激素对鼻息肉组织肿瘤坏死因子α、血管内皮生长因子表达的影响

目的:探讨肿瘤坏死因子(TNF)α、血管内皮生长因子(VEGF)在鼻息肉组织中的表达,以及全身应用糖皮质激素对两种细胞因子表达水平的影响。方法:采用免疫组化SP法,检测鼻息肉组织在糖皮质激素治疗前和治疗后TNF α、VEGF的表达,运用HPIAS 1000高分辨率彩色图像分析系统分别对治疗前、后鼻息肉组织的粘膜上皮细胞、腺上皮细胞、血管内皮细胞、粘膜下浸润炎性细胞、细胞间基质进行光密度测定分析。结果: ① TNF α在鼻息肉粘膜上皮细胞、血管内皮细胞、腺上皮细胞、粘膜下浸润炎性细胞均有阳性表达;VEGF在粘膜上皮细胞、血管内皮细胞、腺上皮细胞、粘膜下浸润细胞、基质有阳性表达;②激素治疗后 TNF α、VEGF表达下降,其中 TNF α在血管内皮细胞表达下降,治疗前后有显著性差异。VEGF表达在治疗前、后无明显差异。结论:全身应用激素可能通过以下机制起到治疗鼻息肉的作用:①降低鼻息肉组织中 TNF α、VEGF的含量,影响鼻息肉形成的微环境,改变其它细胞因子的表达从而调节上皮细胞的增生、血管的生成及通透性;②降低TNF α在鼻息肉血管内皮细胞的表达,减弱粘附分子、吸附分子的作用从而减轻嗜酸性粒细胞在鼻息肉组织的浸润。

正常大鼠听觉中枢四种氨基酸类神经递质测定

目的探讨并比较听觉中枢四种氨基酸类神经递质的含量。方法选取成年SD大鼠20只,采用日立835-50型氨基酸自动分析仪分别测定其耳蜗核、下丘和听皮层中r-氨基丁酸(gamma-aminobutyric acid,GABA)、甘氨酸(glycine,Gly)、谷氨酸(glutamic acid,Glu)及天冬氨酸(aspartate,Asp)的含量。结果听皮层与耳蜗核相比,GABA的含量差异无统计学意义(P>0.05),听皮层、耳蜗核分别与下丘相比,其含量差异均有显著统计学意义(P<0.01);听皮层与下丘相比,Gly的含量差异无统计学意义(P>0.05),听皮层、下丘分别与耳蜗核相比,其含量差异均有显著统计学意义(P<0.01);下丘与耳蜗核相比,Glu的含量差异无统计学意义(P>0.05),下丘、耳蜗核分别与听皮层相比,其差异均有显著统计学意义(P<0.01);听皮层、下丘及耳蜗核三者间相互比较,Asp的含量差异均无统计学意义(P>0.05)。结论听觉中枢的不同部位GABA、Gly及Glu的含量各异,可能与其神经元的活性不同有关,反映了脑神经元的功能状态。

Nd:YAG激光照射鼓膜对听觉功能影响的实验研究

目的 :探讨不同功率Nd :YAG激光照射鼓膜对内耳结构和功能的影响。方法 :应用光纤末端功率为 8W、6W、4W的Nd :YAG激光针对豚鼠作鼓膜照射 2s。采用听性脑干反应、耳蜗基底膜铺片及扫描电镜技术 ,观察激光照射前后 (分即刻及饲养 2周后 )ABR阈值及形态学变化。结果 :所用激光功率与内耳损伤程度成正相关 ,3组ABR阈值在即刻和饲养 2周后均升高 ,8W、6W组均较 4W组升高明显 ,8W、6W组照射后 2周ABR阈值较照射前差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,但 4W组 2周后恢复明显 ,与照射前差异无显著性。照射后立即取材的耳蜗毛细胞形态改变的结果 :即刻 8W、6W组耳蜗外毛细胞出现肿胀 ,硝酸银浓染 ,血管纹血管扩张 ,4W组无明显改变。饲养 2周后 ,8W组外毛细胞平均损失达 45 % ,6W组平均损失 2 0 % ,以上两组内毛细胞亦有少量缺失 ,4W组内、外毛细胞形态基本正常。结论 :本实验提示 :采用Nd :YAG激光治疗中耳疾病时 ,其光纤末端输出功率应控制在 4W ,时间为 2s为宜 ,否则可能会导致不可逆的听力下降。

