人参皂甙Rg_1对培养心肌细胞钙通道阻滞作用的单通道分析

用细胞吸附（Ｃｅｌｌ－ａｔｔａｃｈｅｄ）的膜片钳（Ｐａｔｃｈｃｌａｍｐ）方法，在培养２４～４８ｈ的Ｗｉｓｔａｒ大鼠乳鼠心室肌细胞上，研究Ｒｇ１对心肌细胞钙通道的影响。由－７０ｍＶ的保持电位新跃至－１０ｍＶ诱发Ｔ型钙通道的活动，由－５０ｍＶ阶跃至＋１０ｍＶ诱发Ｌ型钙通道的活动，在－６０ｍＶ的保持电压下，记录Ｂ型钙通道的活动。向浸浴液中分别加入Ｒｇ１，钙通道阻断剂Ｖｅｒａｐａｍｉｌ，钙通道激动剂ＢａｙＫ８６４４，使其终浓度分别为５０μｇ／ｍｌ，３７．５μｇ／ｍｌ和５μｍｏｌ／Ｌ。记录加药前后三型钙通道的电活动。结果发现：Ｒｇ１可使三型钙通道的平均开放时间缩短，平均关闭时间延长，对三型钙通道的Ｂａ（２＋）流幅值无明显影响，其作用与Ｖｅｒａｐａｍｉｌ相似，与ＢａｙＫ８６４４相反。实验首次证明Ｒｇ１对心肌细胞钙通道有阻滞作用，其机制在于使钙通道的平均开放时间缩短，平均关闭时间延长，开放概率减小。

婴幼儿肺炎并心力衰竭发病机制的实验研究

目的观察肺炎时心肌细胞跨膜L型钙电流与细胞内Ca2+含量的动态改变,探讨肺炎并心衰的可能发生机制。方法取50日龄Wistar大鼠,经气管注入金黄色葡萄球菌,建立肺炎模型。急性酶解分离出右室心肌细胞。1.以Fluo-3-AM标记细胞内Ca2+,分为生理盐水对照组、接种后24、72h肺炎组,应用黏附细胞仪研究肺炎对静息和收缩状态下细胞内Ca2+含量的影响。2.另分接种后24、120h肺炎组及对照组,记录各组细胞膜L型钙电流。结果1.肺炎组24h静息状态心肌细胞内Ca2+含量无显著改变,而72h肺炎组显著增高(P<0.001);加入KCl后2.5min,24h肺炎组心肌细胞内Ca2+含量增加比率显著低于对照组(P<0.05),5.0、7.5、10.0min,两者无显著性差异。而72h肺炎组增加比率在前10min内均低于对照组。2.肺炎组与对照组24h电流峰值无差异,120h时则显著高于对照(P<0.001)。结论重症肺炎时右室心肌细胞发生钙代谢障碍,静息期心肌细胞内Ca2+浓度增高,而收缩状态下Ca2+含量增加比率下降,可能是心肌细胞舒张、收缩功能障碍的重要机制;心衰后期,心肌细胞钙内流增大,可能是病变发展的重要机制。

大鼠皮层神经元膜片钳单通道记录模型

目的：介绍我室建立的大鼠大脑皮层神经元膜片钳单通道记录模型。方法：大鼠大脑皮层神经元急性分离和膜片钳单通道记录技术。结果：急性分离的皮层神经元经鉴定成活良好，记录的Ｌ－，Ｎ－和Ｔ－型钙通道的单通道电活动与文献报道基本一致。结论：我室建立的膜片钳实验方法是可靠的。

烧伤中分子物质对豚鼠心肌线粒体膜流动性影响的实验研究

本文应用从正常和烧伤豚鼠血中提取的中分子物质(NMMS,BMMS),以不同浓度干扰豚鼠心肌线粒体,观察中分子物质对线粒体膜流动性的影响。结果表明,NMMS和BMMS,尤其是BMMS在一定浓度下显著抑制膜流动性。作者认为,BMMS参与了烧伤后心泵功能障碍的病理机制。

小哺乳动物心脏顺行性离体灌流技术

顺行性离体灌流心脏是在排除神经-体液因素对心脏的影响,左心室在确定的前、后负荷下做功的条件下,研究心脏各种固有特性(如收缩性、电生理特性、代谢活动等)的一种可靠方法,广泛应用于生理学、病理生理学、药理学的研究工作。本文着重介绍此项技术及其注意事项。

