基于HPLC-Q-TOF-MS/MS技术的蒙药安神补心六味丸化学成分辨识

目的:应用高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱(HPLC-Q-TOF-MS/MS)技术对蒙药安神补心六味丸的化学成分进行分析鉴定和分类归属。方法:采用Diamonsil^(ⓒ)C_(18)(2)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-0.05%甲酸水为流动相,梯度洗脱,流速0.5 mL/min,柱温40℃;采用电喷雾离子源,在正、负离子模式下进行数据采集,根据化合物的精确质荷比、二级质谱裂解碎片,结合对照品、文献数据的比对进行碎片裂解规律分析鉴定。结果:共鉴定出119个化合物,包括36个有机酸类、22个黄酮及其苷类、8个木脂素类、3个倍半萜内酯类、6个萜类、3个香豆素类、17个酚类、14个氨基酸类、4个醛类和6个其他类。结论:首次对蒙药安神补心六味丸的化学成分进行快速辨识,为其药效物质基础研究以及质量控制奠定了基础。

基于网络药理学和分子对接法探讨安神补心六味丸治疗冠心病的作用机制

目的:采用网络药理学和分子对接法探讨蒙药安神补心六味丸治疗冠心病(CHD)的分子作用机制。方法:通过文献挖掘、多个数据库检索收集整理并筛选安神补心六味丸的活性成分以及治疗CHD的相关靶点,运用Cytoscape 3.6.0构建“中药-活性成分-靶基因”网络,使用String数据库并结合Cytoscape 3.6.0筛选出关键靶点;通过DAVID数据库对潜在靶点进行功能及信号通路富集分析,利用Auto Dock Vina对成分和靶基因网络分析结果进行分子对接验证。结果:从安神补心六味丸中筛选得到52个活性成分,涉及CHD作用靶点141个,网络拓扑分析筛选出24个关键靶点,基因本体(GO)功能富集分析得到GO条目263个,京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析筛选得到29条信号通路,主要涉及亚油酸代谢、花生四烯酸代谢和Ras信号通路等。通过分子对接得到结合能≤-5 kcal·mol^(-1)的活性成分20个,与排名前6的关键靶点均有较好的亲和力。结论:安神补心六味丸中的活性成分鞣花酸、异鼠李素及柚皮苷等能作用于多个靶点和调控多条通路,对CHD可能具有治疗作用。

基于UPLC⁃Q⁃TOF⁃MS/MS技术分析蒙药黄芦木中的化学成分

目的:应用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱技术(UPLC⁃Q⁃TOF⁃MS/MS)对蒙药黄芦木醇提液的化学成分进行定性分析。方法:采用电喷雾离子化源,正、负离子全扫描模式,正离子模式下,以1mmol/L乙酸胺水⁃0.05%甲酸乙腈为流动相梯度洗脱;负离子模式下,以乙腈⁃水做流动相梯度洗脱。正负离子模式均采用Syn⁃ergiTM Fusion⁃RP100A色谱柱(2.0 mm×100 mm,2.5μm),柱温40℃,流速0.3mL/min。通过Peakview 2.2/Master⁃view 1.3软件,依据精确质量数和同位素峰度比确定分子式,通过Natural products HR⁃MS/MS Spectral Library 1.1数据库所含化合物和对照品的二级谱图裂解规律比对分析,结合文献报道,确定结构式。结果:从蒙药黄芦木醇提液中共分离出33个化合物,推断了28个化合物,其中包括17个生物碱、3个有机酸类、1个香豆素类、1个核苷类、1个苷类、2个环烯醚萜类、2个木脂素类、1个糖脂类化合物,其中通过与对照品对比鉴定了5个化合物,分别为小檗碱、小檗胺、药跟碱、巴马汀和木兰花碱。结论:UPLC⁃Q⁃TOF⁃MS/MS技术是鉴定中药成分的有效手段,该研究首次利用该技术对黄芦木的主要成分进行定性分析,为进一步研究蒙药黄芦木药效物质基础提供依据。