耳蜗性听力减退合并视神经萎缩一例

耳蜗性听力减退合并视神经萎缩一例肖伯奎，王金前，陆尔科我科于１９９５年５月诊治耳蜗性听力减退合并视神经萎缩１例患儿，曾先后就诊于眼科、内科及我科。因本病例实属罕见，现报告如下。ｌ病例资料１．１一般资料患儿，男性，１３岁，自觉听力进行性下降伴视力急骤减...

鼻中隔偏曲两侧窦口鼻道复合体解剖变异的差异

目的 探讨鼻中隔偏曲患者两侧窦口鼻道复合体 (ostiomeatalcomplex ,OMC)的解剖变异。方法 对 10 3例不同部位鼻中隔偏曲的患者作鼻内窥镜检查和鼻窦冠状位、轴位CT扫描 ,比较两侧OMC解剖变异发生率和鼻窦炎发病率的差异。结果 偏曲对侧中、下鼻甲肥大的发生率明显高于同侧 (P <0 .0 5 ) ,筛泡和鼻丘气房的宽度也明显大于同侧 (配对t检验 ,P <0 .0 1) ;中鼻甲反常曲线偏曲同侧的发生率明显高于对侧 (配对t检验 ,P <0 .0 1) ,其它解剖变异偏曲两侧差异无显著性。偏曲两侧鼻窦炎的发病率差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 鼻中隔偏曲可能引起偏曲对侧中鼻甲及鼻腔外侧壁结构的代偿性改变 ,这种改变可能在偏曲对侧鼻窦炎的发病中起着一定的作用。

鼓室内注射地塞米松治疗伴眩晕的全聋型突发性聋的疗效分析

目的探讨鼓室内注射地塞米松治疗伴眩晕的全聋型突发性聋的可行性及疗效。方法回顾性分析38例(38耳)伴眩晕的全聋型突聋患者的临床资料,将38例(38耳)伴眩晕的全聋型突聋患者分为两组,鼓室注射组30例(30耳),给予鼓室内注射地塞米松0.3ml,每日一次或隔2～3天一次,疗程14.76±7.33天,其中注射3～5次4例,6～10次15例,11～28次11例;对照组8例(8耳),给与静脉注射地塞米松10mg/天,3天后减半,疗程10.25±2.55天;两组患者均同时接受改善耳蜗微循环、营养神经等常规全身用药,比较两组疗效并分析鼓室注射组注药次数与疗效的关系。结果治疗后,鼓室注射组0.25～8kHz气导纯音听阈平均值由101.73±12.19dB HL下降为84.80±20.87dB HL,对照组由115.50±4.38dB HL降为109.25±16.57dB HL。鼓室注射组治疗后痊愈0例,显效6例,有效12例,无效12例,总有效率为60.00%(18/30);对照组患者治疗后痊愈0例,显效1例,有效0例,无效7例,总有效率为12.50%(1/8)。鼓室注射组患者疗效与鼓室内注药次数正相关,注药次数越多,疗效越好,注药次数超过10次组的总有效率可高达81.82%(P<0.05)。结论鼓室内注射地塞米松是治疗伴眩晕的全聋型突聋的有效方法,且注药次数越多,疗效越好。

