单分子实时测序在HLA基因分型中的应用初探

目的 分析单分子实时(SMRT)测序技术判断HLA基因型、单体型的准确性,以探讨该方法应用于临床的可行性。方法 留取19例需行肾移植的患者血液标本,提取DNA后利用SMRT测序技术检测样本基因序列,并利用PCR-SBT方法验证其准确性。结果 SMRT技术可鉴定出19例样本的HLA基因型和基因单体型,且结果与PCR-SBT方法相符。1和14号样本PCR-SBT方法的C位点结果存在模棱两可现象,结果为HLA-C*03:02/04;03:03/132,SMRT技术可直接区分,结果为HLA-C*03:02:02,03:03:01。另外,SMRT方法在1号样本的B位点发现新的HLA等位基因。结论 SMRT测序技术应用于HLA高分辨率分型具有高度准确性,在HLA单体型分析具有精准定位多个长间距突变位置的独特优势。

微流控凝胶法与柱凝集法在血型检测中的比较

目的探索微流控凝胶法在ABO血型正定型及Rh血型抗原检测方面的准确性、灵敏度、特异性。方法选择1005例临床用血患者作为研究对象,分别采用微流控凝胶法与柱凝集法进行ABO正定型及Rh血型抗原检测,比较两种方法的阳性符合率、阴性符合率及总符合率,以及在不同疾病与年龄患者中的符合情况;同时运用χ^(2)检验、Kappa检验分析两种方法有无统计学差异。结果与柱凝集法相比较,微流控凝胶技术在ABO正定型与Rh血型抗原检测中的符合率分别为99.70%、98.61%,鉴定结果不符17例,其中血液系统疾病5例,肿瘤3例,感染科疾病4例,其他5例,其中既往有输血史6例,有孕产史7例;经统计学分析两种方法的检测结果没有显著差异(P>0.05,Kappa值>0.75)。结论微流控凝胶法具有样本及试剂消耗少、检测卡体积小、操作便捷等优点,在ABO血型正定型及Rh血型抗原检测中的灵敏度高、特异性好、结果准确,有望在临床检测中推广。