人参二醇组皂甙对大鼠皮层神经元钙通道的影响

目的研究人参二醇组皂甙（ＰＤＳ）对大鼠大脑皮层神经元膜Ｌ－型钙通道单通道电活动的影响。方法急性分离大鼠皮层神经元和细胞贴附膜片钳技术。结果ＰＤＳ（１．５ｇＬ－１）可明显缩短大鼠皮层神经元Ｌ－型钙通道的平均开放时间，延长其平均关闭时间，降低其开放概率，而对该通道的电流幅值无明显影响，其作用与经典钙通道阻断剂ｖｅｒａ－ｐａｍｉｌ相似但较弱。结论ＰＤＳ对大鼠皮层神经元Ｌ－型通道有明显阻滞作用。

缺血预适应对未成熟大鼠心肌线粒体及能量代谢的影响

目的研究内源性心肌保护机制一缺血预适应（Ｉｓｃｈｅｍｉｃ－ｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ，ＩＰＣ）对未成熟心肌线粒体及能量代谢的 影响，并探讨其作用机制。方法采用改良Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ－Ｎｅｅｌｙ离体鼠心灌流装置，建立未成年大鼠（４周龄）离体心脏顺 行灌注左心作功模型。３６只大鼠随机等分为缺血对照组（ＮＣ）、Ｓｔ．ＴｈｏｍａｓⅡ晶体停搏液组（ＳＴ）、预缺血加停搏液组 （ＰＩ）。比较再灌注后各组心功能（ＬＷＳＰ，ＬＶＥＤＰ，±ｄｐ／ｄｔｍａｘ，ＣＯ）的恢复率；测定缺血前、再灌注后线粒体游离钙（Ｃａ２＋）、 丙二醛（ＭＤＡ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）及心肌ＡＴＰ含量；观察再灌注后心肌及线粒体超微结构的变化。结果 ＩＰ组心 功能指标的恢复率明显好于ＳＴ组和ＮＣ组（Ｐ＜０．０５）；再灌注后ＳＴ组、ＮＣ组心肌线粒体Ｃａ２＋、ＭＤＡ含量明显增高， ＳＯＤ含量明显减少（Ｐ＜０．０５），而 ＩＰ组则无明显变化；ＩＰ组、ＳＴ组 ＡＴＰ含量无显著差别，均明显高于 ＮＣ组；ＳＴ组、ＮＣ 组心肌及线粒体超微结构破坏明显，ＩＰ组则仅有轻微改变。结论Ｓｔ．ＴｈｏｍａｓⅡ晶体停搏液能减轻未成熟心肌能量损耗， 但对心肌线粒体的保护作用较小，影响了?

严重烧伤早期大鼠心室乳头肌细胞内钾离子浓度及动作电位的变化

健康成年Ｗｉｓｔａｒ大鼠４０只，随机分为５组：正常对照组和烧伤后第１ｈ、３ｈ、８ｈ和２４ｈ组。应用Ｋ￣＋离子选择性微电极和普通玻璃微电极技术结合微型计算机进行分析的方法，观察严重烧伤（３５％ＴＢＳＡⅢ°烧伤）早期大鼠心室乳头肌细胞内Ｋ￣＋浓度和动作电位的变化。结果表明：与对照组相比：①大鼠烧伤后２４ｈ内心室肌细胞内Ｋ￣＋浓度、动作电位幅度、静息电位和零期最大去极化速率均显著降低，烧伤后８ｈ达最低值，２４ｈ有所恢复；②动作电位复极化时程ＡＰＤ＿（５０）和ＡＰＤ＿（９０）均在烧伤后３ｈ和８ｈ显著缩短，ＡＰＤ＿（１０）仅在烧伤后８ｈ明显缩短，２４ｈ三者均基本恢复。提示：烧伤早期主要影响心室肌细胞快钠通道和Ｋ￣＋通道，抑制Ｎａ￣＋内流，促进Ｋ￣＋外流。

1,6-二磷酸果糖对放射损伤、烧伤及放烧复合伤早期心功能的影响

目的：观察１，６－二磷酸果糖（１．６－ＦＤＰ）对放射损伤、烧伤及放烧复合伤早期心功能的影响。方法：应用离体心脏灌流技术，观察伤后立即及伤后３ｈ腹腔注射１，６－ＦＤＰ，对放射损伤、烧伤及放烧复合伤损伤后８ｈ心功能的变化。结果：ＦＤＰ对放射损伤、烧伤及放烧复合伤损伤后心功能均有不同程度改善。结论：ＦＤＰ的心功能保护作用可能与其改善心肌能量代谢有关。