短发夹RNA沉默hTERT基因对人喉癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用

背景与目的:RNA干扰(RNAinterference,RNAi)是指双链RNA导入细胞后诱导靶mRNA发生特异性的降解,导致基因转录后沉默的现象。RNAi在基因功能和抗病毒基因治疗等方面均有报道。但对喉癌等头颈恶性肿瘤中高表达的人端粒酶逆转录酶(humantelomerasereversetranscriptase,hTERT)基因,目前尚未见报道。本课题利用RNAi技术,研究短发夹RNA(shorthairpinRNA,shRNA)抑制hTERT基因表达对裸鼠喉鳞状细胞癌皮下移植模型的抑瘤作用。方法:根据hTERTcDNA序列构建表达hTERTmRNA特异的、含荧光素基因的shRNA真核表达质粒pshRNA。建立人喉癌Hep-2细胞株裸鼠皮下接种模型。将pshRNA转染入荷瘤裸鼠瘤体内,观察肿瘤生长情况。以激光共聚焦显微镜观察质粒在瘤组织内的表达;以HE染色法观察质粒治疗后瘤组织的病理改变;以原位末端标记法(TUNEL法)检测肿瘤细胞的凋亡情况;以免疫组化SP法检测hTERT蛋白在肿瘤内的表达;光镜下观察心、肝、肾、脾结构的改变并测量血液学和血液生化指标。结果:pshRNA组(A组)、空质粒载体组(B组)与生理盐水组(C组)之间比较,A组与C组瘤体积有显著性差异(P<0.01),B组与C组之间瘤体积无显著性差异(P>0.05),抑瘤率为76.50%。pshRNA及空质粒载体转染入瘤体后,共聚焦显微镜下见大量的癌细胞表达绿色荧光。病理学检查及TUNEL检测发现:A组肿瘤生长受到抑制,细胞分裂相少见,可见大量肿瘤细胞坏死及凋亡,该组肿瘤细胞的凋亡指数[(26.47±4.25)%]明显高于B组[(3.40±1.41)%]和C组[(2.73±1.35)%]。给予pshRNA后瘤体内hTERT蛋白表达明显下调,而且对心、肝、肾、脾无明显损害,对造血系统无影响。结论:表达shRNA的DNA载体质粒沉默hTERT基因可显著抑制人喉癌裸鼠肿瘤的生长,而且对心、肝、肾、脾及造血系统无明显的毒副作用。

头颈部鳞癌及癌旁组织端粒酶活性研究

目的：研究原发头颈部鳞癌及相应癌旁组织中端粒酶活性表达，并探讨其作为头颈部鳞癌分子生物学标志物的可能性。方法：采用TRAP－PCR－ELISA法对32例原发头颈部鳞癌及15例相应癌旁组织进行端粒酶活性的定性和定量检测。结果：原发头颈部鳞癌组端粒酶活性值明显高于癌旁组（P＜0．05）。低分化组端粒酶活性值明显高于中高分化组（P＜0．01）。Ⅰ、Ⅱ与Ⅲ期端粒酶活性值有显著差异（P＜0．05）。鼻咽组端粒酶活性值明显高于下咽组（P＜0．05）。淋巴结阳性组端粒酶活性值高于淋巴结阴性组，但无统计学意义。癌和癌旁组织均为阳性者，癌和癌旁组织端粒酶活性值无差异（P＞0．05）。结论：端粒酶活化与头颈部鳞癌的发生发展有密切关系，其活化是早期事件，与临床指标关系密切，可望成为头颈部鳞癌早期诊断、治疗和判断预后的分子生物学标志物。

水杨酸钠急慢性注射致豚鼠耳蜗形态学的改变

目的 :研究水杨酸钠对豚鼠耳蜗形态学改变的急慢性作用。方法 :采用单次和长期注射水杨酸钠建模分别在光镜、电镜 (扫描、透射 )下观察 1次及多次注射水杨酸钠组和生理盐水对照组豚鼠耳蜗基底膜Corti器 ,特别是外毛细胞形态的改变。结果 :以相应的生理盐水组为对照 ,急性水杨酸钠注射 2h主要引起透射电镜下豚鼠外毛细胞侧壁表面下池发生扩张性空泡形成 ;慢性水杨酸钠注射 2周主要引起豚鼠外毛细胞在透射电镜下出现表面下池肿胀、扩张、空泡形成 ,以及透射和扫描电镜下均出现静纤毛柔软、弯曲。结论 :急慢性水杨酸钠注射引起豚鼠耳蜗形态学改变可能为耳蜗功能改变的原因 。

