得到δ^(18)O值测定时平衡时间为24 h,样品体积为500μL。结果表明,在最佳条件下,食品样品碳同位素比测定值标准偏差(SD)值均<0.30‰,氧的同位素比测定值的SD值均<0.10‰,表明该测定方法的稳定性较好。山西食醋总碳δ^(13)C值分布在-23.26‰^-20.80‰,水中氧的δ^(18)O值在-5.66‰^-4.49‰;镇江食醋总碳δ^(13)C值在-25.93‰^-20.70‰,水中氧的δ^(18)O值在-8.35‰^-5.61‰;结合碳氧同位素比值分析,可以将山西老陈醋、镇江香醋和镇江陈醋区分开(P<0.01)。

三维滤袋法测定食品中的膳食纤维

建立了三维滤袋法快速测定食品中膳食纤维的方法。样品经粉碎、混匀后过0.3 mm筛,当样品中脂肪含量不低于10%时,按照25 mL/g的比例加入石油醚洗涤;糖含量不低于5%时,按照25 mL/g的比例加入85%乙醇洗涤。采用膳食纤维仪对食品样品进行总膳食纤维、不溶性膳食纤维、可溶性膳食纤维的测定。测定结果的相对标准偏差为0.51%～3.35%;该法(x)与标准法(y)有良好的线性关系,y=0.988 0x+0.079 2,r^2=0.999 0,该法与标准法测定结果的相对误差为–3.75%～4.45%。该法操作简单、快速,结果准确,适用于大批量食品样品中膳食纤维的测定。

改良的蛋白质电泳考马斯亮蓝染色方法研究

旨在建立简便、经济、灵敏以及质谱兼容的蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳染色法,在胶体考染(Blue Silver)配方(0.12%的考马斯亮蓝G-250,10%的磷酸,10%的硫酸铵,和20%的甲醇)的基础上,通过优化凝胶固定时间与染色液中各物质用量,得到改良的染色液配方(0.1%的考马斯亮蓝G-250或R-250,5%的磷酸,5%的硫酸铵,10%的甲醇)及简便的操作步骤。试验对比结果显示,改良方法一与胶体考染相比仍保持了较高的染色灵敏度以及较好的质谱兼容性,且有机试剂使用量更少,染色深度与蛋白质量的线性关系也更好。

圌山瑞气何时还

滚滚长江东逝,一山障流而立。沿三国名城镇江顺流而下三十公里处,“地形临渚断,江势触山回”,有峭崖突兀壁立万仞,峰峦叠翠关山横亘,这就是丹徒境内的江南名山——圌山。

液相色谱-同位素比值质谱法测定食醋中乳酸和乙酸的δ^(13)C值

建立液相色谱-同位素比值质谱联用技术(LC-IRMS)测定食醋中乳酸和乙酸碳同位素比值δ^(13)C的方法。样品经沉淀剂沉淀蛋白质和C18固相萃取(SPE)净化后,采用Zorbax SB-Aq(250 mm×4. 6 mm,5μm)耐水反相色谱柱分离,用0. 3 mL/min 0. 05%H3PO4水溶液洗脱,柱温30℃。样本范围内,山西老陈醋和镇江香醋的乳酸和乙酸δ^(13)C值范围分别为-23. 40‰～-22. 39‰,-19. 52‰～-15. 16‰和-28. 06‰～-20. 81‰,-28. 28‰～-26. 90‰,白醋和米醋的乙酸δ^(13)C值范围分别为-29. 53‰～-18. 98‰和-29. 49‰～-13. 87‰。对4类食醋的乳酸和乙酸δ^(13)C值进行单因素方差分析,结果表明可以有效区分山西老陈醋、镇江香醋、白醋和米醋。该方法可应用于食醋产品标识的真实性鉴别研究中。

UPLC-MS/MS法测定食品中的4种木酚素

建立超高效液相色谱-串联质谱法同时测定食品中4种木酚素(包括亚麻木酚素、芝麻素、芝麻林素和芝麻酚)的分析方法。试样采用含1 mol/L氢氧化钠(NaOH)的70%乙醇水溶液提取,盐酸调节pH至4~4.5,用70%乙醇水定容。以甲醇和0.1%甲酸水为流动相梯度洗脱,经C18色谱柱分离;采用电喷雾电离源,正离子模式(ESI+),选择反应监测模式扫描(SRM),外标法定量。结果表明:4种木酚素在0.040~10μg/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数R在0.9995~0.9999之间;相对标准偏差(RSD)为1.0%~3.1%;在50~2.00×103 mg/kg的加标浓度范围内,回收率为95.0%~101%。亚麻木酚素、芝麻酚、芝麻素、芝麻林素的检出限分别为0.1,0.1,0.03和0.1 mg/kg。该方法分离效果好,灵敏度和准确度高,简单快速,适用范围广。

超高效液相色谱-线性离子阱-高分辨质谱同步检测果蔬及饮料中花青素

建立超高效液相色谱联用线性离子阱高分辨质谱(UPLC-LTQ-Orbitrap-HRMS)同时检测果蔬及饮料中6种花色苷和6种花色素。样品经5%(V/V)甲酸甲醇溶液超声提取30 min后,过膜上机。采用Hypersil GOLD C18色谱柱(100 mm×2.1 mm i.d,1.9μm)分离,流动相为1%(V/V)甲酸水溶液和1%(V/V)甲酸乙腈溶液,梯度洗脱,流速0.3 mL/min;电喷雾电离源,正离子模式,扫描范围(m/z):100~1000。考察了方法线性范围、检出限、定量限、重现性和回收率。结果表明:12种花青素在0.0424~19.9μg/mL范围内线性相关系数均≥0.9951,回收率范围在61.9%~112.7%之间。方法检出限(S/N=3)在1.73~8.18 ng/mL之间,定量限(S/N=10)为5.77~27.3 ng/mL。12种花青素质量误差≤2.14×10-6,72 h内相对标准偏差≤7.8%。

