槲皮素对口腔癌Tca-8113细胞增殖、迁移和侵袭的影响及PI3K/AKT信号通路的调控作用

目的研究槲皮素对Tca-8113细胞增殖、迁移和侵袭功能的影响及PI3K/AKT通路的调控作用。方法体外培养Tca-8113细胞,将细胞分为对照组和槲皮素(50μmol/L)处理组。采用CCK-8实验检测细胞增殖能力;Transwell(添加基质胶)检测细胞迁移(侵袭)情况;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中PTEN、AKT、FOXO1以及BCL2L11 mRNA表达,蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测FOXO1、p-FOXO1、AKT、p-AKT、PTEN和BCL2L11蛋白表达。结果与对照组相比,槲皮素处理组Tca-8113细胞的增殖、迁移及侵袭能力显著降低,PTEN和BCL2L11 mRNA和蛋白表达水平均显著上调(P<0.05),FOXO1和AKT磷酸化水平显著下调(P<0.01),但AKT和FOXO1 mRNA表达水平无显著差异。结论槲皮素可抑制Tca-8113细胞增殖、迁移及侵袭,其机制可能是槲皮素促进PTEN的表达,负调控PI3K/AKT通路减弱FOXO1的磷酸化水平,引起BCL2L11的表达增加实现的。

中国地鼠口腔鳞状细胞癌相关的长链非编码RNA差异表达谱建立及应用

目的 筛选中国地鼠口腔鳞状细胞癌组织样本中具有差异表达的长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA),预测其靶基因,探究靶基因的生物学功能及富集的信号通路。方法 采用二甲基苯并蒽涂抹法建立中国地鼠口腔鳞状细胞癌模型,高通量测序技术构建LncRNA差异表达谱,生物信息学技术筛选差异表达的LncRNA并进行靶基因预测,GO与KEGG富集分析分别预测靶基因的生物学功能及富集的信号通路。结果 与正常组织样本相比,口腔鳞状细胞癌组织样本中筛选出54个显著差异表达LncRNA(31个上调,23个下调)。功能性分析表明:与口腔癌相关的GO条目73条;KEGG富集的信号通路25条。结论 中国地鼠口腔鳞状细胞癌样本中差异表达的LncRNA可能通过靶向调控其靶基因参与调控多种生物学功能及口腔癌相关的信号通路,在口腔鳞状细胞癌形成过程中可能发挥重要作用。

中国仓鼠口腔鳞癌miR-504的表达特征分析

目的构建中国仓鼠口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma, OSCC)动物模型,研究miR-504在中国仓鼠OSCC动物模型的癌组织和癌旁舌组织中的表达特征。方法采用二甲基苯并蒽(DMBA)涂抹法诱导中国仓鼠OSCC模型,对OSCC中miR-504的前体序列克隆分析;提取癌组织颊囊和癌旁组织舌的总miRNA, qRT-PCR检测不同时间点(造模0周、6周、12周和18周)中国仓鼠颊囊和舌组织中miR-504的表达水平。结果颊囊黏膜在造模6周时出现轻度的充血,12周时黏膜增厚,18周时局部有白斑样病变和糜烂。与正常对照组相比,在6周、12周和18周时,miR-504在颊囊组织的表达水平分别增加约0.83、0.33,0.23倍(P<0.001);而在舌组织的表达水平变化分别约为正常舌组织的0.92、0.84、0.27倍(0.001<P<0.01)。结论 DMBA涂抹仓鼠颊囊组织建立的OSCC模型,癌组织中miR-504的表达量显著增加,miR-504与OSCC的发生发展密切相关,可能调控其靶基因及其下游的信号通路。本结果有助于了解miR-504在中国仓鼠OSCC各个阶段的癌组织和癌旁组织的差异表达特征。