α-氰基丙烯酸酯医用胶在几丁质室修复兔颞骨内面神经缺损中的应用

目的 探讨α-氰基丙烯酸酯医用胶应用于几丁质室修复颞骨内面神经缺损神经固定的可行性及神经再生的效果。方法 成年大耳白兔 4 8只 ,左耳颞骨内面神经缺损均用几丁质室桥接 ,固定颞骨内面神经的方法为实验组采用α-氰基丙烯酸酯医用胶粘合法 ,对照组采用缝合法及自然放置法。术后 1、3个月进行功能测试和组织形态学研究。结果 医用胶粘合作用强 ,能将颞骨内面神经固定于几丁质室内而不引起几丁质室变形、豁裂 ;粘合法神经再生成功率高 ,再生神经纤维排列整齐、密集 ,功能恢复良好 ,优于缝合法和自然放置法。结论 几丁质室修复兔颞骨内面神经缺损应用α-氰基丙烯酸酯医用胶固定颞骨内面神经切实可行 ,方法简便、省时 。

RNA干扰hTERT基因治疗喉鳞状细胞癌的实验研究

目的:探讨RNA干扰hTERT(人端粒酶逆转录酶)基因对人喉鳞状细胞癌的治疗作用。方法:根据hTERTcDNA序列构建表达hTERTmRNA特异的、含荧光素基因的shRNA真核表达质粒pshRNA1、pshRNA2。将shRNA质粒分别转染人喉癌Hep-2细胞株及荷瘤裸鼠瘤体内。以激光共聚焦显微镜观察质粒在Hep-2细胞及瘤体内的表达;以MTT法观察质粒对Hep-2细胞增殖的抑制作用;以蛋白印迹法(Westernblot法)检测Hep-2细胞中hTERT蛋白的表达;以免疫组化SP法检测裸鼠瘤体内hTERT蛋白的表达。结果:pshRNA1、pshRNA2转染Hep-2细胞及pshRNA1转染瘤体后,共聚焦显微镜下见大量的癌细胞表达绿色荧光,hTERT蛋白表达明显下降。细胞受pshRNA1、pshRNA2转染后,其生长活性受到明显抑制。体内抑瘤实验表明,与空质粒载体组(pshRNA4)和生理盐水组相比,pshRNA1组移植瘤生长明显受到抑制。结论:表达shRNA的、hTERT基因特异的真核表达质粒能有效转染体内、外喉鳞癌细胞,并可有效抑制人喉鳞癌细胞的生长,为今后应用RNA干扰基因治疗喉癌提供重要的实验参考。

鼻中隔偏曲下鼻甲肥大组织病理学观察

目的 :观察并比较鼻中隔偏曲伴偏曲对侧减充血剂敏感的粘膜性下鼻甲肥大病人两侧下鼻甲固有层血管的结构特点。方法 :对 4 0例该病病人行中隔矫正术前 ,在鼻内窥镜下于两侧下鼻甲前 1 3处切取组织。采用光镜、透射电镜 ,观察下鼻甲固有层血管的结构特点。结果 :光镜 :偏曲对侧较同侧下鼻甲粘膜固有层窦状隙数目相对增多 ,血管壁平滑肌细胞密度相对增加。透射电镜 :偏曲对侧较同侧下鼻甲粘膜固有层结缔组织胶原纤维明显增多。粘膜上皮下毛细血管及腺体周围毛细血管的内膜具有窗格样空隙 ,小静脉内皮基底膜及平滑肌细胞呈高度多孔性 ;窦状隙为排列不规则的血管间平滑肌纤维围绕。粘膜上皮下毛细血管及腺体周围毛细血管内皮细胞及窦状隙平滑肌细胞内线粒体肿胀、基质变少 ,出现空泡 ,嵴少而短 ,甚至消失。结论