烧伤血浆中分子物质对豚鼠心肌线粒体膜流动性的影响

生物膜流动性的改变,可以影响物质转运、能量代谢等许多功能。为了探讨烧伤血浆中分子物质(burned middle molecular substances,BMMS)对心泵功能抑制作用的机理,本研究观察了不同浓度BMMS及正常血浆中分子物质(normal middle molecular substances,NMMS)对正常豚鼠心肌线粒体膜流动性的影响,并与35％体表Ⅲ度烧伤后8h豚鼠心肌线粒体膜流动性的变化相比较。

放射损伤、烧伤及放烧复合伤时大鼠心肌细胞膜ATP酶的变化

放射损伤、烧伤及放烧复合伤时大鼠心肌细胞膜ＡＴＰ酶的变化ＣｈａｎｇｅｓｉｎｍｙｏｃａｒｄｉａｌｍｅｍｂｒａｎｅＡＴＰａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙａｆｔｅｒｒａｄｉａｔｉｏｎ，ｂｕｒｎａｎｄｃｏｍｂｉｎｅｄｒａｄｉａｔｉｏｎ┐ｂｕｒｎｉｎｊｕｒｙｉｎｒａｔｓ...

高钙对烧伤早期豚鼠离体心脏固有收缩性的影响

为了探讨烧伤早期心肌固有收缩力降低的机制,本实验观察了35％体表面积Ⅲ度烧伤后8小时,灌流豚鼠离体心脏对高钙溶液(含Cacl_2 3.2mmol/L台氏液)的反应及对Ca^(2+)的消耗量。结果表明,烧伤组在高钙液灌流情况下,左心室内压的±dp/dtmax、心室肌细胞动作电位幅度,最大去极化速率.复极化50％的时程缩短程度均低于对照组(P<0.05);对常钙或高钙灌流液中Ca^(2+)的交换量,烧伤组也显著低于对照组(P<0.01)。提示烧伤早期心肌细胞对Ca^(2+)的摄取、利用,心肌细胞电位对Ca^(2+)的反应均低于正常,这可能是此期心肌固有收缩性和舒张功能显著降低的重要原因之一。

1,6-二磷酸果糖对烧伤大鼠心功能和血液流变学的影响机制

为了对严重烧伤后心泵功能的降低进行有效的防治，本文选用Ｗｉｓｔａｒ大鼠２４只，观察１，６－二磷酸果糖（ＦＤＰ）对烧伤大鼠离体心脏功能和血液流变特性的影响。结果显示，应用ＦＤＰ后使血液流变学各参数：全血粘度、血浆粘度、红细胞压积、纤维蛋白原、血清总胆固醇、甘油三酯、以及红细胞膜的刚度指数、红细胞聚集指数均明显降低，而氧释放系数显著升高，与烧伤组相比差别显著，与对照组相比无明显差别。同时心脏功能的各项指标均由烧伤后的降低而逐渐恢复：心输出量、左心室内压及其变化速率、冠脉流量、主动脉压力均显著升高，与烧伤组相比有明显差别，与对照组相比差别不显著。提示ＦＤＰ通过改善血液流变特性，有效地恢复全身的机能状态和微循环功能，并增强红细胞的运氧能力。ＦＤＰ还能促进ＡＴＰ的生成，增加心肌细胞的能量供应，从而提高心肌收缩力，增加心输出量，使受伤后的心肌维持较好的血液流变学特性。ＦＤＰ能改善烧伤后的血液特性是烧伤休克早期心功能得以恢复的重要原因之一，从而为临床烧伤病人的抗休克治疗提供理论依据。

幼鼠实验性肺炎右室心肌细胞L型钙电流的记录

观察幼年大鼠发生肺炎时右心室心肌细胞膜L型Ca2 + 通道电流 ,研究肺炎合并心力衰竭时心肌细胞钙代谢改变。取 5 0日龄Wistar大鼠 ,分别经气管注入金黄色葡萄球菌和无菌生理盐水 ,建立肺炎模型和对照。急性酶解分离出右室心肌细胞 ,采用全细胞式膜片钳方法 ,对接种后 2 4h、12 0h的肺炎组和相应对照组分别记录右室心肌细胞L型Ca2 + 通道电流。 2 4h肺炎组心肌细胞L型Ca2 + 通道电流大小无显著改变 ,而 12 0h肺炎组通道电流显著增大 ,两组电流曲线的峰电位和激活电位均无改变。实验表明 ,肺炎早期右室心肌细胞膜L型Ca2 +通道电流无明显改变 ,中后期明显增大 。