高效液相色谱法测定常见食物中β-胡萝卜素含量

采用高效液相色谱法测定300多种市售主食食材中β-胡萝卜素含量,具体条件：色谱柱为Agilent Zobrax SB-C18（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相条件为：含0.4 g/L抗坏血酸的甲醇/乙腈/三氯甲烷（84/12/4）溶液（避光储存）;流速1.5 m L/min;柱温：30℃;检测波长：450 nm,进样体积10μL,外标法定量。结果表明该方法在0.50020.0μg/mL质量浓度范围内线性良好,相关性系数R=0.999 9,RSD=2.4%,方法检出限为0.2 mg/kg,回收率为78.7%96.4%。该方法整体操作简单,线性范围好,结果可靠。该方法通过高效液相色谱法完成了300多种深圳市售主食材中β-胡萝卜素含量测定,首次建立β-胡萝卜素含量数据库,并与我国现有的胡萝卜素含量数据库和美国β-胡萝卜素含量数据库进行了比较。

HPLC法同时测定植物样品中3种甾醇含量

建立高效液相色谱法(HPLC)同时测定植物样品中麦角甾醇、胆甾醇和豆甾醇的方法。样品经皂化、萃取后,用紫外检测器进行测定。优化后的色谱条件为:Shim-pack CLC ODS色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5.0μm);流动相采用纯甲醇;检测波长205 nm和282 nm,流速1.0 mL/min;柱温35℃;进样量10μL。检测方法显示, 3种甾醇在1.00～200 mg/L的线性范围内相关系数R^2>0.999,方法精密度RSD<0.5%(N=6),在加标浓度为20.0～200 mg/kg条件下,加标回收率93.6%～103.4%(N=6),检出限(S/N=3) 3.0～6.0 mg/kg,定量限(S/N=10) 10～20 mg/kg。

HPLC法同时测定金银花等样品中6种绿原酸异构体的含量

目的:建立HPLC法同时测定茶叶、枸杞叶、地瓜叶、咖啡、金银花中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸A和异绿原酸C的含有量。方法:采用50%甲醇溶液为提取剂,超声波辅助提取30 min,提取液的分析采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1%甲酸溶液,梯度洗脱;流速1.0 mL/min,进样量10μL,检测波长327nm,柱温30℃。结果:6种绿原酸异构体在0.50~50 mg/L范围内线性关系良好(r>0.9995),检出限1.1~1.5 mg/kg,定量限3.7~5.0 mg/kg;在不同植物样品基质中平均加样回收率93.5%~102%,RSD>3.17%。结论:该方法简便,重复性好,准确度高,可用于植物样品中绿原酸及其异构体的含量测定及产品质量控制。

我国特殊医学用途配方食品配套检验方法标准现状及展望

目的梳理分析我国特殊医学用途配方食品(特医食品)产品标准配套的检验方法标准现状。方法针对特医食品的限量要求,分析研究我国特医食品配套检验方法标准的匹配性和适用性。结果已发布的相关方法标准基本可以匹配特医食品限量要求,主要涉及GB 5009、GB 5413和GB 4789系列方法标准。个别指标存在方法缺失或不适用的情况。结论我国基本上建立了较完善的标准方法配套于特医食品的限量要求,可有效服务于特医食品的生产和监管。建议在相关方法标准制定修订中考虑特医食品基质的特殊要求,探索合理的管理模式,以期更好地服务于特医食品产业发展和行业监管。

柱前衍生-液相色谱法同时测定婴幼儿配方乳粉中左旋肉碱与右旋肉碱

目的 建立可同时测定婴幼儿配方乳粉中左旋肉碱和右旋肉碱含量的柱前衍生-高效液相色谱法,并探讨其关键点。方法 样品中的肉碱经稀盐酸提取,碱皂化,乙腈沉淀蛋白,固相萃取柱净化和衍生后,采用C色谱柱分离,紫外检测器检测,外标法定量。结果 左旋肉碱和右旋肉碱在0.2~10μg/mL范围内均呈良好线性关系,相关系数r分别为0.999 9和0.999 4;该方法在三个加标水平下的平均回收率为87.14%~96.96%;检出限和定量限分别为0.6和2 mg/100 g。本方法中碱的用量、固相萃取柱及净化操作、衍生剂溶剂、衍生反应过程为关键点。结论 本方法快速、准确、便于批量处理,能够满足左旋肉碱和右旋肉碱分离和含量测定的需求,且左旋肉碱的含量测定结果与酶分光光度法无显著性差异。

镇江举办系列活动纪念米芾逝世900周年

今年是北宋著名的书画艺术家米芾逝世900周年。由江苏省文学艺术界联合会、中共镇江市委宣传部、中共镇江市丹徒区委员会、镇江市丹徒区人民政府联合主办,江苏省美术家协会、江苏省书法家协会、镇江市文学艺术界联合会、镇江市丹徒区长山文化建设领导小组、镇江市丹徒区文学艺术界联合会共同承办的"纪念米芾逝世900周年——当代中国书画名家作品邀请展"