不同过敏原对变应性鼻炎患者症状及生活质量影响的比较

目的探讨武汉地区常见过敏原——尘螨和艾蒿所致的变应性鼻炎(AR)患者之间的症状严重程度以及对患者生活质量影响的差异。方法选取经血清变应原特异性IgE(sIgE)检测的单一对尘螨过敏的变应性鼻炎患者46例、单一对艾蒿过敏的变应性鼻炎患者39例。用症状视觉模拟评分量表(VAS)评价患者症状的严重程度;用鼻结膜炎相关生活质量问卷(RQLQ)评价患者的生活质量。通过对调查结果的分析判断,对比2种不同过敏原所致变应性鼻炎患者VAS和RQLQ评分,并初步计算同种过敏原不同性别之间、同性别不同过敏原间患者症状及生活质量影响的差异。结果对尘螨过敏的变应性鼻炎患者在VAS得分各方面均较艾蒿组高,其中2组之间鼻部症状差异有统计学意义(P<0.05),眼部以及胸部症状差异无统计学意义(P>0.05)。尘螨组及艾蒿组内男性和女性之间各项症状差异均无统计学意义(P>0.05);两过敏原组之间男性和男性、女性和女性相比,除鼻部症状差异有统计学意义(P<0.05)外,其余症状差异无统计学意义(P>0.05)。RQLQ评分两过敏原组差异无统计学意义(P>0.05),尘螨组及艾蒿组内男女之间相比除鼻炎相关行为和情感反应项目得分差异有统计学意义(P<0.05)外,其余生活质量评分项目差异无统计学意义(P>0.05);两过敏原组之间男性和男性,女性和女性相比各项生活质量评分差异均无统计学意义(P>0.05)。结论由尘螨和艾蒿所致的变应性鼻炎患者的症状存在差异,尘螨所致的变应性鼻炎患者症状较重;这2种过敏原均影响变应性鼻炎患者的生活质量,但两者之间无明显差异。

p16、细胞周期蛋白D1和pRb在头颈部鳞癌的表达及其意义

目的：探讨 p16、细胞周期蛋白 D1（ cyclinD1）和 pRb在头颈部鳞癌（ head and neck squamous cell carcinoma, HNSCC）的表达及他们的相互关系和其意义。方法：应用免疫组织化学方法检测 32例原发 HNSCC患者癌组织中 p16、 cyclinD1和 pRb的蛋白表达。结果： p16、 cyclinD1、 pRb的总异常率为 90.6％（ 29/32），其中 p16和 pRb蛋白表达缺失分别为 62.5％（ 20/32）和 34.4％（ 11/32）， cyclinD1过表达为 34.4％（ 11/32）。 p16与 pRb呈负相关性（

清醒和麻醉状态下豚鼠畸变产物耳声发射检测比较

为了观察豚鼠在麻醉和清醒状态的畸变产物耳声发射 (DPOAE)。我们以 DPOAE幅值和 I/ O曲线作为参数 ,观察清醒和麻醉状态下其参数的变化。结果发现豚鼠在清醒状态下其 DPOAE幅值和 I/ O曲线斜率与正常剂量麻醉状态下相比无显著性差异 (P>0 .0 5 )。我们认为在清醒状态下豚鼠 DPOAE的检测同麻醉状态相比 ,操作简便、结果稳定 ,更接近于生理状态。

人胶原和自体脂肪声带注射的实验研究

目的探讨国产人胶原狗声带注射的组织学转归及其在矫治声门闭合不全中的应用价值和前景。方法实验动物分为４组，Ａ组２只分别注射人胶原和自体脂肪矫正左侧声带麻痹引起的声门闭合不全，并对治疗效果进行主、客观观察，术后５个月取材，透射电镜观察。Ｂ、Ｃ、Ｄ组９只狗（每组３只）于右侧声带注入人胶原、左侧声带注入自体脂肪各０．３ｍｌ，分别于术后１、３、５个月取材并观察其组织学变化和体积变化。结果自体脂肪能在声带组织中存活，但吸收率很高，１、３、５个月体积平均减少速度为３８．５１％，疗效不能持久。人胶原易于注射，组织相容性好，并能被宿主成纤维细胞和血管移生，同时伴有宿主胶原的再生，显示出最终被宿主组织完全取代的趋势，１～５个月体积平均减少速度为０．６５％。矫治效果长期稳定。结论自体脂肪应用有局限性，只能作为短期的声带植入材料；人胶原可用于各种原因所致声门闭合不全的长期矫治材料，具有良好的应用前景。