基于数据挖掘与网络药理学探讨中药方剂治疗心肌缺血的用药规律及分子机制

[目的]通过数据挖掘和网络药理学方法探索中药方剂治疗心肌缺血的用药规律与分子机制。[方法]在国家专利网筛选并纳入符合条件的治疗心肌缺血的中药方剂,对用药频次进行统计,采用软件R3.6.0对纳入方剂进行主成分分析、聚类分析和关联规则分析。选取用药频次≥50的药物,进行网络药理学方法分析。[结果]共纳入149首方剂包含309味中药,其中黄芪、丹参、三七、川芎四味药用药频率超过50,其中丹参药频最高。在主成分分析、聚类分析和关联规则分析中,以“补气养血,行气活血”的中药为主。运用网络药理学方法分析得到,药物靶点和疾病靶点的共同基因有64个,蛋白互作(PPI)结果显示,白细胞介素-6(IL-6)、血管内皮生长因子A(VEGFA)是互作关系最强的两个靶点,KEGG富集分析结果显示,AGE-RAGE信号通路(AGE-RAGE signaling pathway in diabetic complications)和动脉粥样硬化流体剪切力信号通路(Fluid shear stress and atherosclerosis)位列前二,GO功能分析结果以细胞因子、炎症因子、和血管功能和结构的改为主。[结论]中药治疗心肌缺血用药多以“补气养血、行气活血”为主,分子机制多以抗炎或改善血管功能为主。

基于平行人工膜渗透分析法对药物溶出/吸收仿生系统优化及其药物渗透性评价研究

目的基于平行人工膜渗透分析法(Parallel artificial membrane permeability analysis, PAMPA)对药物溶出/吸收仿生系统(Drug dissolution and absorption simulating system,DDASS)的生物膜系统进行改进,以单硝酸异山梨酯、奥美拉唑和氢氯噻嗪为工具药进行渗透性考察,建立一种快速、简便的药物渗透性考察方法,以期进一步提高DDASS系统对药物渗透性评价的效率和准确性,并对药物体内吸收百分率进行预测。方法以疏水性半透膜为载体,将1%大豆卵磷脂和0.1%胆固醇的正十二烷溶液涂于疏水性聚偏氟乙烯中空纤维膜上制备人工渗透膜,以人工渗透膜取代DDASS中的大鼠肠管,以BCS I类药单硝酸异山梨酯,BCS II类药奥美拉唑和BCS III类药氢氯噻嗪为工具药考察其在DDASS系统中经人工渗透膜的表观渗透系数(Papp),采用大鼠在体单向肠灌流法对上述3种药物的有效渗透系数(Peff)的测定,验证人工渗透膜对药物BCS归类的准确性。结果单硝酸异山梨酯、奥美拉唑和氢氯噻嗪基于PAMPA优化DDASS法测得Papp分别为(3.644±0.291)×10^-6、(2.391±0.020)×10^-6、(0.129±0.032)×10^-6cm/s;上述药物基于大鼠在体单向肠灌流法测得Peff分别为(37.69±2.67)×10^-5、(33.72±5.02)×10^-5、(14.37±1.66)×10^-5cm/s。三者的体内吸收百分率预测值分别为95.36%、65.76%、5.61%,与Papp呈正相关。结论基于DDASS优化PAMPA法对3种不同BCS分类药物渗透性的考察结果与大鼠在体单向肠灌流结果一致,均证明单硝酸异山梨酯与奥美拉唑为高渗透性药物,氢氯噻嗪为低渗透性药物,符合FDA对三者的BCS分类。表明基于DDASS优化PAMPA法考察药物渗透性,结果准确,简单方便,节约资源,体内吸收百分率预测值具有参考价值,为仿制药申请生物等效性豁免及为创新药物口服生物利用度研究提供了可靠的体外预测平台。

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术的扎冲十三味丸化学成分分析

扎冲十三味丸由13味中药组成,用于半身不遂、筋骨疼痛、风湿和关节疼痛等疾病,其化学成分及药效物质基础研究目前尚未报道。该实验采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱技术(UPLC-Q-TOF-MS/MS)对扎冲十三味丸的化学成分进行快速鉴定。采用Shim-pack GIST C_(18)色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm)进行分离,以甲醇和0.05%乙酸水为流动相进行梯度洗脱,电喷雾质谱检测,正、负离子模式下采集数据,通过化合物精确相对分子质量、质谱裂解规律以及结合对照品、文献报道的质谱数据进行化合物解析,并对各成分的来源进行归属,利用Peakview 2.2/Masterview 1.3软件,和Natural products HR-MS/MS Spectral Library 1.1数据库所含化合物和对照品的二级谱图裂解规律比对分析,共鉴定出98个化合物,包括19个有机酸类化合物、36个黄酮类化合物、13个挥发油类化合物、8个鞣质类化合物、5个2-(2-苯乙基)色酮类化合物、5个氨基酸类化合物、3个倍半萜类化合物、3个生物碱化合物、2个其他类化合物。该实验首次对扎冲十三味丸的化学成分进行快速表征,为其进一步的药效物质基础和质量评价奠定了基础。