严重烧伤对豚鼠心肌细胞内K+浓度的影响

目的：探讨严重烧伤早期心泵功能降低的机理。方法：用自制Ｋ＋－ＩＳＭＥ检测正常及３５％体表Ⅲ度烧伤后１、３、８、２４ｈ豚鼠心肌细胞内Ｋ＋浓度的变化。结果：严重烧伤早期心肌细胞内Ｋ＋浓度降低。结论：烧伤后心肌细胞内Ｋ＋浓度降低是静息电位和动作电位幅值降低的直接原因，也是导致心脏收缩及舒张功能降低的主要因素之一。

幼鼠肺炎合并心衰的分子机制研究

目的 从细胞和分子水平揭示婴幼儿肺炎合并心衰的机制。方法 健康清洁级5 0日龄Wistar大鼠,经气管注射金黄色葡萄球菌菌液,建立肺炎动物模型;开胸获取心脏,进行双心室灌流,测定心肌酶谱和心功能指标;酶解分离出单个右室心肌细胞后,以Fura- 2 / AM负载细胞并对静息和收缩状态时细胞内[Ca2 + ]i进行荧光测定;采用全细胞式膜片钳技术记录右室心肌细胞L型钙电流;采用高效液相色谱仪测定心肌组织腺苷酸含量。均采用气管内注射等量生理盐水的同龄Wistar大鼠作为对照。结果 1肺炎组动物心肌酶谱显著增高。2肺炎组和对照组的左、右心室功能均随前负荷升高而增强;在同一负荷下,右心室功能均低于对照组。3静息状态下肺炎组右室心肌细胞内[Ca2 + ]i随病程显著增高;收缩时Ca2 +含量增加比率显著低于对照组。4接种后2 4小时的肺炎组L 型钙通道电流峰值无显著变化;12 0小时显著高于对照组。5接种后12 0小时,心肌组织腺苷酸含量显著低于对照组。结论 采用气管内接种的方法所建立肺炎动物模型是有效的;肺炎可以合并心衰,尤其是右心衰竭为主;重症肺炎时心肌细胞出现能量代谢障碍;静息期心肌细胞内[Ca2 + ]i增高,而收缩状态下Ca2 + 含量增加比率下降,可能是心肌细胞舒张、收缩功能障碍的重要机制;心衰后期,心肌细胞跨?

一种多用小动物离体心脏灌流装置的研制及应用

目的：探讨一种新的多用小动物离体心脏灌流装置。方法：通过２６例大鼠同时离体左室顺行灌流两鼠双心脏，探讨该灌流装置的适用性。结果：灌流心脏在０～３ ｈ 内各心功能指标均无明显变化。结论：本多用小动物离体心脏灌流装置满足医学科研实验的要求，具有极高的推广应用价值。

烧伤休克期心泵功能降低的机理

烧伤休克期心泵功能降低是心输出量减少的重要原因之—.本文探讨烧伤休克期在体心泵功能的时程变化,并从影响心泵功能几个方面阐述心泵功能降低的机理。烧伤休克期心泵功能降低主要是由有效循环血容量减少,心肌抑制因子和(或)烧伤毒素、高血镍、冠脉血流不足、神经系统的负性变力作用、溶酶体酶释放、心肌固有收缩性降低等几种因素综合作用所致。

严重烧伤早期心肌细胞动作电位和ATP酶活性的变化

为研究严重烧伤早期心肌细胞动作电位 (AP)和ATP酶 (ATPase)活性的变化 ,用玻璃微电极记录大鼠离体心室乳头肌细胞AP ,用差速离心和蔗糖密度梯度离心分离心肌细胞膜 ,用钼蓝比色定磷法测定总ATPase、Mg2 + ATPase和Na+ K+ ATPase活性。结果 :与对照组相比 ,①烧伤后各组静息电位、AP振幅和 0相最大去极化电位均降低 ,以伤后 8h最显著 ,分别为 - 6 4± 2vs - 87± 2mV ,88.4± 0 .0 5vs 12 3.1± 2 .8mV ,88± 9vs 2 33± 37V/s,P均 <0 .0 1,伤后 2 4h有所恢复。②AP复极化时程 (APD)缩短 ,以APD50 和APD90 缩短明显 ,烧伤后 3h和 8h二者均显著缩短 ,8h尤为明显 ,而APD10 仅伤后 8h稍缩短 ,且APD10 、APD50 和APD90 于烧伤后 2 4h已基本恢复正常 ;③伤后 8h大鼠心肌细胞膜总ATPase、Mg2 + ATPase和Na+ K+ ATPase活性均显著下降。结论 :烧伤早期主要影响Na+ 、K+ 离子流 ,Na+ 、K+ 内流均被抑制 ,K+