44例慢性咽炎细菌学分析

目的 初步研究慢性咽炎的细菌学特征。方法 取各种类型的慢性咽炎的咽后壁分泌物进行细菌培养及药敏试验。结果 4 4例病人中 ,2 9例报告正常菌群生长 ,1 5例 (34.0 9%)出现细菌学异常 ,其中 ,副流感嗜血杆菌 8例、肺炎克雷伯杆菌 2例、产气肠杆菌 1例、流感嗜血杆菌 2例、肺炎链球菌 1例、卡他莫拉菌 1例。多数菌株对青霉素及氨苄青霉素耐药 ,而头孢菌素对各种细菌的敏感性较好 ,其他抗生素对各种细菌的敏感性较分散 ;细菌检出率与病人各主要症状、体征的轻重无明显相关性。结论 细菌感染不是慢性咽炎的主要病因 ,但慢性咽炎的病人可出现细菌学异常 ,必要时应根据药敏选用适当抗生素配合治疗。

人工室修复颞骨内面神经缺损后神经再支配的实验研究(英文)

目的通过测试再生神经及肌肉的功能,探讨人工室修复颞骨内面神经缺损后神经再支配情况。方法选用48只成年大耳白兔,以随机数字表法分成2组,横断左侧颞骨内面神经,神经近远端分别用几丁质管和硅胶管桥接,术后1月、3月和5月进行面部行为学观察以及电生理检查。结果两种人工室5月组比3月组睑裂缩小、上唇自发运动有力、叩鼻后长须更明显偏向外侧、电极刺激神经后面肌收缩剧烈。术后3月,几丁质组(Ch)和硅胶组(Si)与正常(N)比较,两组神经诱发电位的潜伏期(IP)较长、动作电位波幅(AMP)较低,神经-肌肉传导速度(NMCV)较慢,有显著性差异(F=72.93-95.16,P<0.01)。术后5月,差距减小,但仍有显著性差异(F=4.144-5.773,P<0.05)。神经电生理显示随着修复时间的延长,潜伏期逐渐缩短,动作电位波幅逐渐增高,神经—肌肉传导速度逐渐增快,两种人工室之间无显著性差别。结论人工室修复颞骨内面神经缺损神经肌肉功能恢复良好,肌肉重获神经再支配。

大鼠单侧耳蜗损毁对听皮层γ氨基丁酸能神经元分布的影响

目的研究大鼠单侧耳蜗损毁前、后不同时期听皮层中γ氨基丁酸能神经元的分布及数量。方法应用免疫组化SP法行听皮层中γ氨基丁酸能神经元分布的检测。结果γ氨基丁酸能神经元广泛分布于听皮层中。听皮层γ氨基丁酸能神经元的体积较大、着色也较深。听皮层中γ氨基丁能酸神经元的数目:术后1～2周手术对侧明显低于手术侧(P<0.01),术后3周上升,但仍少于手术侧,至术后1个月,手术对侧略少于手术侧,且差异无显著性(P>0.05)。结论单侧耳蜗损毁前后,γ氨基丁酸能神经元的分布在听皮层中呈一明显的动态变化过程,术后γ氨基丁酸能神经元的数目明显下降,随时间的推移逐步回升,提示γ氨基丁酸能神经元数目的增减可能为听觉中枢的重组所必需。

颞骨内面神经缺损几丁质室修复的实验研究

目的 探讨几丁质室修复颞骨内面神经缺损的可行性。方法 采用生物材料几丁质室桥接兔骨内面神经缺损 2 4只 (侧 ) ,硅胶室作为对照组 2 4只 (侧 ) ,术后 1、3和 5个月对再生神经分别进行大体观察、电生理测试、组织学检查以及数字形态学分析。结果 ①术后 3个月 ,近端神经纤维已通过几丁质室进入远端神经 ,术后 5个月 ,新生神经更显成熟 ;②神经诱发电位显示再生神经传导功能恢复良好 ,实验组和对照组之间差异无显著性 ;③再生神经均以有髓神经纤维为主 ,轴突发育良好 ,超微结构显示髓鞘板层明暗相间、结构清晰 ,轴浆细胞器丰富 ;④术后 5个月 ,几丁质组再生神经纤维面积恢复率、轴突面积恢复率及轴突数目恢复率均达 71%以上 ,与硅胶组比较差异均无显著性。结论 几丁质室修复颞骨内面神经缺损可取得良好的再生效果。